化合物Pratensilin及其制备方法和应用技术

本发明专利技术涉及化合物(+)‑Pratensilin和(‑)‑Pratensilin的化学结构、制备方法，以及该化合物在制备抗菌药物中的应用。(+)‑Pratensilin和(‑)‑Pratensilin是本发明专利技术申请人从一株海洋放线菌Streptomyces griseus sp.KCB‑132中纯化制备的一对新化合物，研究发现化合物(+)‑Pratensilin和(‑)‑Pratensilin具有广谱抗菌活性，可明显抑制真菌及细菌的生长，具有新型抗菌药物及生物农药开发的价值。

【技术实现步骤摘要】
化合物Pratensilin及其制备方法和应用
本专利技术涉及(+)-Pratensilin和(-)-Pratensilin的结构、制备方法，以及(+)-Pratensilin和(-)-Pratensilin在制备抗菌药物及生物农药中的应用。
技术介绍
由于抗生素的滥用，耐药菌以及由耐药菌，特别是革兰氏阴性耐药菌引起的感染在全世界范围内已经到了前所未有的程度，包括亚太地区、拉丁美洲、欧洲、北美等等。世界卫生组织(WorldHealthOrganization)已经将耐药菌感染列为危害人类健康的三大因素之一。而且根据美国传染病协会(InfectiousDiseasesSocietyofAmerica)的研究以及欧洲疾病预防控制中心(EuropeanCentreforDiseasePreventionandControl)与欧洲药品管理局(EuropeanMedicinesAgency)的报道，现在可用于临床有效治疗耐药菌的候补抗生素已经越来越少。于是，美国传染病协会在2010年发起了一个“10×20”的提议：到2020年发现10个新颖、安全、高效的抗生素用于临床治疗。可见，新抗生素的发现已经成为全球科学研究人员的关注热点。本专利技术所涉及的化合物(+)-Pratensilin和(-)-Pratensilin是本专利技术申请人从一株海洋放线菌Streptomycesgriseussp.KCB-132中纯化制备的一个新化合物，研究发现该化合物(+)-Pratensilin和(-)-Pratensilin具有广谱抗菌活性，可明显的抑制真菌及细菌得生长，具有新型抗菌药物开发的价值。该化合物的化学结构、制备方法及其抗癌活性均为首次公开，因此具有突出的实质性特点。
技术实现思路
本专利技术提供一种新化合物的制备方法，及其在制备抗菌药物及生物农药中的应用。本专利技术所涉及的用于制备抗菌药物及生物农药的化合物为(+)-Pratensilin(化合物Ⅰ)和(-)-Pratensilin(化合物Ⅱ)，其化学式是：C20H15NO4，具有下列结构式(式Ⅰ和式Ⅱ)。本专利技术所涉及的化合物，即(+)-Pratensilin和(-)-Pratensilin的制备方法，工艺流程为：将海洋链霉菌Streptomycesgriseussp.KCB-132划线接种于固体培养基上，28℃培养3～4d，直至长出白色的孢子，接种到液体培养基，28℃，150～220rpm/min，摇床培养8～12d收获发酵物。过滤发酵物获得发酵液和菌丝体，发酵液经大孔吸附树脂柱提取，菌丝体经丙酮破碎提取，减压浓缩提取物，合并后利用有机溶剂萃取，减压浓缩得总浸膏。总浸膏经硅胶柱层析，进行梯度洗脱，收集洗脱液体积比1:20的洗脱组分，将收集的洗脱组分进行ODS反相柱层析，收集60～70％有机醇洗脱部分，浓缩，进行HPLC制备得到外消旋体混合物，并进一步通过手性HPLC制备得到化合物Ⅰ和Ⅱ。本工艺中所用涉及的培养基，为半海水ISP2培养基、纯海水ISP2培养基的一种,优选为半海水ISP2培养基。本工艺中所涉及的用作提取溶剂的有机醇，为甲醇、乙醇中的一种，优选为乙醇。本工艺中所涉及的大孔吸附树脂柱，为弱极性或非极性的大孔吸附树脂，优选弱极性。本工艺中所涉及的用作萃取的溶剂，为乙酸乙酯、正丁醇中的一种，优选为乙酸乙酯。本工艺中所涉及的高效液相色谱溶剂，可用甲醇、乙醇、乙腈等溶剂中的一种或几种，优选甲醇，其与水的配比优选60％。本专利技术还提供了该化合物在制备抗菌药物及生物农药中的应用。本专利技术涉及的化合物，其化学结构、制备方法及其抗菌活性，均为首次公开，不存在由其他化合物给出任何启示的可能，具备突出的实质性特点，且有望用于一种新型抗菌药物或生物农药的开发。附图说明图1(±)-Pratensilin正离子质谱图(HR-ESI-MS)。图2(±)-Pratensilin1HNMR谱图(溶剂：DMSO-d6)。