本发明专利技术涉及靶向EGF受体的单克隆抗体175及其衍生物和用途，具体地涉及抗体、尤其是抗体175及其片段或来源于其的抗体，其与EGF受体、尤其是扩增或过表达的表皮生长因子受体(EGFR)和EGFR的de2‑7EGFR截短体结合。这些抗体可用于诊断和治疗癌症。还提供了具有抗体175可变区重链或轻链序列的重组或杂合抗体。本发明专利技术的抗体也可用于与化疗剂或抗癌剂和/或与其他抗体或其片段联合治疗。
Monoclonal antibody 175 targeting EGF receptor and its derivatives and uses
The present invention relates to monoclonal antibody 175 targeting EGF receptors and its derivatives and uses, in particular to antibodies, especially antibody 175 and its fragments or antibodies derived therefrom, which bind to EGF receptors, in particular expanded or overexpressed epidermal growth factor receptor (EGFR) and EGFR truncated de2_7EGFR. These antibodies can be used to diagnose and treat cancer. Recombinant or heterozygous antibodies with antibody 175 variable region heavy chain or light chain sequence are also provided. Antibodies of the present invention can also be used in combination with chemotherapy agents or anticancer agents and/or with other antibodies or fragments thereof.
【技术实现步骤摘要】
靶向EGF受体的单克隆抗体175及其衍生物和用途本申请是申请日为2008年8月14目的中国专利申请200880110993.0“靶向EGF受体的单克隆抗体175及其衍生物和用途”的分案申请。
本专利技术涉及抗体、尤其是抗体175及其片段，其与EGF受体、尤其是扩增或过表达的表皮生长因子受体(EGFR)和EGFR的de2-7EGFR截短体结合。这些抗体可用于诊断和治疗癌症。本专利技术的抗体也可用于与化疗剂或抗癌剂和/或与其他抗体或其片段联合治疗。
技术介绍
增生性疾病、尤其是癌症的化学治疗通常依赖于利用人体或动物体内靶标增殖细胞和其他正常细胞的差别。例如，许多化学制剂设计成被迅速复制的DNA吸收，由此破坏DNA的复制和细胞分裂的过程。另一种方法是鉴定在已发育的人体组织中正常不表达的肿瘤细胞或其他异常细胞表面的抗原，例如肿瘤抗原或胚胎抗原。此类抗原可用结合蛋白例如抗体靶向，其可以阻断或中和该抗原。此外，所述结合蛋白、包括抗体及其片段可递送毒性剂或可以在肿瘤位点直接或间接的激活毒性剂的其他物质。EGFR是肿瘤靶向抗体治疗的很有吸引力的靶标，因为它在许多上皮肿瘤类型中过表达(Voldborg，B.R.，等(1997)AnnOncol8：1197-206；denEynde，B.andScott，A.M.(1998)TumorAntigens.In：P.J.DelvesandI.M.Roitt(eds.)，EncyclopediaofImmunology，SecondEditionedition，pp.2424-31.London：AcademicPress)。此外，EGFR的表达与许多肿瘤类型中的不良预后有关，包括胃瘤、结肠瘤、膀胱瘤、乳瘤、前列腺瘤、子宫内膜瘤、肾瘤和脑瘤(例如神经胶质瘤)。因此，文献报道了许多EGFR抗体，某些正在进行临床评价(Baselga，J.，等(2000)JClinOncol.18：904；Faillot，T.，等(1996)Neurosurgery39：478-83；Seymour，L.(1999)CancerTreatRev25：301-12)。在头颈癌、鳞状上皮细胞肺癌、脑神经胶质瘤和恶性星形细胞瘤患者中使用EGFR单抗研究的结果是令人鼓舞的。大多数EGFR抗体的抗肿瘤活性通过其阻断配体结合的能力得到提升(Sturgis，E.M.，等(1994)OtolaryngolHeadNeckSurg111：633-43；Goldstein，N.I.，等(1995)ClinCancerRes1：1311-8)。此类抗体可通过调节细胞增殖和抗体依赖性的免疫功能(例如补体激活)起作用。然而，这些抗体的使用可能受到具有高内源性EGFR水平的器官例如肝和皮肤的吸收限制(Baselga，J.，等(2000)JC1inOncol.18：904；Faillot，T.，等(1996)Neurosurgery39：478-83)。相当一部分含有EGFR基因扩增(即多个EGFR基因拷贝)的肿瘤同时共表达该受体的截短形式(Wikstrand，C.J.，等(1998)JNeurovirol4：148-58)，称为de2-7EGFR、ΔEGFR或Δ2-7(本文中可交换使用的术语)(Olapade-Olaopa，E.O.