淡紫拟青霉的规模化制备方法技术

本发明专利技术涉及生物技术领域，包括如下步骤：将淡紫拟青霉菌株接种到灭菌后的液体培养基中进行种子培养得到液体种子；将所述的液体种子接种到以玉米芯粉为主要原料的固体培养基中进行固态发酵，所述的固体培养基经灭菌处理，接种量为1％－15％，得到发酵产物；将所述的发酵产物采用低温烘干后磨料制粉。本发明专利技术提供的淡紫拟青霉的规模化制备方法具有成本低、环境要求低和生产工艺简单的优点。

【技术实现步骤摘要】
淡紫拟青霉的规模化制备方法
本专利技术涉及生物
，具体涉及一种淡紫拟青霉的规模化制备方法。
技术介绍
本专利技术对于
技术介绍
的描述属于与本专利技术相关的相关技术，仅仅是用于说明和便于理解本专利技术的内容，不应理解为申请人明确认为或推定申请人认为是本专利技术在首次提出申请的申请日的现有技术。淡紫拟青霉(Paecilomyceslilacinus)是一种重要的生防农药，在人类的生活中起着重要的作用。目前淡紫拟青霉的制备方法对环境的要求较高，生产条件复杂，成本高，不利于大规模的生产。
技术实现思路
本专利技术实施例的目的是提供一种淡紫拟青霉的规模化制备方法，本专利技术提供的淡紫拟青霉的规模化制备方法具有成本低、环境要求低和生产工艺简单的优点，有利于淡紫拟青霉的规模化生产。本专利技术实施例的目的是通过如下技术方案实现的：本专利技术实施例提供了一种淡紫拟青霉的规模化制备方法，包括如下步骤：将淡紫拟青霉菌株接种到灭菌后的液体培养基中进行种子培养得到液体种子；将所述的液体种子接种到以玉米芯粉为主要原料的固体培养基中进行固态发酵，所述的固体培养基经灭菌处理，接种量为1％－15％，得到发酵产物；将所述的发酵产物采用低温烘干后磨料制粉。进一步的，所述的液体培养基由以下重量百分含量的原料制成：玉米粉0.01％－1％，脲0.01％－1％，葡萄糖0.01％－3％，硫酸铵0.01％－2％，磷酸氢二铵0.01％－2％，酵母粉0.01％－3％，余量为水。进一步的，所述的固体培养基干料由以下重量百分含量的原料制成：玉米芯粉25％－65％，麦麸5％－30％，玉米粉8％－40％，硫酸铵0.01％－2％；再将上述干料培养基与水以1：0.5－1：3的比例混合，使固体培养基的含水量为30％－75％，完成固体培养基配备。进一步的，所述的固态发酵包括第一固态发酵阶段和分盘发酵，所述的分盘发酵为：在所述的固态发酵中淡紫拟青霉进入快速生长期、温度上升到30℃以上时，将半成品曲料转移到不锈钢筛盘中继续发酵。进一步的，所述的第一固态发酵阶段温度为20－30℃，湿度为50％－70％。进一步的，所述的低温烘干的温度为25－45℃。进一步的，所述的液体培养基的灭菌条件为115℃条件下灭菌15min。进一步的，所述的固体培养基的灭菌处理为140－150℃灭菌0.01－0.2min。进一步的，制备过程中所采用的设备材质为纯不锈钢材料。借由上述方案，本专利技术淡紫拟青霉的规模化制备方法至少具有如下有益效果：采用玉米芯粉为主要原料的固态培养基中的蓬松度高，有利于水分的吸收和保持，从而大大降低了对培养环境湿度的要求。玉米芯粉来源于农产品废料、价格低廉。此外，将玉米芯粉变废为宝，极具应用前景和推广价值。生产效率高：分盘发酵增加了物料的表面积，利于供氧和废气排放，便于保温、保湿，便于随时观察和调整；同时，分盘培养对设备依赖度低，规模可大可小，便于复制和放大。采用本专利技术所述方法生产淡紫拟青霉，按国标GB20287检测方法计数其产孢量每克含50－80亿个活孢子，其室温贮藏18个月后孢子萌发率仍能达到93％左右。固态培养基中的硫酸铵和麦麸、玉米粉中的蛋白质等成分大大促进了玉米芯粉营养的优化，液态培养基中的脲也可增加玉米芯粉中的氮含量，促进营养的均衡，为淡紫拟青霉的生长提供了氮源，利于淡紫拟青霉的产孢子。固体培养基的灭菌采用的灭菌条件为140－150℃条件下灭菌0.01－0.2min，与常规的100℃灭菌40－60min相比，瞬间灭菌大大降低了长时间高温对培养基的影响，维生素等成分的保持率接近99％，而常规的灭菌方法会使培养基的营养损失很大。具体实施方式下面结合实施例对本专利技术进行进一步的详细介绍，应当理解，实施例是为了本领域技术人员更容易理解本专利技术的技术方案，而不能作为本专利技术保护范围的限定。在下述介绍中，术语“第一”、“第二”仅为用于描述的目的，而不能理解为指示或暗示相对重要性。下述介绍提供了本专利技术的多个实施例，不同实施例之间可以替换或者合并组合，因此本专利技术也可认为包含所记载的相同和/或不同实施例的所有可能组合。因而，如果一个实施例包含特征A、B、C，另一个实施例包含特征B、D，那么本专利技术也应视为包括含有A、B、C、D的一个或多个所有其他可能的组合的实施例，尽管该实施例可能并未在以下内容中有明确的文字记载。一种淡紫拟青霉的规模化制备方法，包括如下步骤：将淡紫拟青霉菌株接种到灭菌后的液体培养基中进行种子培养得到液体种子；将所述的液体种子接种到以玉米芯粉为主要原料的固体培养基中进行固态发酵，所述的固体培养基经灭菌处理，接种量为1％－15％，得到发酵产物；将所述的发酵产物采用低温烘干后磨料制粉。这里要说明的是：采用玉米芯粉为主要原料的固态培养基中的蓬松度高，有利于水分的吸收和保持，从而大大降低了对培养环境湿度的要求。玉米芯粉来源于农产品废料、价格低廉。此外，将玉米芯粉变废为宝，极具应用前景和推广价值。上述方案已经可以实现淡紫拟青霉的规模化生产过程成本低、环境要求低和生产工艺简单的目的，下面在此基础上给出优选方案。本专利技术对液体培养基的具体成分不作限定，只要可以实现前期的种子发酵即可，作为优选，在本专利技术的一些实施例中，液体培养基由以下重量百分含量的原料制成：玉米粉0.01％－1％，脲0.01％－1％，葡萄糖0.01％－3％，硫酸铵0.01％－2％，磷酸氢二铵0.01％－2％，酵母粉0.01％－3％，余量为水。这里要说明的是，液体培养基中含有的脲、玉米粉、葡萄糖等成分可以使后期固态培养基的营养成分更加优化，增加粗蛋白和硫的含量，降低木质素、和纤维素的含量，促进营养的均衡。本专利技术对固态培养基的具体成分不作具体限定，只要以玉米芯粉为主料，使得培养基具有更好的吸水和保水能力，降低对环境的要求即可，作为优选，在本专利技术的一些实施例中，固体培养基干料由以下重量百分含量的原料制成：玉米芯粉25％－65％，麦麸5％－30％，玉米粉8％－40％，硫酸铵0.01％－2％；再将上述干料培养基与水以1：0.5－1：3的比例混合，使固体培养基的含水量为30％－75％。本专利技术对固态发酵的具体方式不作限定，只要可以实现淡紫拟青霉的培养即可，作为优选，在本专利技术的一些实施例中，固态发酵包括第一固态发酵阶段和分盘发酵，分盘发酵为：在所述的固态发酵中淡紫拟青霉进入快速生长期、温度上升到30℃以上时，将半成品曲料转移到不锈钢筛盘中继续发酵。这里要说明的是：温度达到30℃以上、废气的大量产生、水分的丢失严重恶化了淡紫拟青霉的生长繁殖条件，导致传统发酵产品的各种酶活力低；分盘发酵增加了物料的表面积，利于供氧和废气排放，便于保温、保湿，便于随时观察和调整；同时，分盘培养对设备依赖度低，规模可大可小，便于复制和放大。本专利技术对第一固态发酵阶段的具体培养参数不作具体限定，为了使产保孢量增加、贮藏期延长，在本专利技术的一些实施例中，所述的第一固态发酵阶段温度为20－30℃，培养基湿度为50％－70％。这里要说明的是：由于固态培养基的主要成分是玉米芯粉，采用玉米芯粉为主要原料的固态培养基中的蓬松度高，有利于水分的吸收和保持，从而大大降低了对培养环境湿度的要求。以往的淡紫拟青霉的固态培养对培养湿度的要求极高，环境湿度需要达到80％－99％，这样的湿度要求需要采用中央空调、温控系统本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种淡紫拟青霉的规模化制备方法，其特征在于，包括如下步骤：将淡紫拟青霉菌株接种到灭菌后的液体培养基中进行种子培养得到液体种子；将所述的液体种子接种到以玉米芯粉为主要原料的固体培养基中进行固态发酵，所述的固体培养基经灭菌处理，接种量为1％－15％，得到发酵产物；将所述的发酵产物采用低温烘干后磨料制粉。

