【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于微生物，具体涉及一种亮盖灵芝菌株l4914及其栽培方法与应用。
技术介绍
1、
2、灵芝 ganoderma lucidum，是灵芝属的重要种类之一。因其菌盖漆状高光泽，菌肉洁白，多糖和三萜等活性成分含量高，被视为高品质的灵芝种类，已被多个国家药典收录。目前，灵芝在全国各地有批量栽培，主要栽培品种为灵芝 g. lucidum“lingzhi”和紫芝 g. sinensis，栽培方式有段木栽培和代料栽培2种，栽培技术日趋成熟，产量逐年递增，取得了良好的经济和社会效益。由于灵芝菌种制作和培养要求较高，在实际生产过程中，菌种易污染、菌种质量参差不齐和作坊式不规范生产导致栽培后不能正常出菇、出菇畸形和死菇的现象时常发生，子实体品质和产量不够稳定。栽培品种配套生产、栽培季节和出菇管理要求等关键技术规范欠缺，最终严重影响灵芝产量和生物转化率，阻碍了灵芝栽培产业的大规模推广。
3、本申请的灵芝属菌株是在云南省楚雄州南华县采集并分离的新菌种，经研究，未见该菌种的研究报道。
技术实现思路
1、本专利技术的目的是为了解决现有技术的不足，提供一种亮盖灵芝菌株l4914及其栽培方法与应用。
2、为实现上述目的，本专利技术采用的技术方案如下：
3、一种亮盖灵芝菌株l4914，已于2023年10月31日保藏于中国广
4、本专利技术同时提供上述亮盖灵芝菌株l4914的栽培方法，包括如下步骤：
5、步骤（1），无菌条件下，取亮盖灵芝菌株l4914组织，接种到pda培养基上，密封放置于22℃-25℃的培养箱恒温培养至菌落长满培养皿；
6、步骤（2），将步骤（1）培养好的菌丝块接种于灭菌后的摇瓶种培养基中，于25℃下培养5天-8天，即得到种子液；
7、其中，摇瓶种培养基为：玉米粉或玉米淀粉1%-1.5%，葡萄糖1.9%-2.1%，蛋白胨0.2%-0.3%，酵母粉0.3%-0.5%，磷酸二氢钾0.09%-0.11%，三氯化铁0.058%-0.062%，余量为水，ph自然；
8、步骤（3），将步骤（2）得到的种子液接种至发酵液培养基中，培养7天-10天，得到液体菌种；
9、其中，发酵液培养基为：黄豆粉2.0%-2.5%、酵母粉0.29%-0.31%、蛋白胨0.19%-0.21%、葡萄糖1.9%-2.1%、三氯化铁0.09%-0.11%、磷酸二氢钾0.09%-0.11%，余量为水，ph6.2-7.0；
10、步骤（4），将步骤（3）培养好的液体菌种接种至栽培袋中，置于22℃-26℃培养室中暗培养至菌丝长满栽培袋，暗培养时，保持空气湿度60%-65%；
11、栽培袋中栽培基质包括按照质量分数计的如下组分：杂木屑77份-79份、麦麸19份-21份、蔗糖0.9份-1.1份、石膏粉0.9份-1.1份；含水量55%-60%
12、步骤（5），将步骤（4）培养好的栽培袋运至经济林下覆土栽培，覆土后进行出芝管理；待子实体长至成熟时进行采收。
13、进一步，步骤（1）中，取边长为1cm-1.5cm立方体形的灵芝菌株l4914组织接种到pda培养基中；培养5d-8d至菌落长满培养皿。
14、进一步，步骤（2）中，取边长为1cm-1.5cm立方体形的菌丝块4块-6块接种于500ml-1000ml的三角摇瓶培养基中。
15、进一步，步骤（3）中，种子液按0.95%-1.05%的体积比接种至发酵液培养基中。
16、进一步，步骤（4）中，暗培养25天-30天至菌丝长满栽培袋；液体菌种的接种体积与每袋栽培基质干料的质量比为10ml：550g。
17、进一步，步骤（5）中，出芝管理时，控制温度为18-28℃，空气相对湿度为80%-90%。
18、进一步，步骤（5）中，在经济林下覆土栽培的具体方法为：选取背阴保水，林木郁闭度为0.6-0.7的经济林地块，地上挖出30cm-32cm深，95cm-105cm宽的沟槽，长度依林木而定，林木稀疏且不能挖沟的地方挖出30cm-32cm深、39cm-41cm长、15cm-18cm宽的畦，将步骤（4）培养好的栽培袋上表面菌袋袋肩处开2cm-3cm小孔竖立放到沟槽或畦中，覆土2cm-4cm栽培。
19、本专利技术还提供上述亮盖灵芝菌株l4914的菌丝体、发酵液或子实体在制备抗肿瘤的药物或安神促睡眠药物中应用。
20、本专利技术中，栽培袋发菌完成后经10d-15d的后熟养菌，便开始栽培进入出芝阶段管理，此时应提高空气相对湿度至80%-90%，促使芝蕾形成。覆土后保持畦床湿润，控制温度在18℃-28℃，覆土10d-15d即有幼芝出土。
21、本专利技术中，灵芝成熟采收标准为：灵芝菌盖停止生长，菌盖边缘一圈嫩黄色或白色生长圈全部消失，单子实体由浅红褐色变为深红褐色，菌盖开始革质化，菌盖下面的管孔开始向外喷射担孢子，孢子释放且颜色加深时及时采收。采收时可用锋利的刀片切割菌柄，留下0.5cm左右基部，采收后及时清除根部的培养料和杂质，并在采收后1d-2d内坚持喷水，加强保湿通风管理，使菌丝尽快恢复生长，促进菌蕾形成，一共可采收2批-3批。
