本发明专利技术公开了淡紫拟青霉航天诱变突变株Sd-m-26及其微生物制剂和应用。本发明专利技术将淡紫拟青霉菌株20-7、山东（Sd）菌株搭载“神舟”8号飞船进行航天诱变，以未搭载的原始菌株为对照，比较航天搭载菌株在表形、色素变化、生长速度、产孢量和致病力等方面的变异性，以筛选获得生长性能有所改善以及对根结线虫卵的致病能力有显著提高的突变株。本发明专利技术对航天搭载菌株通过生长速度、产孢量和致病力的筛选发现，山东菌株航天诱变菌株Sd-m-26在生长特性和致病力方面发生了较大幅度的正向变异，特别是在对根结线虫卵的致病力上比原始菌株有了非常显著的提升，在根结线虫的生物防治上具有重要的应用潜力。
【技术实现步骤摘要】
淡紫拟青霉航天诱变突变株Sd-m-26及其微生物制剂和应用
本专利技术涉及淡紫拟青霉(Paecilomyces Iilacinus)航天诱变突变株,尤其涉及淡紫拟青霉山东株航天诱变突变株Sd-m-26及其微生物制剂，本专利技术进一步涉及该突变株在生物防治根结线虫中的应用，属于淡紫拟青霉突变株的筛选及其应用领域。
技术介绍
航天诱变育种(Space Mutation Breeding),又叫空间诱变育种，就是将航天技术与传统的物理、化学诱变及分子技术等相结合的新育种技术，利用卫星搭载微生物等生物体样品，经特殊的空间环境条件(微重力、强宇宙射线、高真空、微重力等)的作用，引起生物体的染色体畸变，进而导致生物体遗传变异，经地面选育试验后，能快速而有效地育成生物新品种(系)，供生产和研究使用(张玲华，田兴山.微生物空间诱变育种的研究进展[J].核农学报，2004，18 (4):294~296)。因此法能引起大幅度的生理变异和遗传变异，所以成为高效率育种的新途径。已有研究表明，一些农作物和微生物经过航天诱变，正向突变率和变异幅度大大高于常规诱变(宋满刚，张满贵，缪美锁，红晓祥，梁虹，罗宝君，.我国太空育种成果显著[J].种子世界，2004，7:57)。太空环境具有较好的诱变作用，可以产生改善菌种的有利性状、创造新品种等有益变异，还可发诱发与产量有关的数量性状变异，但很多变异具有一定的随机性。搭载微生物的主要目的就是通过设计最佳方案筛选那些产量高、价值大的变异生产菌株，而为了选择得到性状稳定的新品种或品系，需要进行大量繁重的筛选和检测试验(张世成，林作楫，杨会民，赖菁茹.航天诱变条件下小麦若干性状的变异[J].空间科学学报，1996，增刊:103~107 ;边银丙，翁曼丽，孙勇，王斌，赵培新，闵家顺.香菇菌丝太空诱变效应研究I太空环境对香菇菌丝生长特性的影响[J].食用菌学报，1999，6 (4):11~14)。淡紫拟青霉(Paecilomyces Iilacinus)是许多重要农作物病虫的生防菌,能在土壤中习居并宿存，能够寄生控制多种植物根结线虫，还是多种非土栖害虫如荔枝蝽蟓、稻黑蝽、稻叶蝉等的天敌。其能够产生几丁质酶和丝氨酸蛋白酶，并通过这两种酶的作用破坏根结线虫卵壳，从而菌丝侵入根结线虫的卵并寄生于卵内，因此淡紫拟青霉菌株被认为是最具有应用前景的线虫生防真菌(Khan A, Willianms K L, and Nevalainen H K M.Effectof Paecilomyces lilacius protease and chitinase on the eggshell structuresand hatching of Meloidogyne javanica juveniles[J].Biological Control，2004，3:346-352)。现有的淡紫拟青霉菌株在生长速度、产孢量等生长性能以及对根结线虫卵的致病力上都亟待提高，将淡紫拟青霉菌株通过航天诱变筛选得到在生产性能或对根结线虫卵的致病力上有显著提高的突变菌株，对于根结线虫的生物防治将具有重要的应用价值。
技术实现思路
本专利技术的主要目的是将淡紫拟青霉(Paecilomyces lilacinus)进行航天诱变获得一株对根结线虫卵的致病能力有显著提高的突变株；本专利技术的另一目的是将所获得的突变株应用于根结线虫的生物防治。本专利技术的上述目的是通过以下技术方案来实现的:—株对根结线虫卵的致病能力有显著提高的淡紫拟青霉(Paecilomyceslilacinus)山东航天诱变突变株Sd-m-26，其微生物保藏号是:CGMCCN0.7770 ;分类命名:淡紫拟青霉Paecilomyces lilacinus ;保藏时间是:2013年6月20日;保藏单位是:中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心；保藏地址是:北京市朝阳区北辰西路I号院3号，中国科学院微生物研究所。