【技术特征摘要】
1.一种淡紫拟青霉的规模化制备方法，其特征在于，包括如下步骤：将淡紫拟青霉菌株接种到灭菌后的液体培养基中进行种子培养得到液体种子；将所述的液体种子接种到以玉米芯粉为主要原料的固体培养基中进行固态发酵，所述的固体培养基经灭菌处理，接种量为1％－15％，得到发酵产物；将所述的发酵产物采用低温烘干后磨料制粉。2.根据权利要求1所述的淡紫拟青霉的规模化制备方法，其特征在于，所述的液体培养基由以下重量百分含量的原料制成：玉米粉0.01％－1％，脲0.01％－1％，葡萄糖0.01％－3％，硫酸铵0.01％－2％，磷酸氢二铵0.01％－2％，酵母粉0.01％－3％，余量为水。3.根据权利要求1所述的淡紫拟青霉的规模化制备方法，其特征在于：所述的固体培养基干料由以下重量百分含量的原料制成：玉米芯粉25％－65％，麦麸5％－30％，玉米粉8％－40％，硫酸铵0.01％－2％；再将上述干料培养基与水以1：0.5－1：3的比例混合，使固体培养基的含水量为30％－7...

【专利技术属性】
技术研发人员：沈显贵，李杰之，郭希民，沈怡乐，
申请(专利权)人：北京四纬生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：北京,11