一种用于癌症检测的生长抑素类似物及其制备方法和应用技术

本发明专利技术提供了一种生长抑素类似物，所述生长抑素类似物多肽序列为：HYNIC‑D‑Phe‑cyclo[Cys‑Tyr‑D‑Trp‑Lys‑Thr‑Cys]‑L‑threoninol。本发明专利技术的上述生长抑素类似物或其类似物采用9‑芴甲氧羰基固相合成(FMOC‑SPPS)方法合成。本发明专利技术所述的99mTc标记的生长抑素类似物，产物的标记率较高、稳定高，可直接标记，通过细胞实验及大鼠实验证明，本发明专利技术所述的标记可直观反映出各个器官的肿瘤位置，结果准确。

Somatostatin analogue for cancer detection and its preparation method and Application

The present invention provides a somatostatin analogue, the somatostatin analogue polypeptide sequence is HYNIC_D_Phe_cyclo [Cys_Tyr_D_Trp_Lys_Thr_Cys]L_threoninol. The somatostatin analogue or its analogue of the present invention is synthesized by solid-phase synthesis of 9_fluorene methoxycarbonyl group (FMOC_SPPS). The 99mTc labeled somatostatin analogue has high labeling rate, high stability and can be directly labeled. The cell experiment and rat experiment prove that the labeling can directly reflect the tumor position of each organ, and the result is accurate.

