10-脱乙酰基巴卡丁III的纯化过程制造技术

本发明专利技术的主题涉及一种用于分离10‑脱乙酰基巴卡丁III的离心分配色谱(CPC)方法，其中将含有10‑脱乙酰基巴卡丁III的待纯化溶液在至少一个CPC工序步骤中进行纯化，并且在CPC工序步骤期间使用以下之一作为溶剂混合物：MEK/水、MTBE/丙酮/水和DCM/MeOH/水。本发明专利技术的主题还涉及用该方法生产的10‑脱乙酰基巴卡丁III溶液。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】10-脱乙酰基巴卡丁III的纯化过程
本专利技术的主题涉及一种分离10-脱乙酰基巴卡丁III的方法，以及以这种方法产生的10-脱乙酰基巴卡丁III溶液。
技术介绍
已经从属于二萜类的紫杉烷类化合物开发出了一些抗癌化疗药物，其广泛使用的实例包括多西他赛、卡巴他赛和紫杉醇，其中多西他赛和紫杉醇被列入WHO认为的最重要的药物清单(2016年WHO基本药物标准清单)。它们的工业生产可以使用自然方法，或使用半合成或合成的方法进行。紫杉醇也可以在自然界中发现，然而量非常少，因此其通常在合成时由天然前体产生。多西他赛和卡巴他赛是由天然紫杉醇前体合成产生的化合物。这些化合物的全合成是已知的(Danishefsky，1996)，其使用生物技术(Navia-Osorio，2002)进行生产，最近已开始发挥工业作用。这些化合物的前体是被称为式1的化合物10-脱乙酰基巴卡丁III(下文称为10-DABIII)：10-DABIII可以在几种紫杉树中发现并提取出来(例如TaxusBaccataandTaxusWallichianaspecies-(Németh-Kiss，1996))，但是以这种方式获得的物质含有过多的污染物。这些植物的许多部位(叶子、树枝、树皮)含有不同含量的这些物质，最经济的生产方法是从叶子中进行提取。然而，在制药工业中需要使用比这更纯的物质作为前体。初始材料的纯度由如图1和2中显示的色谱图表征(自己的测量值，TaxusBaccata(图1)和TaxusWallichiana(图2)提取物)。一些专利申请涉及10-DABIII化合物与其污染物的分离(例如专利申请US5969165A和US6002025A)。由于上述原因，纯化含有10-DABIII的混合物的主要目的是为了得到从制药工业的角度来看适当纯度的产品，其适合于多西他赛或紫杉醇的合成或生物合成。预期的纯度取决于紫杉醇的合成方法，但普遍预期高于98％或99％的纯度。已经进行了一些与10-DABIII化合物的合成生产有关的实验(Danishefsky，1996)。可以看出，用作制药工业前体的10-DABIII溶液可以用多种方式进行生产，然而，可以说以这种方式获得的溶液纯度不足。已知制备型高效液相色谱(prep-HPLC)方法可用于纯化10-DABIII溶液(参见例如专利申请号US5670673A)。这些工序的特征在于高性能，并且可以用它们生产纯度>98％的10-DABIII溶液，产率>60％。然而，这些方法通常涉及大量使用溶剂和吸附剂，这使得用于制药工业的10-DABIII的生产成本高昂。离心分配色谱(缩写为：CPC)是一种既高效又经济的色谱技术。一些专利申请涉及被污染的10-DABIII混合物的CPC纯化(例如参见美国专利号6,008,385和美国专利号5,723,635)。这些专利文献中公开的方法集中于某些污染物中提取物的纯化，使用它们不可能普遍去除所有污染物，因此使用这些方法不可能获得纯度>99％的10-DABIII产品(Margraff，1995)。在天然提取物的情况下，由于这些提取物的成分各不相同(取决于季节、物种和来源)，这是一个普遍的问题。因此，上述污染物的组成也各不相同，因此用于纯化的方法必须对这些变化是强有力的，这些要求不能通过上述专利中公开的方案得到满足。而且，根据这些专利的解决方案不能扩大规模，因此由于以下原因它们不适合于工业规模的纯化。在使用美国专利号6,008,385中公开的庚烷-乙酸乙酯-甲醇-水(1:2:1:2)体系时，乙酸乙酯会分解(其遇水水解并遇甲醇酯化)，因此CPC分离最重要的参数之一的溶剂的组成系统发生了变化。另一个问题是，在使用四组分体系的情况下，将再循环溶剂设定为其原始组成需要昂贵且成本高的仪器本底(气相色谱测试，KarlFischertitration)。在该专利中公开的另一种溶剂体系中，其使用甲基异丁基酮(MIBK)、丙酮和水的混合物，两相都具有高沸点。由于10-DABIII可以通过蒸发从纯化的部分中获得，并且10-DABIII是热敏材料，因此不推荐将其施加到高于40℃的温度或长时间的其他热负荷。在具有高沸点的溶剂的情况下，需要使用大的真空，然而，高于100-150mbar的真空用于工业生产代价太高。