用于治疗癌症的抗ADAM28抗体制造技术

本发明专利技术提供了一种抗体，所述抗体特异性结合人ADAM28，抑制人ADAM28的酶活性，并且具有抑制表达人ADAM28的癌细胞的转移的活性。本发明专利技术的抗体可以是人抗体。

Anti ADAM28 antibodies for cancer treatment

The present invention provides an antibody which specifically binds to human ADAM28, inhibits the enzyme activity of human ADAM28, and has the activity of inhibiting the metastasis of cancer cells expressing human ADAM28. The antibody of the invention can be human antibody.

【技术实现步骤摘要】
用于治疗癌症的抗ADAM28抗体本申请是国际申请日为2013年10月01日、国际申请号为PCT/JP2013/076745、进入国家阶段的申请号为201380058516.5、专利技术名称为“用于治疗癌症的抗ADAM28抗体”的PCT申请的分案申请。
本专利技术涉及抗人ADAM28抗体及其药物用途。
技术介绍
ADAM蛋白(解联蛋白和金属蛋白酶)是参与跨膜蛋白的胞外结构域脱落、细胞粘附和浸润的多功能蛋白(非专利文献1,2)。人基因组含有25种ADAM，其包括四种假基因和21种ADAM，所述21种ADAM由表现出蛋白水解活性的13种蛋白水解性ADAM和八种非蛋白水解性ADAM构成(非专利文献1,3)。蛋白水解性ADAM共享基质金属蛋白酶(MMP)的金属蛋白酶结构域，且典型的蛋白水解性ADAM蛋白包含肽原、金属蛋白酶、解联蛋白样(disintegrin-like)、富含半胱氨酸、表皮生长因子样、跨膜和细胞质结构域(非专利文献3-9)。许多蛋白水解性ADAM，包括ADAM8、ADAM9、ADAM12、ADAM15、ADAM17、ADAM19和ADAM28，在人癌症中过表达，且与肿瘤生长和进展相关(非专利文献5,9)。本专利技术人的先前研究已经表明，ADAM28(也称为ADAM金属肽酶结构域28)(其具有两种替代亚型，包括原型膜锚定形式(ADAM28m)和短分泌形式(ADAM28)(非专利文献5,10,11))在人非小细胞肺癌和乳腺癌中大量表达(非专利文献12,13)。通过原位杂交和免疫组织化学，本专利技术人已经表明，ADAM28主要在癌组织中含有的癌细胞中表达，并且ADAM28的mRNA表达水平与乳腺癌的细胞增殖(非专利文献13)且与非小细胞肺癌中的癌细胞增殖和浸润(非专利文献12)相关。在平行研究中，本专利技术人显示，非小细胞肺癌患者中的血清ADAM27水平基本上随着肿瘤、淋巴结转移和癌症复发的进展而增加(非专利文献14)。这些数据暗示，ADAM28参与特别是人癌症中的细胞增殖和转移。本专利技术人已经表明，ADAM28通过选择性消化IGF-I/IGFBP-3复合物的IGF-结合蛋白-3(IGFBP-3)经由胰岛素样生长因子-I(IGF-I)的增强的生物利用度而有助于癌细胞增殖(非专利文献13)，并且通过消化乳腺癌中的结缔组织生长因子有助于血管生成(非专利文献15)。噬菌体展示方法是已经通过在功能肽或蛋白和编码其的DNA之间以噬菌体颗粒的形式形成一一对应而实现体外高速选择的展示技术之一。这种噬菌体展示方法已经被应用于抗体选择，并且通过该方法获得的许多抗体已经被开发作为药物(非专利文献16)。此外，也已经建立了通过组合人人工抗体文库和噬菌体展示方法而获得特异性抗体的方法，而此类方法已经由多个公司实施，如MorphoSys的HuCAL(人组合抗体文库(HumanCombinatorialAntibodyLibrary))所证明。[文献列表][非专利文献]非专利文献1:MolAspectsMed.2008;29(5):258-289非专利文献2:SeminCellDevBiol.2009;20(2):138-145非专利文献3:PatholInt.2010;60(7):477-496非专利文献4:GenesDev.2003;17(1):7-30非专利文献5:CancerSci.2007;98(5):621-628非专利文献6:NatRevMolCellBiol.2005;6(1):32-43非专利文献7:Kelley’sTextbookofRheumatology.8thed.Philadelphia,PA:ElsevierSaunders;2009:115-134非专利文献8:CurrOpinCellBiol.2003;15(5):598-606非专利文献9:NatRevCancer.2008;8(12):929-941非专利文献10:JBiolChem.1999;274(41):29251-29259非专利文献11:CurrPharmDes.2009;15(20):2349-2358非专利文献12:IntJCancer.2006;118(2):263-273非专利文献13:CancerRes.2006;66(20):9913-9920非专利文献14:IntJCancer.2010;127(8):1844-1856非专利文献15:BiochemBiophysResCommun.2010;402(4):651-657非专利文献16:Rothe,C.etal.J.Mol.Biol.2008;376:1182-1200。
技术实现思路
本专利技术待解决的问题本专利技术的一个目标是提供可用于预防或治疗癌症或抑制癌症转移的抗人ADAM28抗体。解决问题的方法为了解决上述问题，本专利技术人已经制备结合人ADAM28的多种抗ADAM28抗体。作为结果，他们已经发现，一些制备的抗人ADAM28抗体抑制ADAM28的酶活性，并且显示对癌细胞增殖的优异的抑制作用，和在体内模型中对癌转移的抑制作用。基于上述发现，他们已经进行了进一步研究，并且完成了本专利技术。因此，本专利技术涉及以下内容。[1]特异性结合人ADAM28且具有抑制人ADAM28的酶活性的活性的抗体。[2][1]的抗体，其在包含SEQIDNO:21、22或23显示的氨基酸序列的表位处结合人ADAM28。[3][1]的抗体，其包含轻链可变区和重链可变区，其中(1)所述轻链可变区含有包含SEQIDNO:5中显示的氨基酸序列的CDR1，包含SEQIDNO:6中显示的氨基酸序列的CDR2，和包含SEQIDNO:7中显示的氨基酸序列的CDR3，并且所述重链可变区含有包含SEQIDNO:8中显示的氨基酸序列的CDR1，包含SEQIDNO:9中显示的氨基酸序列的CDR2，和包含SEQIDNO:10中显示的氨基酸序列的CDR3；(2)所述轻链可变区含有包含SEQIDNO:5中显示的氨基酸序列的CDR1，包含SEQIDNO:6中显示的氨基酸序列的CDR2，和包含SEQIDNO:7中显示的氨基酸序列的CDR3，并且所述重链可变区含有包含SEQIDNO:8中显示的氨基酸序列的CDR1，包含SEQIDNO:9中显示的氨基酸序列的CDR2，和包含SEQIDNO:10中显示的氨基酸序列的CDR3，并且在选自SEQIDNO:5、6和7中显示的氨基酸序列的至少一条氨基酸序列中取代、缺失、插入和/或添加1至3个氨基酸，和/或在选自SEQIDNO:8、9和10中显示的氨基酸序列的至少一条氨基酸序列中取代、缺失、插入和/或添加1至3个氨基酸；(3)所述轻链可变区含有包含SEQIDNO:11中显示的氨基酸序列的CDR1，包含SEQIDNO:12中显示的氨基酸序列的CDR2，和包含SEQIDNO:13中显示的氨基酸序列的CDR3，并且所述重链可变区含有包含SEQIDNO:14中显示的氨基酸序列的CDR1，包含SEQIDNO:15中显示的氨基酸序列的CDR2，和包含SEQIDNO:16中显示的氨基酸序列的CDR3；或(4)所述轻链可变区含有包含SEQIDNO:11中显示的氨基酸序列的CDR1，包含SEQIDNO:12中显示的氨基酸序列的CDR2，本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.在包含SEQ ID NO: 22显示的氨基酸序列的表位处特异性结合人ADAM28且具有抑制人ADAM28的酶活性的活性的抗体。

