一种治疗糖尿病药物的检测方法技术

本技术方案公开了一种治疗糖尿病药物的检测方法，所述治疗糖尿病药物是按如下方法制备的：以楝叶、香椿叶为原料，提取，分离，纯化，即得含有山楝体C、山楝体F、毛麻楝内酯K的治疗糖尿病药物，其检测方法为，采用硅胶G薄层板检测，可见3个特征斑点,HPLC检测，可见3个特征色谱峰。

【技术实现步骤摘要】
一种治疗糖尿病药物的检测方法
本专利技术属于生物医药领域，涉及一种治疗糖尿病药物的检测方法，具体是涉及一种以楝叶和香椿叶为原料制备的治疗糖尿病药物的检测方法。
技术介绍
糖尿病是一种由于胰岛素分泌不足或外周组织对胰岛素不敏感引起的代谢性疾病，以持续的高血糖状态为特征，并可能引起各种组织、脏器（如眼、肾、心脏、血管、神经等）的长期损害、功能不全或衰竭。根据发病机制不同，糖尿病可以被分为Ⅰ型糖尿病、Ⅱ型糖尿病、妊娠糖尿病和其他类型糖尿病。据统计，2015年全球20-79岁的人中有约4.15亿人患糖尿病（患病率8.8%），另外有3.18亿人糖耐量受损（前期患病率6.7%）。中国是全球糖尿病患者第一大国，2015年病患人数高达1.096亿人，130万人死于糖尿病及其并发症。同时据IDF预测，如果不加干预，2040年全球糖尿病患者将达6.42亿，糖尿病前期人群4.81亿，我国患者数量将上升至1.54亿。据统计，目前在糖尿病患者中存在“1/2定律”，即全球糖尿病患者中平均而言仅有50%得知自己已患病。根据2013年宁光教授发表在JAMA上的流行病学研究显示，我国糖尿病病患知晓率仅为30.1%。同时，中国成年人中“准糖尿病患者”人群可能高达50.1%。而在美国，根据2014年CDC的调查数据显示，成年人中“准糖人”的比例为37%。我国糖尿病患知晓率仅为30.1%，其中仅有25.8%的患者得到治疗，而在进行治疗的患者中，血糖得到良好控制的仅有39.7%，据此测算，糖尿病患者中，血糖得到控制的患者比例仅为3.08%。在城市和乡村，上述数据存在显著差异，且不同性别之间差异也较大，经济不发达地区的女性糖尿病的控制情况非常低。在美国，统计显示患者糖尿病患知晓率约为75%，约85.3%的患者采用胰岛素或者口服降糖药治疗。2015年美国在糖尿病领域的医疗花销高达3200亿美元（包括保险、治疗、护理费用等），位居全球糖尿病花销第一，占比超过全球10%。中国位居第二，为510亿美元。如果我们按照两国糖尿病患者数量进行估算，美国与中国单一糖尿病患者的年花销分别为1092与465美元。2015年国内糖尿病用药终端市场规模为413.8亿元。同比增长了6.8%。其中：口服降糖药占据糖尿病用药233.6亿元（占比56.6%），同比增长了8.8%。其中α-糖苷酶抑制剂类、磺酰脲类和双胍类分别占比30.1%、24.1%和14.8%。胰岛素促泌剂类共占比29.2%。GLP-1受体激动剂与DPP-4抑制剂占比仅为1.4%。单一品种来看，畅销产品前三名分别为阿卡波糖、二甲双胍和瑞格列奈，市场份额分别为27.9%、14.8%和13.2%。目前尚未有完全根治糖尿病的办法，控制血糖是糖尿病治疗的核心。对于糖尿病患者而言，疾病的治疗是一个综合管理的过程，需要饮食、运动、药物、血糖监测和健康教育“五架马车”并驾齐驱。楝叶:为楝科植物川楝或苦楝的叶。夏、秋采，晒干。收载于《中药大辞典》。药理作用：苦楝子叶的水提取液（2～5％）可防止蚱蜢、蝗虫等对植物之侵害，而对人、畜无毒，其有效成分为类胡萝卜烃。性味：《广东中药》Ⅱ记载“苦，寒，有小毒。”功能主治：止痛，杀虫。治疝气，蛔虫，跌打肿痛，疔疮，皮肤湿疹。《纲目》：“疝入囊痛，临发时煎酒饮。”《广东中药》Ⅱ：“苦楝树叶，研末外敷。治跌打肿痛，止刀伤出血。”香椿叶：楝科椿属植物香椿Toonasinensis（A.Juss.）Roem.,[CedrelasinensisA.Juss.]的叶。夏秋采叶。收载于《全国中草药汇编》。性味苦、涩，温。功能主治祛风利湿，止血止痛。叶及嫩枝：痢疾。香椿根皮：用于痢疾，肠炎，泌尿道感染，便血，血崩，白带，风湿腰腿痛。香椿果：胃、十二指肠溃疡，慢性胃炎。国内外尚未有完全根治糖尿病的药物，迄今为止，尚未见楝叶及香椿叶中提取物治疗糖尿病的相关文献或专利等报道，更无楝叶及香椿叶中提取的治疗糖尿病药物的薄层检测相关报道。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种以楝叶及香椿叶为原料制备的治疗糖尿病药物的检测方法。本专利技术是通过如下技术方案实现的：本专利技术所用楝叶为楝科植物川楝或苦楝的叶，香椿叶为楝科椿属植物香椿Toonasinensis（A.Juss.）Roem.,[CedrelasinensisA.Juss.]的叶。