包含具有确定立体化学的环嘌呤二核苷酸的组合物及其制备和使用方法技术

本发明专利技术的目的是提供通过最新发现的称为STING(干扰素基因刺激剂)的胞质受体激活DC的新型和高活性的环二核苷酸(CDN)免疫刺激剂。具体地，本发明专利技术的CDN以包含一种或多种诱导STING依赖性TBK1激活的环嘌呤二核苷酸的组合物形式提供，其中存在于该组合物中的环嘌呤二核苷酸是基本上纯的Rp,Rp或Rp,Sp立体异构体，且具体是基本上纯的Rp,Rp或RpSp CDN硫代磷酸盐非对映体。

Composition comprising cyclic purine dinucleotide with definite stereochemistry and preparation and use method thereof

The object of the present invention is to provide a novel and highly active cyclic dinucleotide (CDN) immunostimulator that activates DC by a recently discovered cytoplasmic receptor called STING (interferon gene stimulator). Specifically, the CDN of the present invention is provided in the form of a composition comprising one or more cyclopurine dinucleotides that induce STING-dependent TBK1 activation, wherein the cyclopurine dinucleotides present in the composition are essentially pure stereoisomers of RP, Rp or Rp, Sp, and specifically are essentially pure RP, Rp or RpSp CDN Thiophosphates not. Enantiomers.

