浒苔来源的血管紧张素转化酶抑制肽及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了浒苔来源的血管紧张素转化酶抑制肽及其制备方法和应用，特点是抑制肽的氨基酸序列为SEQ ID NO1：Phe‑Gly‑Met‑Pro‑Leu‑Asp‑Arg和/或SEQ ID NO 2：Met‑Glu‑Leu‑Val‑Leu‑Arg，其制备方法包括制备浒苔粗蛋白的步骤；在浒苔粗蛋白溶液中添加胰蛋白酶酶解得到酶解产物的步骤；将酶解产物进行超滤分离后凝胶层析，收集含ACE抑制肽的第3个吸收峰组分的步骤；将含ACE抑制肽的组分进行凝胶层析，再采用高效液相色谱进行分离，收集含ACE抑制肽的第8个吸收峰组分得到抑制肽，优点是具有很强的降血压活性，安全性高，无毒副作用，易被人体吸收。

Angiotensin converting enzyme inhibitory peptides derived from Enteromorpha prolifera and their preparation and Application

The present invention discloses angiotensin converting enzyme inhibitory peptides from Enteromorpha prolifera and/or SEQ ID NO 2:Met_Glu_Leu_Arg and/or SEQ ID NO 2:Met_Glu_Leu_Arg, characterized by the amino acid sequence of inhibitory peptides being SEQ ID NO1:Phe_Gly_Met_Pro Leu_Asp Arg and/or SEQ ID NO 2:Met_Glu_Leu_Valu_Arg, and Suddenly, the hydrolysate was obtained by adding trypsin to the crude protein solution of Enteromorpha prolifera; the hydrolysate was separated by ultrafiltration followed by gel chromatography to collect the third absorption peak component containing ACE inhibitory peptide; the components containing ACE inhibitory peptide were separated by gel chromatography, and then separated by high performance liquid chromatography to collect the components containing ACE inhibitory peptide. Inhibitory peptides are obtained from the eighth absorption peak component of inhibitory peptides, which have the advantages of strong antihypertensive activity, high safety, non-toxic side effects and easy to be absorbed by the human body.

【技术实现步骤摘要】
浒苔来源的血管紧张素转化酶抑制肽及其制备方法和应用
本专利技术涉及一种血管紧张素转化酶抑制肽及其制备方法，尤其是涉及从大型海洋绿藻浒苔中分离纯化得到的具有血管紧张素转化酶(ACE)抑制活性的海洋功能多肽及其制备方法和应用。
技术介绍
血管紧张素转化酶(Angiotensinconvertingenzyme，ACE)是一种锌金属蛋白酶，是肾素-血管紧张素系统中重要的蛋白酶之一。对人体血压调节有着重要的作用，通过作用于血管紧张素I的末端去掉His-Leu生成血管紧张素Ⅱ，它能够使动脉血管平滑肌收缩，迅速引起血压上升。抑制ACE活性是一种使血压下降的有效方法。当前治疗高血压的药物大多是化学合成品，存在一些不良反应，如咳嗽、味觉功能紊乱及皮疹等副作用。天然食源性ACE抑制肽具有安全性高、毒副作用小等优点，是新一代降压药物研发的重要方向。食品来源的ACE抑制剂由于其原料易得，一直受到人们的关注。海洋动物蛋白来源的降压肽也有报道，但海藻来源的ACI抑制剂还非常少，主要报道有刘淑集等利用坛紫菜(Porphyra)制备ACE抑制肽，其IC50值为0.67mg/mL，其多肽氨基酸结构也不确定（食品科学本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.浒苔来源的血管紧张素转化酶抑制肽，其特征在于：所述的抑制肽的氨基酸序列为 SEQ ID NO1：Phe‑Gly‑Met‑Pro‑Leu‑Asp‑Arg和/或SEQ ID NO 2：Met‑Glu‑Leu‑Val‑Leu‑Arg。

【技术特征摘要】
1.浒苔来源的血管紧张素转化酶抑制肽，其特征在于：所述的抑制肽的氨基酸序列为SEQIDNO1：Phe-Gly-Met-Pro-Leu-Asp-Arg和/或SEQIDNO2：Met-Glu-Leu-Val-Leu-Arg。2.权利要求1所述的浒苔来源的血管紧张素转化酶抑制肽的制备方法，其特征在于包括以下步骤：（1）浒苔蛋白的制备：将新鲜浒苔按质量比1：3的比例加入到浓度为2.0wt%的氯化钠溶液中，捣碎后反复冻融，超声波提取，浸提过夜，8000r/min离心15min后；取上清液加入硫酸铵沉淀浓缩，离心后取沉淀复溶于蒸馏水，过0.45μm滤膜后用截留分子量为3500Da的透析袋于冰箱中避光透析48h，透析液冷冻干燥后得到浒苔粗蛋白，避光保存；（2）酶解：将步骤（1）得到的浒苔粗蛋白溶于水中配制成浓度为10-20g/mL的浒苔粗蛋白溶液，在浒苔粗蛋白溶液中添加浒苔粗蛋白质量2-6wt%的胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、α-糜蛋白酶或碱性蛋白酶进行水解，在pH为7.5-9.0，温度为22-42℃的条件下进行酶解，酶解时间为3-6h，酶解充分后100℃灭酶活15min，冰浴上冷却，于4℃，8000r/min冷冻离心15min，取上清液过0.45μm滤膜后，冷冻干燥得到酶解产物冻干粉；（3）分离：将步骤（2）得到的酶解产物冻干粉溶于水后配制成浓度为40mg/mL的上样液，用3000Da的超滤离心管进行超滤分离，将得到的MW＜3000Da组分进行SephadexG-25凝胶层析，340nm下检测肽的出峰位置，收集含ACE抑制肽的第3个吸收峰组分；（4）纯化和鉴定：将步骤（3）得到的含ACE抑制肽的...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐年军，孙雪，徐晓婷，操德群，李亚鹤，胡朝阳，
申请(专利权)人：宁波大学，
类型：发明
国别省市：浙江,33