一种具有降解无机磷和防病双重作用的解淀粉芽孢杆菌制造技术

技术编号:18281499 阅读:89 留言:0更新日期:2018-06-23 21:38
本发明专利技术提供了一种解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)菌株WKPHO‑12,该菌株的保藏编号为CGMCC No.14954。本发明专利技术还公开了含有该菌株的微生物菌剂。本发明专利技术菌株WKPHO‑12具有降解土壤无机磷及防病双重作用,即不仅能高效降解土壤中无机磷,提高土壤中无机磷的利用率,减少磷肥施用量;还对茄子黄萎病等植物病害防效高,平均防效在70%以上;其次,本发明专利技术菌株WKPHO‑12抑菌谱广,对茄子黄萎菌、黄瓜枯萎菌、棉花枯萎菌及马铃薯黑痣菌等都有很好的抑制作用;此外,本发明专利技术菌株WKPHO‑12专化性强、药效持久性好,对环境友好,还能大大降低生产成本,促进农业的可持续发展。

【技术实现步骤摘要】
一种具有降解无机磷和防病双重作用的解淀粉芽孢杆菌
本专利技术属于农业微生物领域,具体涉及一种具有降解无机磷及防病双重作用的解淀粉芽孢杆菌,还涉及含有该解淀粉芽孢杆菌的微生物菌剂,以及它们在防治作物病害与促进作物生长方面的应用。
技术介绍
磷不仅是植物营养中的三大要素之一,同时也是植物体内有机化合物的重要组成成分,对植物的生长发育起着不可或缺的作用。尽管土壤中的含磷量较高,但是其中95%左右的磷为无效形式,可被植物直接吸收利用的无机态磷只占全磷量的2~3%。我国有74%的耕地土壤缺磷,若长期施用化学肥料来补充土壤中的磷,会造成土壤中养分比例失调和土壤理化性质改变。提高土壤中磷的利用率是解决磷素缺乏的关键。解磷菌是一类能将土壤中难溶性或不溶性的磷转化成易于被植物可吸收利用磷的微生物,除此之外,解磷菌还能促进土壤中有益微生物的代谢活动,改善植物根部营养,提高作物产量。目前,已知的解磷细菌多集中在芽孢杆菌属(Bacillus),如解淀粉芽孢杆菌(CN105385638A、CN105420156A)、枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis,CN104263679A、CN103773709A)、巨大芽孢杆菌(Bacillusmegaterium,吴海燕等,吉林农业大学学报,2014(2):171-175;张维娜等,吉林农业科学2012年05期2012)、侧孢芽孢杆菌(Bacilluslaterosporus,宫占元等,黑龙江八一农垦大学学报,2005,17(5):14~17)等。这些已知的解磷菌中均未涉及解磷菌的抑菌防病作用。茄子黄萎病是由大丽轮枝菌(Verticilliumdahliae)引起的一种土传病害。近年来,随着保护地茄子种植面积迅速扩大,其特殊的光温、水肥等条件及连作使茄子黄萎病逐年加重。茄子感病后坐果少、植株早衰甚至死亡。一般发病率在15~20%,严重者发病率达30~50%,对茄子的产量和质量影响极大。目前,生产上防治茄子黄萎病的方法主要是嫁接防治与化学防治。但嫁接工作量大,推广困难;而长期大量使用化学农药导致药剂残留及抗药性的产生。因此,利用有益微生物防治茄子黄萎病是一种有应用前景的防治措施。目前用于防治茄子黄萎病的芽孢杆菌主要有解淀粉芽孢杆菌(CN105238723A)、枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis,CN102925394A;CN102154186A;鲁红学等,湖北农业科学,2013,52(21):5199-5202;程磊等,长江大学学报,自然科学版,2012年06期;孙义等,江苏农业学报,2008,24(4):425-430;林玲等,中国生物防治学报,2010(s1):40-46)、多粘类芽孢杆菌(Paenibacilluspolymyxa,CN103773708A;郑园园等.中国植物病理学会学术年会,2008)等。上述已知的芽孢杆菌功能相对单一,或仅具有解磷作用,或仅具有防治病害作用;其次,随着环境条件的改变,或者病原菌的进化,芽孢杆菌的功能也可能随之进化,发生改变,因此,从土壤中分离、筛选具有高效溶磷功能,且抑菌谱广的芽孢杆菌,对于调节土壤磷素的供需矛盾,提高对植物病害防效,降低生产成本、保护生态环境,促进农业的可持续发展具有重要意义。
技术实现思路