【技术实现步骤摘要】
包含具有确定立体化学的环嘌呤二核苷酸的组合物及其制备和使用方法本申请为申请日是2013年12月13日、申请号是201380065216.X(PCT/US2013/075189)、专利技术名称为“包含具有确定立体化学的环嘌呤二核苷酸的组合物及其制备和使用方法”的中国申请的分案申请。本申请要求于2012年12月13日提交的美国临时申请61/737,006和于2013年3月15日提交的美国临时申请61/790,514的优先权，每一篇申请的内容通过引用整体(包括表、图和权利要求)并入本文。专利技术背景本专利技术背景的下列讨论仅被提供以帮助读者理解本专利技术，并且不容许描述或构成本专利技术的现有技术。人免疫系统通常可分为两类武器，称为“先天性免疫”和“适应性免疫”。免疫系统的先天性武器主要负责通过许多可溶性因子(包括补体系统和趋化因子/细胞因子系统)；和许多专门的细胞类型(包括肥大细胞、巨噬细胞、树突细胞(DC)和自然杀伤细胞)的最初炎性应答。与此相反，适应性免疫武器涉及在对抗原的免疫记忆中发挥关键作用的延迟的和更持久的抗体应答以及CD8+和CD4+T细胞应答。免疫系统的第三类武器可以被识别为涉及γδT细胞和具有受限的T细胞受体库(repertoire)的T细胞，诸如NKT细胞和MAIT细胞。对于针对抗原的有效免疫应答，抗原呈递细胞(APC)必须处理抗原并在适当的MHC情况下将抗原展示给T细胞，然后将导致细胞毒性和辅助性T细胞的T细胞刺激。抗原呈递成功后，在APC和T细胞两者上共刺激分子的相互作用必须发生或者激活将被中止。GM-CSF和IL-12在许多肿瘤模型中作为有效的促炎分子。例如，GM-CSF诱导髓前体细胞增殖并分化成树突细胞(DC)，尽管其它信号在激活它们成熟成为T细胞激活所必需的有效抗原呈递细胞中是必需的。有效免疫治疗的障碍包括对可以限制适当大小和功能的细胞毒性CD8T细胞的诱导的靶抗原耐受、产生的T细胞到恶性细胞位点的较差运输以及诱导的T细胞应答的较差持久性。吞噬肿瘤细胞碎片的DC处理材料用于主要组织相容性复合体(MHC)呈递、上调共刺激分子的表达并且迁移至局部淋巴结以刺激肿瘤特异性淋巴细胞。这一途径导致对肿瘤相关抗原作出反应的CD4+和CD8+T细胞的增殖和激活。事实上，此类细胞可以经常在血液、淋巴组织以及患者恶性病变中检测。对于成为免疫逃避基础的机制的新观点，连同直接或间接地通过与免疫关卡抑制剂(immunecheckpointinhibitor)或其它治疗联合来加强治疗性免疫接种的效力的组合治疗方案，已经作为开发诱导有效抗肿瘤免疫的疫苗的基础。CDN环di-AMP(由单核细胞增生李斯特菌(Listeriamonocytogenes)产生)及其类似物环di-GMP(由嗜肺军团菌(Legionellapneumophila)产生)被宿主细胞识别为PAMP(病原体相关分子模式)，其结合到被称为STING的PRR(病原体识别受体)。STING是在宿主哺乳动物细胞的胞质中的衔接蛋白，其激活TANK结合激酶(TBK1)—IRF3信号传导轴，结果诱导强烈激活先天性免疫的IFN-β和其它IRF-3依赖性基因产物。已认识到，STING是宿主胞质监测途径的组成部分，其感测与细胞内病原体的感染，并且与之相应诱导产生IFN-β，导致形成由抗原特异性CD4和CD8T细胞以及病原体特异性抗体组成的自适应保护病原体特异性免疫应答。环嘌呤二核苷酸的实例在例如美国专利号7,709458和7,592,326；WO2007/054279；和Yan等,Bioorg.Med.ChemLett.18:5631(2008)中详细描述，其每一个在此通过引用并入本文。仍然需要用于免疫策略的改进的组合物和方法以治疗可能难以用传统治疗方法治疗的疾病(诸如癌症)。专利技术概要本专利技术的目的是提供通过最新发现的称为STING(干扰素基因刺激剂)的胞质受体激活DC的新型和高活性的环二核苷酸(CDN)免疫刺激剂。具体地，本专利技术的CDN以包含一种或多种诱导STING依赖性TBK1激活的环嘌呤二核苷酸的组合物形式提供，其中存在于该组合物中的环嘌呤二核苷酸是基本上纯的Rp,Rp或Rp,Sp立体异构体，且具体是基本上纯的Rp,Rp或RpSpCDN硫代磷酸盐非对映体。在第一方面，本专利技术提供包含一种或多种环嘌呤二核苷酸的组合物，其中存在于该组合物中的环嘌呤二核苷酸是基本上纯的Rp,Rp或Rp,Sp非对映体，或其前药或药学上可接受的盐。这些诱发STING依赖性TBK1激活的组合物可包含一种或多种药学上可接受的赋形剂，并且可如本文所述用作佐剂。特别优选的是如下文所述的环嘌呤二核苷酸的硫代磷酸盐衍生物。在其作为佐剂的作用中，在某些实施方案中，本专利技术的组合物可在采用疫苗的治疗性或预防性策略中用作佐剂。因此，基本上纯的Rp,Rp或Rp,Sp非对映体，或其前药或药学上可接受的盐，可与所选的一种或多种疫苗一起使用，以刺激对一种或多种预定抗原的免疫应答。本专利技术的基本上纯的Rp,Rp或Rp,Sp非对映体，或其前药或药学上可接受的盐，可与此类疫苗一起提供，或除了此类疫苗之外提供。此类疫苗可包含灭活的或减毒的细菌或病毒，所述细菌或病毒包含目标抗原、纯化的抗原、重组工程化以表达和/或分泌抗原的活病毒或细菌递送载体、包含装载抗原或转染包含编码抗原的核酸的组合物的细胞的抗原呈递细胞(APC)载体、脂质体抗原递送载体或编码抗原的裸核酸载体。这个列举并不意味着是限制性的。以举例的方式，此类疫苗还可包含表达和分泌一种或多种GM-CSF、CCL20、CCL3、IL-12p70、FLT-3配体的灭活的肿瘤细胞。本专利技术的组合物可通过多种胃肠外和非注射途径以含有药学上可接受的载体、佐剂和媒介物的制剂来施用于有此需要的个体。优选的路径是胃肠外，且包括但不限于皮下、静脉内、肌内、动脉内、皮内、鞘内和硬膜外施用的一种或多种。特别优选的是通过皮下施用来施用。优选的药物组合物被配制成水性或水包油乳液。本专利技术的组合物可包含以下或可与以下一起施用：一种或多种另外的药学活性成分诸如佐剂、脂质诸如洋地黄皂苷、脂质体、CTLA-4和PD-1途径拮抗剂、PD-1途径阻断剂、诱导先天性免疫的灭活的细菌(例如，灭活的或减毒的单核细胞增生李斯特菌)、通过Toll样受体(TLR)、(NOD)样受体(NLR)、基于视黄酸可诱导的基因的(RIG)-I样受体(RLR)、C型凝集素受体(CLR)、病原体相关分子模式(“PAMP”)来介导先天性免疫激活的组合物、化疗剂等。如下文所述，与一种或多种脂质一起配制的环嘌呤二核苷酸可表现出改进的特性，包括改进的树突细胞激活活性。因此，本专利技术还涉及包含一种或多种CDN和一种或多种脂质的组合物。在某些优选的实施方案中，一种或多种CDN与洋地黄皂苷、脂质体制剂和/或水包油乳剂一起配制。根据权利要求1-5中任一项所述的组合物，其还包含一种或多种CTLA-4拮抗剂和TLR-4激动剂。在优选的实施方案中，一种或多种环嘌呤二核苷酸硫代磷酸盐包含选自c-di-AMP硫代磷酸盐、c-di-GMP硫代磷酸盐、c-di-IMP硫代磷酸盐、c-AMP-GMP硫代磷酸盐、c-AMP-IMP硫代磷酸盐和c-GMP-IMP硫代磷酸盐或其组合的基本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.基本上纯的Rp,Rp环嘌呤二核苷酸硫代磷酸盐或其药学上可接受的盐在制造用于治疗癌症或传染性疾病的药物中的用途。

