一种从脐带组织中提取复合细胞因子的方法技术

本发明专利技术提供一种从脐带组织中提取复合细胞因子的方法，所述方法包括以下步骤：1)脐带组织的处理、2)复合细胞因子的富集、3)复合蛋白因子的分离、4)将步骤3)得到的上清液加压过滤，并进一步使用3KD浓缩脱盐，既得。本发明专利技术还提供了一种从脐带组织中提取的复合细胞因子。本发明专利技术直接从脐带组织中获得复合细胞因子，这些复合细胞因子均为人体成分，可以直接被皮肤吸收，避免过敏反应，无副作用。本发明专利技术的方法不涉及高温及化学灭菌的方式，仅仅利用过滤法去除微生物污染，既避免了产品出现污染变质问题，又保证生物活性成分不被高温、辐射或化学杀菌剂改变结果，保证了产品中细胞因子的活性，使产品效果稳定。

Method for extracting composite cytokine from umbilical cord tissue

The present invention provides a method for extracting compound of cytokines from umbilical cord tissue, the method comprises the following steps: 1) the umbilical cord tissue processing, 2) composite cytokine enrichment, separation, 3) composite protein factor 4) in step 3) the supernatant pressure filtration, and further use of 3KD concentration and desalination both. The invention also provides a composite cell factor extracted from the umbilical cord tissue. The invention directly obtains composite cell factors from the umbilical cord tissue, which are human body components and can be absorbed directly by the skin to avoid allergic reactions without side effects. The method of the present invention relates to a high temperature and chemical sterilization methods, only the removal of microbial contamination by filtration method can avoid pollution deterioration of products, and ensure the bioactive components is not high temperature, radiation or chemical fungicides to change the results, to ensure the products of cytokine activity, make the product stable effect.

【技术实现步骤摘要】
一种从脐带组织中提取复合细胞因子的方法
本专利技术属于生物
，涉及一种从脐带组织中提取复合细胞因子的方法，本专利技术还涉及本专利技术提取的复合细胞因子的保存方法及其用途。
技术介绍
细胞因子是一类通过与特异的、高亲和的细胞膜受体结合，调节细胞生长并参与细胞功能等多效应的多肽类物质，对不同种类细胞具有一定的专一性，由多种维生素、氨基酸、多醣类成分、复杂蛋白质体、醣蛋白等组成。细胞因子由正常细胞分泌，分泌方式主要包括自分泌(autocrine)和旁分泌(paracrine)，具有多效性、重叠性、协同性、拮抗性和双重性等特点，该特点是其具有非常重要实验研究价值，有助于阐明分子水平的免疫调节机理，有助于疾病的预防、诊断和治疗，特别是利用基因工程技术生产的重组细胞因子已用于治疗肿瘤、感染、炎症、造血功能障碍等。目前实验研究结果表明其可应用于细胞培养和3D打印的生物材料，具有抗衰老和免疫调节等作用，未来具有非常广阔的应用前景。间充质干细胞(Mesenchymalstemcells)是一类具有多向分化潜能的成体干细胞，源于发育早期的中胚层，主要存在于结缔组织和器官间质中，可以从骨髓、外周血、本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种从脐带组织中提取复合细胞因子的方法，所述方法包括以下步骤：1)脐带组织的处理：将脐带组织消毒并处理为0.1～0.3cm

【技术特征摘要】
1.一种从脐带组织中提取复合细胞因子的方法，所述方法包括以下步骤：1)脐带组织的处理：将脐带组织消毒并处理为0.1～0.3cm3的组织块；2)复合细胞因子的富集：在步骤1)得到的组织块中加入2～5倍体积生理盐水，离心取沉淀，然后加入1～10倍体积的生理盐水，混合均匀，并置于培养箱中孵化1～6天；3)复合蛋白因子的分离：收集步骤2)孵化后的组织块和上清液，离心取上清液；4)将步骤3)得到的上清液加压依次通过120μm、70μm、50μm、25μm的滤器，并进一步使用2～4KD的过滤膜浓缩脱盐，收集过滤液，即得。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤1)中，所述脐带组织保存在4℃；优选地，在步骤1)中，所述消毒包括以下的步骤：将脐带组织使用碘伏浸泡1～10分钟，优选地1～3分钟，更优选地1分钟后，使用体积比为75％的酒精浸泡脱碘，然后使用生理盐水冲洗1～5次，优选地3次。3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，在步骤2)中，所述离心的条件为：在1000～1400r/min下，离心4～7min；更优选地，所述离心的条件为：在1000r/min下，离心5min；优选地，在步骤2)中，离心取沉淀后，加入2～5倍体积，优选地3倍体积的生理盐水混合均匀；优选地，在步骤2)中，混合均匀后，首先将混匀的组织块转移至培养瓶中，然后置于培养箱中孵化；优选地，在步骤2)中，所述培养箱的孵化条件为：37℃、CO2的浓度为3％；优选地，在步骤2)中，在培养箱中孵化2～3天。4.根据权利要求1-3中任一项所述的方法，其特征在于，在步骤3)中，所述离心的条件为：在1000～1400r/min下，离心4～7min；优选地，所述离心的条件为：在1400r/min下，离...

【专利技术属性】
技术研发人员：高文勇，罗美华，
申请(专利权)人：广州雅安生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44