细胞改造的方法技术

本发明专利技术公开了改造细胞的方法，所述细胞为具有特异性的基因断点的体细胞。该方法包括：基于所述基因断点，对所述细胞进行靶向基因改造，以便基于所述基因断点定向插入靶序列，进而使所述细胞转变为不含基因断点的细胞。利用该方法能够有效将具有基因断点的细胞转变为不具有基因断点的体细胞。

【技术实现步骤摘要】
细胞改造的方法
本专利技术涉及生物
，具体地，本专利技术涉及细胞改造的方法。
技术介绍
目前众多疾病与体细胞的基因突变相关，通常包括体细胞自身基因突变，也包括外源基因例如病毒、细菌、癌细胞侵入所引起的疾病，例如HIV、HBV、HCV等都是由病毒侵入引起的。然而，目前对于与体细胞的基因突变相关的疾病等的研究仍有待改进。
技术实现思路
本专利技术旨在至少在一定程度上解决上述技术问题之一或至少提供一种有用的商业选择。为此，本专利技术的一个目的在于提出一种细胞改造的方法。在本专利技术的一个方面，本专利技术提供了一种细胞改造的方法，所述细胞为具有特异性的基因断点的体细胞。根据本专利技术的实施例，所述方法包括：基于所述基因断点，对所述细胞进行靶向基因改造，以便基于所述基因断点生成靶序列，利用靶序列联合基因和免疫细胞治疗等多种方法，进而使所述细胞死亡或者转变为不含基因断点的细胞。需要说明的是，本专利技术是基于专利技术人的下列发现而完成的：体细胞基因组因内源基因突变和外源基因插入产生多种新序列(novelsequence)，在序列衔接处产生基因断点(breakpoint)，它们多与各种疾病的发生发本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种细胞改造的方法，所述细胞为具有特异性的基因断点的体细胞，其特征在于，所述方法包括：基于所述基因断点，对所述细胞进行靶向基因改造，以便基于所述基因断点生成靶序列，进而使所述细胞转变为不含基因断点的细胞。

【技术特征摘要】
2016.12.14 CN 20161115643841.一种细胞改造的方法，所述细胞为具有特异性的基因断点的体细胞，其特征在于，所述方法包括：基于所述基因断点，对所述细胞进行靶向基因改造，以便基于所述基因断点生成靶序列，进而使所述细胞转变为不含基因断点的细胞。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述基因断点是由自身基因突变、外源基因侵入、病毒侵入引起的。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，预先包括通过下列步骤确定所述基因断点的步骤：将具有基因断点的细胞和对照细胞分别进行基因组测序，以便获得具有基因断点细胞的基因组测序结果和对照细胞的基因组测序结果；将所述具有基因断点的细胞的基因组测序结果和对照细胞的基因组测序结果进行比对，以便确定基因突变位点；基于所述基因突变位点，确定所述基因断点。4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述基因突变位点包括选自下列的至少之一：病毒基因整合位点、结构变异和插入缺失。5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述靶向基因改造是基于选自下列的基因编辑手段的至少之一进行的：CRISPER/CAS9技术，TALEN技术，以及ZFN技术；任选地，在进行所述靶向基因改造前：针对CRISPR/CAS9技术，预先包括通过下列步骤选择特异性靶位点：查找所述基因断点临近序列，筛选包含基因断点碱基的20bp序列，且3’含有PAM框序列特征，在全基因组中比对，选取特异性高的序列作为gRNA识别的靶点，针对TALEN技术，预先包括通过下列步骤选择特异性靶位点：查找所述基因断点临近序列，筛选Left-TAL识别序列和Right-TAL识别序列，基因断点碱基应位于左右臂识别序列和切割序列范围之内，在全基因组中比对，选取特异性高的序列作为Left-TAL和Right-TAL识别的靶点，或者针对ZFN技术，预先包括通过下列步骤选择特异性靶位点：查找所述基因断点临近序列，定制覆盖基因断点碱基的ZFNs识别序列元件；任选地，所述靶序列包括选自下列的至少之一：编码药物靶向基因的序列，编码肿瘤特异性抗原的序列，编码肿瘤免疫检查点分子的序列，编码细胞因子的序列，编码溶瘤病毒合成必须基因的序列，编码自杀基因的序列，以及恢复性序列；任选地，所述药物靶向基因包括选自表1和表2的至少之一；任选地，所述肿瘤特异性抗原为CAR-T治疗性抗原，所述CAR-T治疗性抗原包括选自CD19、CD20、CD30、EGFR、GPC-3、CD22和NKG2D的至少之一；任选地，所述细胞因子为IFN-gamma；任选地，所述自杀基因包括选自tk-GCV、CD-5-FC的至少之一。6.一种细胞改造的系统，所述细...

【专利技术属性】
技术研发人员：王飞，侯勇，赵正琦，刘耿，李波，邱思，
申请(专利权)人：深圳华大生命科学研究院，
类型：发明
国别省市：广东,44