细黄链霉菌固体发酵培养基、制备方法及其发酵方法、发酵产物、生防产品和应用技术

本发明专利技术提供了一种细黄链霉菌固体发酵培养基、制备方法及其发酵方法、发酵产物、生防产品和应用，涉及微生物发酵技术领域。细黄链霉菌固体发酵培养基包括以下重量份的组分：麸皮40‑50份、稻壳15‑25份、米糠25‑35份、碳酸钙3‑7份和水。细黄链霉菌的发酵方法包括：任选地将细黄链霉菌菌株经种子活化和液体种子培养后，采用细黄链霉菌固体发酵培养基进行发酵培养，得到发酵产物。本发明专利技术缓解了现有细黄链霉菌活菌数和产孢量少的缺陷，本发明专利技术通过采用上述培养基进行固体发酵培养，发酵周期短，活菌数多，适合工业化生产，得到的发酵产物在防治农作物青枯病方面效果显著，提高了农作物的品质和产量。

Solid fermentation medium for Streptomyces Finus, preparation method, fermentation method, fermentation product, biocontrol product and application thereof

The invention provides a solid fermentation medium of Streptomyces fine Streptomyces, a preparation method, a fermentation method, a fermentation product, a biocontrol product and an application, which relates to the field of microbial fermentation technology. The solid fermentation medium of Streptomyces asici consists of the following weight components: 40 bran, 50 parts, 15 rice husks, 25 rice husks, 35 rice bran 25, 7 calcium carbonate 3, and water. The fermentation methods of Streptomyces fine Streptomyces include: the fermentation medium of Streptomyces fine Streptomyces strains and the culture medium of Streptomyces fine Streptomyces are selected, and the fermentation products are obtained. The invention alleviates the defects of the living bacteria number and the less sporulation of the existing Streptomyces. By adopting the medium of the culture medium, the fermentation period is short and the living bacteria are many, which are suitable for industrial production. The results of the obtained fermentation products are remarkable in preventing and controlling the bacterial wilt of crops, and the quality and production of the crops are improved. Quantity.