治疗糖尿病药物的制备方法，是通过如下步骤实现的:（1）取相同重量的楝叶、香椿叶，混匀，粉碎，过20目筛，用石油醚为溶剂，50℃提取2次，每次提取时间为3小时，每次溶剂用量为楝叶及香椿叶总重量的12倍，滤过，合并石油醚提取液，减压回收石油醚，浓缩干燥得粗提物A，石油醚提取后的药渣备用；（2）将步骤（1）石油醚提取后的药渣，用体积比1:6的乙酸乙酯-甲醇混合溶剂提取，70℃提取3次，每次提取时间为2小时，每次溶剂用量为楝叶及香椿叶总重量的10倍，滤过，合并乙酸乙酯-甲醇提取液，减压回收溶剂，浓缩干燥得粗提物B，乙酸乙酯-甲醇提取后的药渣备用；（3）将步骤（2）乙酸乙酯-甲醇提取后的药渣，用体积比3:7的水-乙醇混合溶剂提取，80℃提取2次，每次提取时间为1.5小时，每次溶剂用量为楝叶及香椿叶总重量的15倍，滤过，合并水-乙醇提取液，减压回收溶剂，浓缩干燥得粗提物C，水-乙醇提取后的药渣备用；（4）将步骤（3）水-乙醇提取后的药渣，用水提取，90℃提取2次，每次提取时间为1小时，每次溶剂用量为楝叶及香椿叶总重量的8倍，滤过，合并水提取液，减压浓缩至浸膏，干燥得粗提物D；（5）将步骤（2）得到的粗提物B，经过重量份数比1:2混合均匀的MCI凝胶-聚酰胺混合色谱柱，先用体积比5:100的甲醇-水洗脱，洗脱量为10个色谱柱体积，再用体积比20:100的甲醇-水洗脱，洗脱量为15个色谱柱体积，收集体积比20:100的甲醇-水洗脱液合并，回收溶剂，干燥得提取物E；（6）将步骤（3）得到的粗提物C，经过重量份数比1:1混合均匀的S8大孔吸附树脂-LSA21大孔吸附树脂混合树脂柱，先用体积比10:100的乙醇-水洗脱，洗脱量为3个树脂柱体积，再用体积比40:100的乙醇-水洗脱，洗脱量为3个树脂柱体积，收集体积比40:100的乙醇-水洗脱液合并，回收溶剂，干燥得提取物F；（7）按重量比1:2将步骤（5）得到的提取物E与步骤（6）得到的提取物F混匀，即得治疗糖尿病药物。本技术方案的治疗糖尿病药物同时含有：山楝体C、山楝体F、毛麻楝内酯K。本技术方案的治疗糖尿病药物可用于制备治疗糖尿病药物，治疗糖尿病有效。治疗糖尿病药物的检测方法：取治疗糖尿病药物50mg，加体积比3:1的醋酸乙酯-二氯甲烷混合溶液25ml，超声处理30min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇10ml使溶解，作为供试品溶液；另取楝叶、香椿叶对照药材各3g，混匀，粉碎过80目筛，同法制成对照药材溶液；吸取上述两种溶液各5µl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以体积比8:3:2:1:6的正己烷－丙酮－醋酸甲酯－甲醇-水的上层溶剂为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茴香醛试液，热风吹至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显3个相同颜色的斑点；取治疗糖尿病药物50mg，加体积比6:4的醋酸乙酯-甲醇混合溶液50ml本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种治疗糖尿病药物的检测方法，其特征在于所述的治疗糖尿病药物按如下方法制备:（1）取相同重量的楝叶、香椿叶，混匀，粉碎，过20目筛，用石油醚为溶剂，50℃提取2次，每次提取时间为3小时，每次溶剂用量为楝叶及香椿叶总重量的12倍，滤过，合并石油醚提取液，减压回收石油醚，浓缩干燥得粗提物A，石油醚提取后的药渣备用；（2）将步骤（1）石油醚提取后的药渣，用体积比1:6的乙酸乙酯‑甲醇混合溶剂提取，70℃提取3次，每次提取时间为2小时，每次溶剂用量为楝叶及香椿叶总重量的10倍，滤过，合并乙酸乙酯‑甲醇提取液，减压回收溶剂，浓缩干燥得粗提物B，乙酸乙酯‑甲醇提取后的药渣备用；（3）将步骤（2）乙酸乙酯‑甲醇提取后的药渣，用体积比3:7的水‑乙醇混合溶剂提取，80℃提取2次，每次提取时间为1.5小时，每次溶剂用量为楝叶及香椿叶总重量的15倍，滤过，合并水‑乙醇提取液，减压回收溶剂，浓缩干燥得粗提物C，水‑乙醇提取后的药渣备用；（4）将步骤（3）水‑乙醇提取后的药渣，用水提取，90℃提取2次，每次提取时间为1小时，每次溶剂用量为楝叶及香椿叶总重量的8倍，滤过，合并水提取液，减压浓缩至浸膏，干燥得粗提物D；（5）将步骤（2）得到的粗提物B，经过重量份数比1:2混合均匀的MCI 凝胶‑聚酰胺混合色谱柱，先用体积比5:100的甲醇‑水洗脱，洗脱量为10个色谱柱体积，再用体积比20:100的甲醇‑水洗脱，洗脱量为15个色谱柱体积，收集体积比20:100的甲醇‑水洗脱液合并，回收溶剂，干燥得提取物E；（6）将步骤（3）得到的粗提物C，经过重量份数比1:1混合均匀的S8大孔吸附树脂‑LSA21大孔吸附树脂混合树脂柱，先用体积比10:100的乙醇‑水洗脱，洗脱量为3个树脂柱体积，再用体积比40:100的乙醇‑水洗脱，洗脱量为3个树脂柱体积，收集体积比40:100的乙醇‑水洗脱液合并，回收溶剂，干燥得提取物F；（7）按重量比1:2将步骤（5）得到的提取物E与步骤（6）得到的提取物F混匀，即得治疗糖尿病药物；按如下方法检测：...