22、本专利技术亮盖灵芝菌株l4914含有较高含量的灵芝多糖和灵芝三萜类化合物。采用中国药典2020年版一部灵芝，第196页，灵芝多糖测定、灵芝三萜测定（以齐墩果酸计）的检测方法进行检测，野生灵芝菌株l4914多糖含量为1.07%，三萜含量为2.37%，栽培灵芝菌株l4914多糖和三萜含量得到了明显的提升，其多糖含量为1.20%，三萜含量为2.90%，灵芝多糖具有广泛的药理活性，能降血糖，降血脂，抗血栓，抗氧化，清除自由基，抗衰老，抗辐射，抗肿瘤，促进血流循环，调节免疫，调节核酸、蛋白质代谢，促进dna合成，促进人体脐血lak细胞增殖。灵芝三萜类化合物具有抗炎、镇痛、镇静、抗衰老、毒杀肿瘤细胞、抗缺氧等作用。
23、本专利技术亮盖灵芝菌株l4914的分子标记，基于基因组测序结果开发ssr引物，分子标记的pcr扩增引物为yllz02ssr-02，所述的引物序列为：5'-caagtacgagacggcggtg-3'，5'-tggttgcgcatgtactcgat-3'。
24、本专利技术提供的灵芝菌株l4914是通过野生灵芝分离获得，其特点在于子实体性状优、高产、栽培稳定性高、出菇率高、菌盖漆状光泽度高、高转化率等特点。担孢子椭圆形、浅黄褐色，双层壁，外壁平滑，内壁表面有粗糙的点状纹饰，大小为10.0-13.5×7.0-9.0μm。生产周期短，栽培袋生长周期25-40天，平均出菇周期87天。2021-2023年在昆明市盘龙区、楚雄州武定县、保山市腾冲共种植“灵芝菌本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种亮盖灵芝菌株L4914，其特征在于，已于2023年10月31日保藏于中国广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号GDMCC No：63947。
2.权利要求1所述的亮盖灵芝菌株L4914的栽培方法，其特征在于，包括如下步骤：
3.根据权利要求2所述的亮盖灵芝菌株L4914的栽培方法，其特征在于，步骤（1）中，取边长为1cm-1.5cm立方体形的灵芝菌株L4914组织接种到PDA培养基中；培养5d-8d至菌落长满培养皿。
4.根据权利要求2所述的亮盖灵芝菌株L4914的栽培方法，其特征在于，步骤（2）中，取边长为1cm-1.5cm立方体形的菌丝块4块-6块接种于500mL-1000mL的三角摇瓶培养基中。
5.根据权利要求2所述的亮盖灵芝菌株L4914的栽培方法，其特征在于，步骤（3）中，种子液按0.95%-1.05%的体积比接种至发酵液培养基中。
6.根据权利要求2所述的亮盖灵芝菌株L4914的栽培方法，其特征在于，步骤（4）中，暗培养25天-30天至菌丝长满栽培袋；液体菌种的接种体积与每袋栽培基质干料的质量比为10m
7.根据权利要求2所述的亮盖灵芝菌株L4914的栽培方法，其特征在于，步骤（5）中，出芝管理时，控制温度为18℃-28℃，空气相对湿度为80%-90%。
8.根据权利要求2所述的亮盖灵芝菌株L4914的栽培方法，其特征在于，步骤（5）中，在经济林下覆土栽培的具体方法为：选取背阴保水，林木郁闭度为0.6-0.7的经济林地块，地上挖出30cm-32cm深，95-105cm宽的沟槽，长度依林木而定，林木稀疏且不能挖沟的地方挖出30cm-32cm深、39cm-41cm长、15cm-18cm宽的畦，将步骤（4）培养好的栽培袋上表面菌袋袋肩处开2cm-3cm小孔竖立放到沟槽或畦中，覆土2cm-4cm栽培。
9.权利要求1所述亮盖灵芝菌株L4914的菌丝体、发酵液或子实体在制备抗肿瘤的药物或安神促睡眠药物中应用。
...【技术特征摘要】
1.一种亮盖灵芝菌株l4914，其特征在于，已于2023年10月31日保藏于中国广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号gdmcc no：63947。
2.权利要求1所述的亮盖灵芝菌株l4914的栽培方法，其特征在于，包括如下步骤：
3.根据权利要求2所述的亮盖灵芝菌株l4914的栽培方法，其特征在于，步骤（1）中，取边长为1cm-1.5cm立方体形的灵芝菌株l4914组织接种到pda培养基中；培养5d-8d至菌落长满培养皿。
4.根据权利要求2所述的亮盖灵芝菌株l4914的栽培方法，其特征在于，步骤（2）中，取边长为1cm-1.5cm立方体形的菌丝块4块-6块接种于500ml-1000ml的三角摇瓶培养基中。
5.根据权利要求2所述的亮盖灵芝菌株l4914的栽培方法，其特征在于，步骤（3）中，种子液按0.95%-1.05%的体积比接种至发酵液培养基中。
6.根据权利要求2所述的亮盖灵芝菌株l4914的栽培方法，...
【专利技术属性】
技术研发人员：李树红，李娥贤，何俊，吴晓蕖，罗红梅，
申请(专利权)人：云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所，
类型：发明
国别省市：
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