在该专利中公开的方法的情况下的另一个问题是，由于10-DABIII仅在加热时使用的溶剂体系中大量溶解，因此必须在每个样品注射循环之前减慢离心机的旋转，必须使用单独的泵注入样品，然后必须使离心机恢复到原来的速度，否则可能会因沉淀样品而发生堵塞的风险。由于工业离心机的巨大惯性，这种过程需要大量的能量和时间，并且在工业过程中，不允许存在堵塞的风险。此外，本专利技术的专利技术人也不能使用所提及的专利文献中公开的方法生产出纯度>99％的10-DABIII。其原因是，尽管该由甲基异丁基酮、丙酮和水的混合物组成的系统对污染物19-OH-10-DABIII具有极好的选择性，但其对其他污染物的选择性非常低。因此，如果后一种污染物的量很大，则在没有显著的产率损失的情况下无法实现它们的分离。
技术实现思路
根据以上所述，本专利技术的目的是提供一种克服现有技术中上述问题的CPC方法，即该方法不是针对特定的污染物，而是可以普遍用于清洗含有各种污染物的溶剂，并且与迄今为止满足制药工业需求的溶液相比，使用该方法可以以更高的纯度有效地纯化含有10-DABIII的混合物，此外该方法可以容易地在工业规模上使用。我们的目标是详细阐述这种方法。本专利技术的目的还在于提供适当纯度的10-DABIII溶液。我们的专利技术基于以下惊人的认识：在使用离心分配色谱(CPC)纯化含有10-DABIII的混合物时，如果使用MEK/水、MTBE/丙酮/水和/或DCM/MeOH/水的溶剂混合物，则可以实现以上目标。根据本专利技术，通过实施如权利要求1所述的CPC方法和提供如权利要求11所述的10-DABIII溶液来解决该任务。在从属权利要求中确定了本专利技术的各个优选实施例。本专利技术涉及一种用于分离10-脱乙酰基巴卡丁III的离心分配色谱(CPC)方法，其中将含有10-脱乙酰基巴卡丁III的待纯化溶液在至少一个CPC工序步骤中进行纯化，并且其中在CPC工序步骤期间使用以下之一作为溶剂混合物：MEK/水、MTBE/丙酮/水和DCM/MeOH/水。本专利技术的优选实施方案涉及用于分离10-脱乙酰基巴卡丁III的离心分配色谱(CPC)方法，其中将所述含有10-脱乙酰基巴卡丁III的待纯化溶液在至少两个CPC工序步骤中进行纯化，并且以一种在所述方法期间使用不同的溶剂混合物进行至少两个CPC工序步骤的方式，其中在每个CPC工序步骤期间使用以下之一作为溶剂混合物：MEK/水、MTBE/丙酮/水和DCM/MeOH/水。根据本专利技术的优选实施方案，将所述含有10-脱乙酰基巴卡丁III的待纯化溶液在至少三个CPC工序步骤中进行纯化，以一种在该方法期间使用不同的溶剂混合物进行至少三个CPC工序步骤的方式。根据本专利技术的另一个优选实施方案，在实施至少两个CPC步骤的纯化过程中，CPC步骤依次进行，而不插入其它纯化步骤。根据本专利技术的另一个不同的优选实施方案，其中实施至少两个本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.用于分离10‑脱乙酰基巴卡丁III的离心分配色谱(CPC)方法，其特征在于，将含有10‑脱乙酰基巴卡丁III的待纯化溶液在至少一个CPC工序步骤中进行纯化，并且其中在CPC工序步骤期间使用以下之一作为溶剂混合物：MEK/水、MTBE/丙酮/水和DCM/MeOH/水。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.12.11 HU P15006031.用于分离10-脱乙酰基巴卡丁III的离心分配色谱(CPC)方法，其特征在于，将含有10-脱乙酰基巴卡丁III的待纯化溶液在至少一个CPC工序步骤中进行纯化，并且其中在CPC工序步骤期间使用以下之一作为溶剂混合物：MEK/水、MTBE/丙酮/水和DCM/MeOH/水。2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，将所述含有10-脱乙酰基巴卡丁III的待纯化溶液在至少两个CPC工序步骤中进行纯化，并且以一种在所述方法期间使用不同的溶剂混合物进行所述至少两个CPC工序步骤的方式，其中在每个CPC工序步骤期间使用以下之一作为溶剂混合物：MEK/水、MTBE/丙酮/水和DCM/MeOH/水。3.如权利要求1或2所述的方法，其特征在于，将所述含有10-脱乙酰基巴卡丁III的待纯化溶液在至少三个CPC工序步骤中进行纯化，以一种在所述方法期间使用不同的溶剂混合物进行所述至少三个CPC工序步骤的方式。4.如权利要求2或3所述的方法，其特征在于，所述CPC工序步骤依次进行，而不插入其它纯化步骤。5.如权利要求2～4任一...

【专利技术属性】
技术研发人员：拉斯洛·洛兰特菲，拉斯洛·内梅特，
申请(专利权)人：罗塔克罗姆技术有限责任公司，
类型：发明
国别省市：匈牙利,HU