本专利技术目的在于提供一种解淀粉芽孢杆菌菌株,该菌株具有降解无机磷和防治茄子黄萎病等双重作用。本专利技术第二目的在于提供上述解淀粉芽孢杆菌的用途。本专利技术第三目的在于提供一种含有上述解淀粉芽孢杆菌的微生物菌剂。本专利技术第四目的在于提供上述微生物菌剂的制备方法。本专利技术第五目的在于提供上述微生物菌剂的用途。为实现上述目的,本专利技术通过以下技术方案实现:一种解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)菌株WKPHO-12,其保藏编号为CGMCCNo.14954。上述菌株WKPHO-12在降解无机磷上的应用。上述菌株WKPHO-12在降解土壤无机磷上的应用。上述菌株WKPHO-12在促进作物生长上的应用。上述菌株WKPHO-12在防治植物病害上的应用。上述应用中所述的植物病害是指茄子黄萎病(VerticilliumdahliaeKleb)、黄瓜枯萎病(F.oxysporumf.sp.cucumebrium)、棉花枯萎病(F.oxysporumf.sp.vasinfectum)或马铃薯黑痣病(R.solani)等。上述菌株WKPHO-12在防治茄子黄萎病和降解土壤无机磷上的应用。本专利技术还提供了含有上述解淀粉芽孢杆菌菌株WKPHO-12的微生物菌剂。上述微生物菌剂,其剂型为液体制剂或固体制剂。上述微生物菌剂中菌株WKPHO-12的活菌数为2.0×106~2.0×108cfu/mL或2.0×106~2.0×108cfu/g。上述微生物菌剂,其液体制剂的制备方法,包括以下步骤:(1)菌种活化:将低温保存的WKPHO-12菌株在LB平板培养基上活化,挑取单菌落在LB斜面培养基上25~35℃培养10~16小时,得活化的菌株;(2)种子液制备:用无菌的接种环刮取一环步骤(1)活化的菌株接种到100mLLB液体培养基中,在25~35℃、摇床转速为150~220rpm的条件下培养10~16小时,得种子液;(3)发酵培养:按照体积比为1~3%的比例将步骤(2)的种子液接入到玉米粉黄豆粉培养基(pH值为7.2)中,在温度为25~35℃、摇床转速为150~220rpm的条件下发酵培养36~40h,得发酵液;然后每隔30分钟检测发酵液中菌体和芽孢数量,待发酵液中成熟芽孢占到芽孢和菌体总数的90%时停止发酵培养;所得即为WKPHO-12菌株的液体制剂。上述制备方法步骤(1)中所述LB平板培养基或LB斜面培养基的组成成分及其重量比为:胰蛋白胨8~12g,酵母提取物4~6g,氯化钠4~6g,琼脂粉12~18g,水1000mL。上述制备方法步骤(2)中所述LB液体培养基的组成成分及其重量比为:胰蛋白胨8~12g,酵母提取物4~6g,氯化钠4~6g,水1000mL。所述的LB平板培养基、LB斜面培养基或LB液体培养基均按照常规方法制备。上述制备方法步骤(3)中所述的玉米粉黄豆粉培养基,其组成成分及其重量百分比为:玉米粉1.0~3.0%,黄豆粉1.0~3.0%,NaCl0.1~1.0%,MnSO4·H2O0.5~1.0%,其余为水。所述的玉米粉黄豆粉培养基的制备方法,按照重量百分比将玉米粉、黄豆粉、NaCl和MnSO4·H2O混合,再加水,调节pH搅拌均匀即可。上述微生物菌剂在在降解无机磷上的应用。上述微生物菌剂在降解土壤无机磷上的应用。上述微生物菌剂在促进作物生长上的应用。上述微生物菌剂在在防治植物病害上的应用。上述应用中所述的植物病害是指茄子黄萎病(VerticilliumdahliaeKleb)、黄瓜枯萎病(F.oxysporumf.sp.cucumebrium)、棉花枯萎病(F.oxysporumf.sp.vasinfectum)或马铃薯黑痣病(R.solani)等。上述微生物菌剂在防治茄子黄萎病和降解土壤无机磷上的应用。上述微生物菌剂的使用方法:将上述微生物菌剂用水稀释至活菌体数为107cfu/mL,于茄子播种前浸种半小时;或将上述微生本文档来自技高网
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一种具有降解无机磷和防病双重作用的解淀粉芽孢杆菌

【技术保护点】
1.一种解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)菌株WKPHO‑12,其保藏编号为CGMCC No.14954。

【技术特征摘要】
1.一种解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)菌株WKPHO-12,其保藏编号为CGMCCNo.14954。2.权利要求1所述的菌株WKPHO-12在降解无机磷上的应用。3.权利要求1所述的菌株WKPHO-12在防治植物病害上的应用;其中所述的植物病害是指茄子黄萎病(VerticilliumdahliaeKleb)、黄瓜枯萎病(F.oxysporumf.sp.cucumebrium)、棉花枯萎病(F.oxysporumf.sp.vasinfectum)或马铃薯黑痣病(R.solani)。4.权利要求1所述的菌株WKPHO-12在防治茄子黄萎病和降解土壤无机磷上的应用。5.含有权利要求1所述菌株WKPHO-12的微...

【专利技术属性】
技术研发人员:马毅楠李博超孔令佳
申请(专利权)人:保定微控生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:河北,13

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