【技术实现步骤摘要】
一种用于癌症检测的生长抑素类似物及其制备方法和应用
本专利技术属于生物医药领域，具体涉及一种癌症检测的生长抑素类似物、99mTC标记的生长抑素类似物及其制备方法和应用。
技术介绍
癌症是发病率和死亡率增长最快，对人群健康和生命威胁最大的恶性肿瘤之一。癌症通常因癌细胞的生长而侵犯周边组织出现一些症状，但是，也有10-15％左右的患者无任何症状，通过定期体检才能诊断出。另外，大部分癌症发现时都已经发展到了第III(3)期以上，一般都很难治愈。因此，对癌症进行早期诊断以降低因癌症导致的死亡率是一个紧迫的问题。为了对癌症进行诊断，一般都综合运用多种方法，到目前为止，大都通过检查肿瘤的大小、淋巴结是否转移等或者对肿瘤组织或淋巴结等做活检并通过免疫组织化学方法进行分析或者通过利用胸部X-线摄影、胸部计算机断层扫描、纤维支气管镜等进行诊断。但是，如果采用胸部计算机断层扫描，肿瘤的大小必须达到约0.1cm以上才能够进行测定，在这一时期，癌症很可能已经转移到了其它的组织。利用纤维支气管镜的方法虽然可以将内镜插入支气管直接对肺内部进行观察，但是，其观察范围在空间上具有一定的局限性，很难对肺末端的肿瘤进行观察。为了克服上述现有诊断方法的缺点，研究人员一直试图通过测定患者血液中全血细胞计数(Completebloodcount，CBC)、血清电解质(含钙)、碱性磷酸酶(Alkalinephosphatase)、白蛋白(Albumin)、天冬氨酸转氨酶(Aspartateaminotransferase，AST)、丙氨酸转氨酶(Alaninetransaminase，ALT)、总胆红素(Totalbilirubin)或者肌酐(Creatinine)的浓度从而对癌症进行诊断。但是，虽然一直在对这种肿瘤标记(marker)作为诊断因素或预后因素的价值进行研究，到目前为止也仅限于有限使用，仍然没有建议正式使用的癌症标记。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术的目的在于提供一种生长抑素类似物，该生长抑素类似物能够对癌症早期有效诊断、结果准确。在本专利技术中，所述生长抑素类似物具有以下结构式或其结构类似物：优选地，本专利技术所述的生长抑素类似物中，所述生长抑素类似物的多肽序列为：HYNIC-D-Phe-cyclo[Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Thr-Cys]-L-threoninol。优选地，本专利技术所述的生长抑素类似物中，所述生长抑素类似物的分子量为1170.36。本专利技术的另一目的为提供上述生长抑素类似物或其类似物的制备方法，所述生长抑素类似物为采用9-芴甲氧羰基固相合成(FMOC-SPPS)方法合成，所述固相合成方法包括以下步骤：将固相合成树脂Fmoc-Thr(tBu)-Ol-2-Cl-Trtresin溶胀后，洗涤脱Fmoc，得到脱Fmoc树脂；依次将Fmoc-Cys(Trt)-OH、Fmoc-Thr(tbu)-OH、Fmoc-Lys(Boc)-OH、Fmoc-D-Trp(Boc)-OH、Fmoc-Tyr(tbu)-OH、Fmoc-Cys(Trt)-OH、Fmoc-D-Phe-OH和Boc-HYNIC偶联至所述脱Fmoc树脂中形成肽键，收集树脂中反应得到的多肽，经氧化后得到所述生长抑素类似物。更优选地，本专利技术所述生长抑素类似物的制备方法还包括纯化步骤，所述纯化为将制备得到的生长抑素类似物用硅胶反相C18色谱柱进行色谱纯化。进一步的，所述纯化后的产物利用冷冻干燥方法冻干获得生长抑素类似物。本专利技术的另一目的为提供一种99mTC标记的生长抑素类似物，为HYNIC-D-Phe-cyclo[Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Thr-Cys]-L-threoninol的HYNIC基团与99mTC配位得到的配合物。本专利技术还提供了上述99mTC标记的生长抑素类似物在制备癌症检测试剂或试剂盒中的用途，所述癌症为肺癌、脑癌、肝癌、胃癌、肾癌、肠癌或骨癌。优选地，所述99mTC标记的生长抑素类似物的给药方法为静脉注射。优选地，所述静脉注射的注射剂量为500±100μCi。优选地，所述检测方法为注射99mTC标记的生长抑素类似物之后通过SPECT扫描，经图像处理确认肿瘤的位置。本专利技术与现有技术相比，本专利技术具有以下优点：1、本专利技术生长抑素类似物能够用于癌症的检测，标记后显像效果好，合成简便、收率高、成本低。2、本专利技术所述的99mTC标记的生长抑素类似物，标记结果直观准确。通过高效液相色谱法验证可知，不仅产物的标记率较高、稳定高，而且将标记产物99mTC-HYNIC-TOC与标记反应中可能存在的其他放射性杂质明显区分开，不仅有利于分离纯化，同时也有效提高了标记的纯度。3、本专利技术所述99mTC标记的生长抑素类似物由于标记效率高，无需特定纯化提取步骤即可直接使用，因此易于制备药盒，解决了现有技术中其他直接标记方法存在的标记产物与杂质易混淆的问题。5、本专利技术所述的99mTc标记的生长抑素类似物可作为显像剂应用于检测细胞的凋亡状况。大鼠实验证明，本专利技术所述的标记可直观反映出各个器官的肿瘤位置，实现对肿瘤的早期诊断，结果准确。附图说明图1为本专利技术实施例1中HYNIC-TOC合成路线图；图2为本专利技术实施例1中HYNIC-TOC的质谱图；图3为本专利技术实施例1中HYNIC-TOC的HPLC图；图4为实施例2批号为L17091801的99mTc-HYNIC-TOC的Radio-iTLC空白质谱图；图5为实施例2批号为L17091801的99mTc-HYNIC-TOC在50％乙腈中放化纯质控图谱；图6为实施例2批号为L17091801的99mTc-HYNIC-TOC在柠檬酸中放化纯质控图谱；图7为实施例2批号为L17091901的99mTc-HYNIC-TOC的Radio-iTLC空白质谱图；图8为实施例2批号为L17091901的99mTc-HYNIC-TOC在50％乙腈中放化纯质控图谱；图9为实施例2批号为L17091901的99mTc-HYNIC-TOC在柠檬酸中放化纯质控图谱；图10为实施例2批号为L17091801的99mTc-HYNIC-TOC在50％乙腈中23h稳定性图谱；图11为实施例2批号为L17091801的99mTc-HYNIC-TOC在柠檬酸中23h稳定性图谱；图12为实施例2批号为L17091901的99mTc-HYNIC-TOC在50％乙腈中10h稳定性图谱；图13为实施例2批号为L17091901的99mTc-HYNIC-TOC在柠檬酸中10h稳定性图谱；图14为本专利技术实施例3在G3实验动物给予99mTc-HYNIC-TOC后不同时间点组织与肌肉放射性摄取比值图；图15为本专利技术实施例3在G7实验动物给予99mTc-HYNIC-TOC后不同时间点组织与肌肉放射性摄取比值图。具体实施方式本专利技术提供了一种生长抑素类似物，其具有以下结构式或其结构类似物：其中，所述生长抑素类似物的多肽序列如下：HYNIC-D-Phe-cyclo[Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Thr-Cys]-L-threoninol。本专利技术所述生长抑素类似物的分子量优选为：1170.36。该生长抑素类似物用于肿瘤显像，效果好。本专利技术上述结构生长抑素类似物优选采用9-芴甲氧羰基固相合成方本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种生长抑素类似物，其特征在于，所述生长抑素类似物具有式I所示结构或式I所示结构的类似物：

【技术特征摘要】
1.一种生长抑素类似物，其特征在于，所述生长抑素类似物具有式I所示结构或式I所示结构的类似物：2.根据权利要求1所述的生长抑素类似物，其特征在于，所述生长抑素类似物的多肽序列为：HYNIC-D-Phe-cyclo[Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Thr-Cys]-L-threoninol。3.一种如权利要求1～2任意一项所述生长抑素类似物的制备方法，其特征在于，所述生长抑素类似物采用9-芴甲氧羰基固相合成方法合成，所述固相合成方法包括以下步骤：将固相合成树脂Fmoc-Thr(tBu)-Ol-2-Cl-Trtresin溶胀后，洗涤脱Fmoc，得到脱Fmoc树脂；依次将Fmoc-Cys(Trt)-OH、Fmoc-Thr(tbu)-OH、Fmoc-Lys(Boc)-OH、Fmoc-D-Trp(Boc)-OH、Fmoc-Tyr(tbu)-OH、Fmoc-Cys(Trt)-OH、Fmoc-D-Phe-OH和Boc-HYNIC偶联至所述脱Fmoc树脂中形成肽键，收集树脂中...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐鹏程，吴松年，夏伟，张莉君，
申请(专利权)人：上海欣科医药有限公司，
类型：发明
国别省市：上海,31