本专利技术将淡紫拟青霉菌株20-7、山东(Sd)菌株各分为两份，一份为原始菌株，留在地面常规保存用作对照(CK);另一份搭载“神舟”8号飞船进行航天诱变，航天搭载菌株返回地面后，以未搭载的原始菌株为对照，比较航天搭载菌株在表形、色素变化、生长速度、产孢量和致病力等方面的变异性，以筛选获得对根结线虫卵的致病能力有显著提高的突变株。 本专利技术将航天搭载菌株通过5-6代继代培养得到性状稳定菌株后，观察航天诱变对菌落形态和色素变化的影响，观察发现，经航天诱变的20-7淡紫拟青霉菌株筛选得到的19个突变菌株，变异类型较多，且各菌株均出现比原始菌株明显的轮纹，但产孢均比原始菌株少，与轮纹越明显产孢越多的文献中的结论不一致(王明祖.根结线虫卵寄生真菌的研究I1.淡紫拟青霉菌生长和产孢条件[J].华中农业大学学报，1992，11 (I):52-56)。菌落出现不同程度的隆起，大致可分为三种类型:中心隆起，隆起或扁平。中心隆起和隆起菌株颜色均比原始菌株浅；扁平菌株颜色也比原始菌株浅，只有极少数菌株颜色加深呈紫色。菌落背后颜色一般呈炒米黄色，与原始菌株差异不大。在山东(Sd)突变菌株中，菌落有明显的形态分化，可将它们分为4种类型:1型菌落为性状变化最大的一种，菌落正面为极浅淡紫色，接近白色，菌落背部色素初生长时为墨绿色，9d后由墨绿色变为黑-棕红-白色的由深及浅的特征，菌落直径均比原始菌株小，即生长速度较原始菌株慢，其中Sd-m-30生长速度最慢，培养15d的菌落直径仅5.85cm, I型菌落共8株，占山东航天突变体菌落数的26.7%，其中Sd-m-3菌株边缘不呈圆形而是呈现出类似花朵状边缘；另外两种色素较原始菌株深，其中一种菌落中部为白色凸起外围呈淡紫色，菌落轮纹明显，为II型，共7株，占山东航天突变体菌落数的23.3% ;另一种菌落平展，中部无凸起并出现辐射状分支，为III型，共5株占航天单孢菌落数的16.7%。其它菌落的大小均与原始菌株相近，其中12株菌株与原始菌株形态相似，为IV型，占山东航天突变体菌落数的40%。本专利技术采用显微镜观察航天诱变对菌丝及孢子形态的影响，观察结果发现山东突变体I型菌落均出现菌丝缠绕形成的环状菌丝结构，环状结构的成因还不明确，有待于进一步的实验研究。II型、III型和IV型菌株有轮状分枝的分生孢子梗，分生孢子多数稍呈棱形，少数近椭圆形或圆形，单细胞，无色，表面光滑，形态与原始菌株基本无差异。20-7突变体菌株的菌丝及孢子形态基本无变化。本专利技术还观察了航天诱变对菌株的生长速度以及菌丝干重的影响，以筛选出生长速度比原始菌株有加快的突变菌株。观察结果发现，与原始菌株相比，淡紫拟青霉20-7航天诱变菌落生长速度无明显加快的菌株；山东(Sd)突变菌株生长速度与山东(Sd)原始菌株相比，出现了正负双向变异，变异幅度较大，说明航天诱变可使山东菌株的生长速度产生不同趋向和不同幅度的变异。培养15d后菌落直径大于或等于原始菌株的菌株占突变菌株的26.7%，小于原始菌株的占73.3% ;其中，生长速度最快的菌株为Sd-m-26，培养15d后菌落直径为8.46cm,生长速度最慢的为菌株Sd-m-30，培养15d后菌落直径仅为5.85cm。淡紫拟青霉菌株20-7和山东(Sd)菌株本文档来自技高网...
【技术保护点】
一株淡紫拟青霉（Paecilomyces?lilacinus）山东航天诱变突变株Sd?m?26，其特征在于，其微生物保藏号是：CGMCC?No.7770。
【技术特征摘要】
1.一株淡紫拟青霉(Paecilomyces Iilacinus)山东航天诱变突变株Sd-m_26,其特征在于，其微生物保藏号是=CGMCC N0.7770。2.权利要求1所述的淡紫拟青霉航天诱变突变株Sd-m-26在防治植物害虫中的应用。3.按照权利要求2所述的应用，其特征在于:所述的植物害虫是线虫。4.按照权利要求3所述的应用，其特征在于:所述的线虫是根结线虫。5.一种防治植物害虫的微生物制剂，其特征在于，包括:权利要求1所述的淡紫拟青霉航天诱变突变株Sd-m-26的孢子粉或发酵液以及载体。6.按照权利要求5所述的微生物制...
【专利技术属性】
技术研发人员：汪来发，王源，朴春根，王曦茁，马建伟，
申请(专利权)人：中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究所，
类型：发明
国别省市：
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