【技术特征摘要】
2012.11.09 US 61/7244841.在包含SEQIDNO:22显示的氨基酸序列的表位处特异性结合人ADAM28且具有抑制人ADAM28的酶活性的活性的抗体。2.权利要求1的抗体，其包含轻链可变区和重链可变区，其中(1)所述轻链可变区含有包含SEQIDNO:11中显示的氨基酸序列的CDR1，包含SEQIDNO:12中显示的氨基酸序列的CDR2，和包含SEQIDNO:13中显示的氨基酸序列的CDR3，并且所述重链可变区含有包含SEQIDNO:14中显示的氨基酸序列的CDR1，包含SEQIDNO:15中显示的氨基酸序列的CDR2，和包含SEQIDNO:16中显示的氨基酸序列的CDR3；或(2)所述轻链可变区含有包含SEQIDNO:11中显示的氨基酸序列的CDR1，包含SEQIDNO:12中显示的氨基酸序列的CDR2，和包含SEQIDNO:13中显示的氨基酸序列的CDR3，并且所述重链可变区含有包含SEQIDNO:14中显示的氨基酸序列的CDR1，包含SEQIDNO:15中显示的氨基酸序列的CDR2，和包含SEQIDNO:16中显示的氨基酸序列的CDR3，并且在选自SEQIDNO:11、12和13中显示的氨基酸序列的至少一条氨基酸序列中取代、缺失、插入和/或添加1至3个氨...

【专利技术属性】
技术研发人员：宫越阳，松本令奈，加藤静惠，速水友纪，望月早月，下田将之，冈田保典，
申请(专利权)人：基因先端领域株式会社，学校法人庆应义塾，
类型：发明
国别省市：日本,JP