对PD1和TIM3特异性的双特异性抗体制造技术

本发明专利技术涉及包含特异性结合PD1的第一抗原结合位点和特异性结合TIM3的第二抗原结合位点的双特异性抗体，特别是如下的双特异性抗体，其中该双特异性抗体以与对PD1的结合相比要低的结合亲和力结合TIM3。本发明专利技术进一步涉及生成这些分子的方法和使用它们的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】对PD1和TIM3特异性的双特异性抗体专利
本专利技术涉及包含特异性结合PD1的第一抗原结合位点和特异性结合TIM3的第二抗原结合位点的双特异性抗体，特别是如下的双特异性抗体，其中该双特异性抗体以与对PD1的结合相比要低的结合亲和力结合TIM3。本专利技术进一步涉及生成这些分子的方法和使用它们的方法。专利技术背景免疫系统在针对癌症的保护中的重要性基于它检测和破坏异常细胞的能力。然而，一些肿瘤细胞能够通过造成免疫抑制的状态来逃避免疫系统(Zitvogeletal.,NatureReviewsImmunology6(2006),715-727)。携带肿瘤的宿主中存在的免疫抑制的机制的一个例子是促进T细胞功能障碍或耗尽。由于它们选择性识别自所有细胞隔室中的蛋白质衍生的肽的能力；它们直接识别和杀伤抗原表达性细胞(由CD8+效应T细胞；也称作细胞毒性T淋巴细胞(CTL)进行)的能力；和它们协调多种多样免疫应答(由CD4+辅助T细胞进行)(这整合获得性和先天效应器机制)的能力，T细胞已经是治疗性操作内源抗肿瘤免疫力的努力的主要焦点。耗尽的T细胞未能响应抗原刺激而增殖及发挥效应器功能诸如细胞毒本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种包含特异性结合PD1的第一抗原结合位点和特异性结合TIM3的第二抗原结合位点的双特异性抗体，其中所述特异性结合PD1的第一抗原结合位点包含VH域，其包含(i)包含SEQ ID NO:37的氨基酸序列的HVR‑H1，(ii)包含SEQ ID NO:38的氨基酸序列的HVR‑H2，和(iii)包含SEQ ID NO:39的氨基酸序列的HVR‑H3；和VL域，其包含(i)包含SEQ ID NO:40的氨基酸序列的HVR‑L1，(ii)包含SEQ ID NO:41的氨基酸序列的HVR‑L2，和(iii)包含SEQ ID NO:42的氨基酸序列的HVR‑L3；且所述特异性结合TIM3的第二抗原结合位...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.10.02 EP 15188036.6;2015.10.02 EP 15188065.51.一种包含特异性结合PD1的第一抗原结合位点和特异性结合TIM3的第二抗原结合位点的双特异性抗体，其中所述特异性结合PD1的第一抗原结合位点包含VH域，其包含(i)包含SEQIDNO:37的氨基酸序列的HVR-H1，(ii)包含SEQIDNO:38的氨基酸序列的HVR-H2，和(iii)包含SEQIDNO:39的氨基酸序列的HVR-H3；和VL域，其包含(i)包含SEQIDNO:40的氨基酸序列的HVR-L1，(ii)包含SEQIDNO:41的氨基酸序列的HVR-L2，和(iii)包含SEQIDNO:42的氨基酸序列的HVR-L3；且所述特异性结合TIM3的第二抗原结合位点包含(a)VH域，其包含(i)包含SEQIDNO:1的氨基酸序列的HVR-H1，(ii)包含SEQIDNO:2的氨基酸序列的HVR-H2，和(iii)包含SEQIDNO:3的氨基酸序列的HVR-H3；和VL域，其包含(i)包含SEQIDNO:4或SEQIDNO:11或SEQIDNO:12的氨基酸序列的HVR-L1，(ii)包含SEQIDNO:5的氨基酸序列的HVR-L2，和(iii)包含SEQIDNO:6的氨基酸序列的HVR-L3；或(b)VH域，其包含(i)包含SEQIDNO:17的氨基酸序列的HVR-H1