图3(±)-Pratensilin13CNMR谱(溶剂：DMSO-d6)。图4(±)-PratensilinDEPT-135谱(溶剂：DMSO-d6)。图5(±)-Pratensilin1H-1HCOSY谱(溶剂：DMSO-d6)。图6(±)-PratensilinHSQC谱(溶剂：DMSO-d6)图7(±)-PratensilinHMBC谱(溶剂：DMSO-d6)。图8(±)-PratensilinNOESY谱(溶剂：DMSO-d6)。图9(-)-PratensilinX-ray谱。图10(+)-Pratensilin和(-)-PratensilinCD谱。具体实施方式下面的实施例用以解释本专利技术，但是并非对本专利技术实质内容的限制。实施例1.(+)-Pratensilin和(-)-Pratensilin的制备将海洋链霉菌Streptomycesgriseussp.KCB-132划线接种于ISP2半海水固体培养基上，28℃培养3d后，去1cm2菌苔接种到ISP2半海水ISP2液体培养基中，28℃，180rpm/min，摇床培养10d收获发酵物。过滤发酵物获得发酵液和菌丝体，发酵液经XAD-16大孔吸附树脂柱提取，菌丝体经丙酮破碎提取，减压浓缩提取物，合并后利用乙酸乙酯萃取，减压浓缩得总浸膏。总浸膏经硅胶柱层析，进行梯度洗脱，收集甲醇：二氯甲烷为1:20(体积比)的洗脱组分，将收集的洗脱组分进行ODS反相柱层析，收集60～70％有机醇洗脱部分，浓缩，进行HPLC制备得到外消旋体混合物，并进一步通过手性HPLC制备得到化合物(+)-Pratensilin和(-)-Pratensilin。实施例2.(+)-Pratensilin和(-)-Pratensilin的结构确证1.仪器与材料JascoP-1020数字式旋光仪，AgilentTOF/6500高分辨率质谱，岛津UV-2401型可见-紫外分光光度计，核磁为BrukeAvanceIII500NMRspectrometer，为按上述实施例1步骤制备。2.化合物结构鉴定(+)-Pratensilin为无色固体，易溶于二甲亚砜、甲醇，丙酮、氯仿、微溶于水，[α]D25+28.6(Acetone,c0.04)；UV(Acetonitrile):λmax(logε)210(3.7),243(3.4),302(2.7),345(2.1)nm；HRESIMS:[M+Na]+,m/z356.0895(Δ-0.4ppm)。(-)-Pratensilin为无色固体，易溶于二甲亚砜、甲醇，丙酮、氯仿、微溶于水，[α]D25–34.6(Acetone,c0.04)；UV(Acetonitrile):λmax(logε)210(3.8),242(3.4),302(2.7),342(2.2)nm；HRESIMS:[M+Na]+,m/z356.0895(Δ-0.4ppm)。1D和2DNMR数据见表一，图谱分别见图1是(±)-Pratensilin正离子质谱图(HR-ESI-MS)。图2是(±)-Pratensilin1HNMR谱图(溶剂：DMSO-d6)。图3是(±)-Pratensilin13CNMR谱(溶剂：DMSO-d6)。图4是(±)-PratensilinDEPT-1本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一对具有下列式Ⅰ和式Ⅱ结构式的化合物。

【技术特征摘要】
1.一对具有下列式Ⅰ和式Ⅱ结构式的化合物。2.根据权利要求1所述化合物的制备方法，其特征在于包括以下步骤：1)将海洋链霉菌Streptomycespratensissp.KCB-132划线接种于固体培养基上，28℃培养3～4d，直至长出白色孢子，将白色孢子接种到液体培养基，28℃，150～220rpm/min，摇床培养8～12d收获发酵物；2)过滤发酵物获得发酵液和菌丝体，发酵液经大孔吸附树脂柱提取，菌丝体经丙酮破碎提取，减压浓缩提取物，合并后利用有机溶剂萃取，减压浓缩得总浸膏；3)总浸膏经硅胶柱层析，进行梯度洗脱，收集洗脱液体积比1:20的洗脱组分，将收集的洗脱组分进行ODS反相柱层析，收集60～70％有机醇洗脱部分，浓缩，进行HPLC制备得到外消旋体混合物，并进一步通过手性HPLC制备得到化合物Ⅰ和Ⅱ...

【专利技术属性】
技术研发人员：张淑敏，郭琳，谢则平，杨小平，杨芹，冯玲玲，
申请(专利权)人：山东国际生物科技园发展有限公司，
类型：发明
国别省市：山东,37