【技术实现步骤摘要】
细黄链霉菌固体发酵培养基、制备方法及其发酵方法、发酵产物、生防产品和应用
本专利技术涉及微生物发酵
，具体而言，涉及一种细黄链霉菌固体发酵培养基、制备方法及其发酵方法、发酵产物、生防产品和应用。
技术介绍
植物病害是严重威胁农业生产的自然生物灾害之一，利用化学药剂不仅杀死了有益农田微生物，破坏农田生态系统，还残留于土壤、水体、农副产品和畜产品中，对人类健康造成威胁，而且使许多病原菌产生抗药性，导致化学药剂的使用频率和剂量逐年增加，防治效果差。而生物防治对环境中的有益微生物无影响、无残留无污染、不杀害天敌、不会产生抗药性、有利于人畜安全及环境保护、成本低、防治结合、是一种无公害植保新技术。青枯病是由青枯雷尔氏菌(Ralstoniasolanacearum)侵染引起，是一种毁灭性的土传病害，该病原菌可侵染番茄、茄子、辣椒、马铃薯、花生、烟草等许多具有重要经济价值的栽培植物，对该病的防治多以化学防治和抗病育种为主，化学防治在青枯病的防治中一直占主要地位，但是长期大量反复使用会对土壤和地下水造成严重污染，破坏生态平衡。抗病育种也存在诸多问题，目前还没有发现对该病有高抗性的品种。近年来，生物防治的研究和开发已经成为防治青枯病的重点和热点。放线菌种类繁多，代谢功能各异，很多放线菌可产生多种抗生素，在微生物产生的新生物活性物质中，放线菌产生的就占到74％。用放线菌制成的活细胞制剂，具有无毒、无残留、不伤害非靶标微生物、与环境兼容性好、防病持效期长等优点。放线菌活菌制剂的发酵生产、制剂加工、存储剂应用所要求的条件极为严格，这些条件随放线菌的不同变化较大。细黄链霉菌(Streptomycesmicroflavus)是链霉菌属(Streptomyces)的一个种类，其自身代谢产物可有效地促进植物生长，可产生玉米素、激动素等有效活性成分，但是，土壤中自然生长的细黄链霉菌数量太少，无法发挥上述作用。而现有技术中细黄链霉菌发酵后活菌数和产孢量少，菌剂的活性和质量稳定性差。有鉴于此，特提出本专利技术。
技术实现思路
本专利技术的目的之一在于提供一种细黄链霉菌固体发酵培养基，采用该培养基培养细黄链霉菌增殖多，产孢子量多。本专利技术的目的之二在于提供一种上述细黄链霉菌固体发酵培养基的制备方法，操作简单，适合大规模生产。本专利技术的目的之三在于提供一种细黄链霉菌的发酵方法，该方法采用上述细黄链霉菌固体发酵培养基进行固体发酵培养，发酵周期短，活菌数多，活性和质量稳定性好，适合工业化生产，得到的发酵产物在防治农作物青枯病方面效果显著，提高了农作物的品质和产量。本专利技术的目的之四在于提供一种上述细黄链霉菌的发酵方法得到的细黄链霉菌发酵产物，该发酵产物中活菌数高、杂菌率低，具有高效防治农作物青枯病的效果。本专利技术的目的之五在于提供一种包括上述细黄链霉菌发酵产物的生防产品，具有与上述发酵产物相同的优势。本专利技术的目的之六在于提供一种上述细黄链霉菌发酵产物或上述生防产品在防治农作物青枯病中的应用，防治青枯病效果好。为了实现本专利技术的上述目的，特采用以下技术方案：第一方面，提供了一种细黄链霉菌固体发酵培养基，所述细黄链霉菌固体发酵培养基包括以下重量份的组分：麸皮40-50份、稻壳15-25份、米糠25-35份、碳酸钙3-7份和水；优选地，所述细黄链霉菌固体发酵培养基包括以下重量份的组分：麸皮42-48份、稻壳18-23份、米糠28-32份、碳酸钙3-6份和水；优选地，所述细黄链霉菌固体发酵培养基包括以下重量份的组分：麸皮44-46份、稻壳19-21份、米糠29-31份、碳酸钙4-5份和水；优选地，所述细黄链霉菌固体发酵培养基的含水率为45-55％。第二方面，提供了一种上述细黄链霉菌固体发酵培养基的制备方法，包括以下步骤：将配方量的麸皮、稻壳、米糠、碳酸钙和水混合均匀，经灭菌处理，得到细黄链霉菌固体发酵培养基；优选地，灭菌温度为110-130℃，和/或，灭菌时间为30-60min，优选121℃灭菌40min。第三方面，提供了一种细黄链霉菌的发酵方法，包括以下步骤：任选地将细黄链霉菌菌株经种子活化和液体种子培养后，采用上述细黄链霉菌固体发酵培养基或上述细黄链霉菌固体发酵培养基的制备方法制备得到的细黄链霉菌固体发酵培养基进行发酵培养，得到发酵产物。优选地，在本专利技术提供的技术方案的基础上，细黄链霉菌的发酵方法包括以下步骤：(a)斜面种子活化：将细黄链霉菌菌株在无菌条件下接种于斜面培养基上，得到斜面种子；(b)液体种子培养：将步骤(a)得到的斜面种子接种于液体培养基中，得到液体种子；(c)发酵培养：将步骤(b)得到的液体种子接种于所述细黄链霉菌固体发酵培养基中，得到发酵产物；(d)将步骤(c)得到的发酵产物干燥后，得到干燥的发酵产物。优选地，在本专利技术提供的技术方案的基础上，步骤(c)中液体种子的接种量为15-25％(v/w)；优选地，步骤(c)中培养温度28-30℃，和/或，培养时间120-168h；优选地，步骤(a)中培养温度28-30℃，和/或，培养时间96-120h；优选地，步骤(b)中斜面种子用无菌水洗脱，接种于液体培养基中，接种量为5-10％(v/v)；优选地，步骤(b)中培养温度28-30℃，和/或，培养时间30-48h。优选地，在本专利技术提供的技术方案的基础上，步骤(a)中斜面培养基包括8-12g/L的可溶性淀粉、8-12g/L的葡萄糖、2-5g/L的酵母粉、0.5-1g/L的磷酸氢二钾、0.5-1g/L的硫酸镁和15-25g/L的琼脂，pH值为7.0-7.5；优选地，步骤(b)中液体培养基包括8-12g/L的蛋白胨、8-12g/L的酵母浸粉、15-25g/L的葡萄糖和5-10g/L的碳酸钙，pH值为7.0-7.5；优选地，斜面培养基和液体培养基均独立地在使用前进行灭菌处理，灭菌温度为110-130℃，和/或，灭菌时间为20-30min，优选121℃灭菌25min；优选地，步骤(d)中发酵产物在40-50℃下干燥至含水率小于10％。优选地，在本专利技术提供的技术方案的基础上，上述细黄链霉菌的发酵方法，包括以下步骤：(a)斜面种子活化：将细黄链霉菌菌株在无菌条件下接种于无菌斜面培养基上，培养温度28-30℃，培养时间96-120h，得到斜面种子；所述斜面培养基包括8-12g/L的可溶性淀粉、8-12g/L的葡萄糖、2-5g/L的酵母粉、0.5-1g/L的磷酸氢二钾、0.5-1g/L的硫酸镁和15-25g/L的琼脂，pH值为7.0-7.5；(b)液体种子培养：将步骤(a)得到的斜面种子用无菌水洗脱，以5-10％(v/v)的接种量接种于无菌液体培养基中，培养温度28-30℃，培养时间30-48h，得到液体种子；所述液体培养基包括8-12g/L的蛋白胨、8-12g/L的酵母浸粉、15-25g/L的葡萄糖和5-10g/L的碳酸钙，pH值为7.0-7.5；(c)固体发酵培养：将步骤(b)得到的液体种子以15-25％(v/w)的接种量接种于无菌细黄链霉菌固体发酵培养基中，混合均匀，培养温度28-30℃，培养时间120-168h，得到发酵产物；所述细黄链霉菌固体发酵培养基包括40-50重量份的麸皮、15-25重量份的稻壳、25-35重量份的米糠、3-7重量份的碳酸钙和水，含水率本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种细黄链霉菌固体发酵培养基，其特征在于，所述细黄链霉菌固体发酵培养基包括以下重量份的组分：麸皮40‑50份、稻壳15‑25份、米糠25‑35份、碳酸钙3‑7份和水；优选地，所述细黄链霉菌固体发酵培养基包括以下重量份的组分：麸皮42‑48份、稻壳18‑23份、米糠28‑32份、碳酸钙3‑6份和水；优选地，所述细黄链霉菌固体发酵培养基包括以下重量份的组分：麸皮44‑46份、稻壳19‑21份、米糠29‑31份、碳酸钙4‑5份和水；优选地，所述细黄链霉菌固体发酵培养基的含水率为45‑55％。