，等(2000)BrJCancer82：186-94)。de2-7EGFR中该可见的重排产生缺少801个核苷酸的框架内成熟mRNA，其跨越外显子2-7(Wong，A.J.，等(1992)ProcNatlAcadSciUSA89：2965-9；Yamazaki，H.，等(1990)JpnJCancerRes81：773-9；Yamazaki，H，等(1998)MolCellBiol8：1816-20；Sugawa，N.，等(1990)ProcNatlAcadSciUSA87：8602-6)。相应的EGFR蛋白具有包括胞外结构域残基6-273的267个氨基酸的缺失，和在融合接头处的新的甘氨酸残基(Sugawa，N.，等(1990)ProcNatlAcadSciUSA87：8602-6)。该缺失以及甘氨酸残基的插入在缺失接口处产生了独特的接合肽。de2-7EGFR在多种肿瘤类型中报道，包括神经胶质瘤、乳瘤、肺瘤、卵巢瘤和前列腺瘤(Wikstrand，C.J.，等(1997)CancerRes.57：4130-40；Olapade-Olaopa，E.O.，等(2000)BrJCancer82：186-94；Wikstrand，C.J.，等(1995)CancerRes55：3140-8；GarciadePalazzo，I.E.，等(1993)CancerRes53：3217-20)。尽管该截短的受体不结合配体，其具有低组成性活性，为在裸小鼠中作为肿瘤异种移植物生长的神经胶质瘤细胞提供了显著的生长有利条件(Nishikawa，R.，等(1994)ProcNatlAcadSciUSA91：7727-31，1994.)，并且能够转化NIH3T3细胞和MCF-7细胞(Batra，S.K.，等(1995)CellGrowthDiffer6：1251-9)。De2-7EGFR在神经胶质瘤细胞中利用的细胞机制未完全确定，但有报道包括减少的细胞凋亡和小幅增强的增殖(Nagane，M.，等(1996)CancerRes56：5079-86)。由于该截短受体的表达局限于肿瘤细胞，其代表了抗体治疗的高特异性靶点。因此，许多实验室报道了对该独特的de2-7EGFR肽特异性的多克隆和单克隆抗体的制备(Wikstrand，C.J.，等(1998)JNeurovirol4：148-58；Humphrey，P.A.，等(1990)ProcNatlAcadSciUSA87：4207-11；Okamoto，S.，等(1996)BrJCancer73：1366-72；Hills，D.，等(1995)IntJCancer63：537-43)。经用该独特的de2-7肽免疫后分离的一系列小鼠单抗均显示对该截短受体的选择性和特异性，以及靶向裸小鼠中生长的de2-7EGFR阳性异种移植物(Wikstrand，C.J.，等(1995)CancerRes55：3140-8；Reist，C.J.，等(1997)CancerRes57：1510-5；Reist，C.J.，等(1995)CancerRes55：4375-82)。然而，de2-7EGFR抗体的一个潜在的缺点是仅部分显示EGFR基因扩增的肿瘤同时表达de2-7EGFR。因此，de2-7EGFR特异性抗体仅在一部分EGFR阳性肿瘤中有效。因此尽管EGFR抗体活性的现有证据是令人鼓舞的，其仍然具有上述反映的应用范围和效能的观察到的限制。因而需要开发具有广泛肿瘤效能的抗体和类似制剂，这也是本专利技术所要实现的目标。此外，不存在扩增、过表达或突变时不靶向正常组织和EGFR的抗体尤其有用。WO02092771和WO05081854已描述了一个这样的抗体——单克隆抗体mAb806。其他此类抗体是需要和期望的。本文中参考文献的引用不应被解释为承认其构成本专利技术的现有技术。
技术实现思路
本专利技术的抗体抗体175及其片段或本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.分离的抗体，其识别肿瘤发生、过度增殖或异常细胞内发现、正常细胞中检测不到的EGFR表位，其中所述抗体不识别接合肽LEEKKGNYVVTDH(SEQ ID NO：13)，所述抗体具有包含选自SEQ ID NOs:1‑3的氨基酸序列的轻链可变区CDR结构域序列，以及包括选自SEQ ID NOs:4‑6的氨基酸序列的重链可变区CDR结构域序列。
【技术特征摘要】
2007.08.14 US 60/9646921.分离的抗体，其识别肿瘤发生、过度增殖或异常细胞内发现、正常细胞中检测不到的EGFR表位，其中所述抗体不识别接合肽LEEKKGNYVVTDH(SEQIDNO：13)，所述抗体具有包含选自SEQIDNOs:1-3的氨基酸序列的轻链可变区CDR结构域序列，以及包括选自SEQIDNOs:4-6的氨基酸序列的重链可变区CDR结构域序列。2.权利要求1的抗体，其识别EGFR氨基酸肽表位287CGADSYEMEEDGVRKC302(SEQIDNO：14)。3.分离的抗体，其具有包含SEQIDNOs:4、5和6的重链可变区CDR1、2和3序列。4.分离的抗体，其具有包含SEQIDNOs:1、2和3的轻链可变区CDR1、2和3序列。5.根据权利要...
【专利技术属性】
技术研发人员：TG约翰斯，AM斯科特，AW伯吉斯，LJ奥尔德，
申请(专利权)人：路德维格癌症研究所有限公司，
类型：发明
国别省市：瑞士,CH
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