【技术特征摘要】
2012.12.13 US 61/737,006;2013.03.15 US 61/790,5141.基本上纯的Rp,Rp环嘌呤二核苷酸硫代磷酸盐或其药学上可接受的盐在制造用于治疗癌症或传染性疾病的药物中的用途。2.根据权利要求1所述的用途，其中所述Rp,Rp环嘌呤二核苷酸硫代磷酸盐包括2’-取代基，其选自由以下组成的组：卤素、羟基、烷基、烯基、炔基、酰基(-C(O)Raa)、羧基(-C(O)O-Raa)、脂族基、脂环基、烷氧基、取代的氧基(-O-Raa)、芳基、芳烷基、杂环基、杂芳基、杂芳基烷基、氨基(-N(Rbb)(Rcc))、亚氨基(＝NRbb)、酰氨基(-C(O)N(Rbb)(RcC)或-N(Rbb)C(O)Raa)、叠氮基(-N3)、硝基(-NO2)、氰基(-CN)、脲基(-OC(O)N(Rbb)(Rcc)或-N(Rbb)C(O)ORaa)、脲基(-N(Rbb)C(O)-N(Rbb)(Rcc))、硫脲基(-N(Rbb)C(S)N(Rbb)(Rcc))、胍基(N-(Rbb)C(＝NRbb)N(Rbb)(Rcc))、脒基(-C(＝NRbb)N(Rbb)(Rcc)或-N(Rbb)C(＝NRbb)(Raa))、巯基(-SRbb)、亚磺酰基(-S(O)Rbb)、磺酰基(-S(O)2Rbb)和磺酰胺基(-S(O)2N(Rbb)(Rcc)和-N(Rbb)S(O)2Rbb)，其中每个Raa、Rbb和Rcc独立地为H、烷基、烯基、炔基、脂族、烷氧基、酰基、芳基、芳烷基、杂芳基、脂环、杂环和杂芳基烷基。3.根据权利要求2所述的用途，其中所述Rp,Rp环嘌呤二核苷酸硫代磷酸盐包括2’-取代基，其选自由以下组成的组：氟、氯、溴和碘。4.根据权利要求3所...

【专利技术属性】
技术研发人员：T·W·小杜本斯基，D·B·肯奈，M·L·L·梁，E·E·莱门斯，L·H·格利克曼，
申请(专利权)人：艾杜罗生物科技公司，
类型：发明
国别省市：美国,US