【技术特征摘要】
1.一种细黄链霉菌固体发酵培养基，其特征在于，所述细黄链霉菌固体发酵培养基包括以下重量份的组分：麸皮40-50份、稻壳15-25份、米糠25-35份、碳酸钙3-7份和水；优选地，所述细黄链霉菌固体发酵培养基包括以下重量份的组分：麸皮42-48份、稻壳18-23份、米糠28-32份、碳酸钙3-6份和水；优选地，所述细黄链霉菌固体发酵培养基包括以下重量份的组分：麸皮44-46份、稻壳19-21份、米糠29-31份、碳酸钙4-5份和水；优选地，所述细黄链霉菌固体发酵培养基的含水率为45-55％。2.一种权利要求1所述的细黄链霉菌固体发酵培养基的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：将配方量的麸皮、稻壳、米糠、碳酸钙和水混合均匀，经灭菌处理，得到细黄链霉菌固体发酵培养基；优选地，灭菌温度为110-130℃，灭菌时间为30-60min，优选121℃灭菌40min。3.一种细黄链霉菌的发酵方法，其特征在于，包括以下步骤：任选地将细黄链霉菌菌株经种子活化和液体种子培养后，采用权利要求1所述的细黄链霉菌固体发酵培养基或权利要求2所述的细黄链霉菌固体发酵培养基的制备方法制备得到的细黄链霉菌固体发酵培养基进行发酵培养，得到发酵产物。4.按照权利要求3所述的细黄链霉菌的发酵方法，其特征在于，包括以下步骤：(a)斜面种子活化：将细黄链霉菌菌株在无菌条件下接种于斜面培养基上，得到斜面种子；(b)液体种子培养：将步骤(a)得到的斜面种子接种于液体培养基中，得到液体种子；(c)发酵培养：将步骤(b)得到的液体种子接种于所述细黄链霉菌固体发酵培养基中，得到发酵产物；(d)将步骤(c)得到的发酵产物干燥后，得到干燥的发酵产物。5.按照权利要求4所述的细黄链霉菌的发酵方法，其特征在于，步骤(c)中液体种子的接种量为15-25％(v/w)；优选地，步骤(c)中培养温度28-30℃，培养时间120-168h；优选地，步骤(a)中培养温度28-30℃，培养时间96-120h；优选地，步骤(b)中斜面种子用无菌水洗脱，接种于液体培养基中，接种量为5-10％(v/v)；优选地，步骤(b)中培养温度28-30℃，培养时间30-48h。6.按照权利要求4或5所述的细黄链霉菌的发酵方法，其特征在于，步骤(a)中斜面培养基包括8-12g/L的可溶性淀粉、8-12g/L的葡萄糖、2-5g/L的酵母粉、0.5-1g/L的磷酸氢二钾、0.5-1g/...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘峰，王江伟，潘明，王传磊，王珍伟，张鲁新，王培，朱洪菊，
申请(专利权)人：山东五福生生态工程有限公司，
类型：发明
国别省市：山东,37