【技术特征摘要】
1.一种治疗糖尿病药物的检测方法，其特征在于所述的治疗糖尿病药物按如下方法制备:（1）取相同重量的楝叶、香椿叶，混匀，粉碎，过20目筛，用石油醚为溶剂，50℃提取2次，每次提取时间为3小时，每次溶剂用量为楝叶及香椿叶总重量的12倍，滤过，合并石油醚提取液，减压回收石油醚，浓缩干燥得粗提物A，石油醚提取后的药渣备用；（2）将步骤（1）石油醚提取后的药渣，用体积比1:6的乙酸乙酯-甲醇混合溶剂提取，70℃提取3次，每次提取时间为2小时，每次溶剂用量为楝叶及香椿叶总重量的10倍，滤过，合并乙酸乙酯-甲醇提取液，减压回收溶剂，浓缩干燥得粗提物B，乙酸乙酯-甲醇提取后的药渣备用；（3）将步骤（2）乙酸乙酯-甲醇提取后的药渣，用体积比3:7的水-乙醇混合溶剂提取，80℃提取2次，每次提取时间为1.5小时，每次溶剂用量为楝叶及香椿叶总重量的15倍，滤过，合并水-乙醇提取液，减压回收溶剂，浓缩干燥得粗提物C，水-乙醇提取后的药渣备用；（4）将步骤（3）水-乙醇提取后的药渣，用水提取，90℃提取2次，每次提取时间为1小时，每次溶剂用量为楝叶及香椿叶总重量的8倍，滤过，合并水提取液，减压浓缩至浸膏，干燥得粗提物D；（5）将步骤（2）得到的粗提物B，经过重量份数比1:2混合均匀的MCI凝胶-聚酰胺混合色谱柱，先用体积比5:100的甲醇-水洗脱，洗脱量为10个色谱柱体积，再用体积比20:100的甲醇-水洗脱，洗脱量为15个色谱柱体积，收集体积比20:100的甲醇-水洗脱液合并，回收溶剂，干燥得提取物E；（6）将步骤（3）得到的粗提物C，经过重量份数比1:1混合均匀的S8大孔吸附树脂-LSA21大孔吸附树脂混合树脂柱，先用体积比10:100的乙醇-水洗脱，洗脱量为3个树脂柱体积，再用体积比40:100的乙醇-水洗脱，洗脱量为3个树脂柱体积，收集体积比40:100的乙醇-水洗脱液合并，回收溶剂，干燥得提取物F；（7）按重量比1:2将步骤（5）得到的提取物E与步骤（6）得到的提取物F混匀，即得治疗糖尿病药物；按如下方法检测：取治疗糖尿病药物50mg，加体积比3:1的醋酸乙酯-二氯甲烷混合溶液25ml，超声处理30min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇10ml使溶解，作为供试品溶液；另取楝叶、香椿叶对照药材各3g，混匀，粉碎过80目筛，同法制成对照药材溶液；吸取上述两种溶液各5µl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以体积比8:3:2:1:6的正己烷－丙酮－醋酸甲酯－甲醇-水的上层溶剂为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茴香醛试液，热风吹至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显3个相同颜色的斑点；取治疗糖尿病药物50mg，加体积比6:4的醋酸乙酯-甲醇混合溶液50ml，超声处理30min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇10ml使溶解，作为供试品溶液；另取楝叶、香椿叶对照药材各3g，混匀，粉碎过80目筛，同法制成对照药材溶液；吸取上述两种溶液各5µl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以体积比6:4:0.5:0.1的醋酸乙酯-二氯甲烷－丙酮-甲醇为展开剂，展开，展距15cm，取出，晾干，喷以体积...

【专利技术属性】
技术研发人员：不公告发明人，
申请(专利权)人：济南昊雨青田医药技术有限公司，
类型：发明
国别省市：山东,37