，(ii)包含SEQIDNO:18的氨基酸序列的HVR-H2，和(iii)包含SEQIDNO:19的氨基酸序列的HVR-H3；和VL域，其包含(i)包含SEQIDNO:20的氨基酸序列的HVR-L1，(ii)包含SEQIDNO:21的氨基酸序列的HVR-L2，和(iii)包含SEQIDNO:22的氨基酸序列的HVR-L3；或(c)VH域，其包含(i)包含SEQIDNO:29的氨基酸序列的HVR-H1，(ii)包含SEQIDNO:30的氨基酸序列的HVR-H2，和(iii)包含SEQIDNO:31的氨基酸序列的HVR-H3；和VL域，其包含(i)包含SEQIDNO:32的氨基酸序列的HVR-L1，(ii)包含SEQIDNO:33的氨基酸序列的HVR-L2，和(iii)包含SEQIDNO:34的氨基酸序列的HVR-L3。2.权利要求1的包含特异性结合PD1的第一抗原结合位点和特异性结合TIM3的第二抗原结合位点的双特异性抗体，其中该双特异性抗体以与对PD1的结合相比要低至少50倍的结合亲和力，更特别的是以与对PD1的结合相比要低至少100倍的结合亲和力结合TIM3。3.依照权利要求1或2的双特异性抗体，其中所述特异性结合PD1的第一抗原结合位点包含(a)包含SEQIDNO:43的氨基酸序列的VH域和包含SEQIDNO:44的氨基酸序列的VL域，或(b)包含SEQIDNO:45的氨基酸序列的VH域和包含SEQIDNO:46的氨基酸序列的VL域，或(c)包含SEQIDNO:45的氨基酸序列的VH域和包含SEQIDNO:47的氨基酸序列的VL域，或(d)包含SEQIDNO:45的氨基酸序列的VH域和包含SEQIDNO:48的氨基酸序列的VL域，或(e)包含SEQIDNO:45的氨基酸序列的VH域和包含SEQIDNO:49的氨基酸序列的VL域，且所述特异性结合TIM3的第二抗原结合位点包含(a)包含SEQIDNO:7的氨基酸序列的VH域和包含SEQIDNO:8的氨基酸序列的VL域，或(b)包含SEQIDNO:9的氨基酸序列的VH域和包含SEQIDNO:10的氨基酸序列的VL域，或(c)包含SEQIDNO:13的氨基酸序列的VH域和包含SEQIDNO:14的氨基酸序列的VL域，或(d)包含SEQIDNO:15的氨基酸序列的VH域和包含SEQIDNO:16的氨基酸序列的VL域，或(e)包含SEQIDNO:23的氨基酸序列的VH域和包含SEQIDNO:24的氨基酸序列的VL域，或(f)包含SEQIDNO:25的氨基酸序列的VH域和包含SEQIDNO:26的氨基酸序列的VL域，或(g)包含SEQIDNO:27的氨基酸序列的VH域和包含SEQIDNO:28的氨基酸序列的VL域，或(h)包含SEQIDNO:35的氨基酸序列的VH域和包含SEQIDNO:36的氨基酸序列的VL域。4.依照权利要求1至3任一项的双特异性抗体，其中所述特异性结合PD1的第一抗原结合位点包含包含SEQIDNO:45的氨基酸序列的VH域和包含SEQIDNO:46的氨基酸序列的VL域，且所述特异性结合TIM3的第二抗原结合位点包含包含SEQIDNO:15的氨基酸序列的VH域和包含SEQIDNO:16的氨基酸序列的VL域或包含SEQIDNO:25的氨基酸序列的VH域和包含SEQIDNO:26的氨基酸序列的VL域。5.依照权利要求1至4任一项的双特异性抗体，其中所述特异性结合PD1的第一抗原结合位点包含包含SEQIDNO:45的氨基酸序列的VH域和包含SEQIDNO:46的氨基酸序列的VL域，且所述特异性结合TIM3的第二抗原结合位点包含包含SEQIDNO:25的氨基酸序列的VH域和包含SEQIDNO:26的氨基酸序列的VL域。6.依照权利要求1至5任一项的双特异性抗体，其中该双特异性抗体是人，人源化或嵌合抗体。7.权利要求1至6任一项的双特异性抗体，其中该双特异性抗体包含Fc域，包含该特异性结合PD1的抗原结合位点的第一Fab片段和包含该特异性结合TIM3的抗原结合位点的第二Fab片段。8.权利要求1至7任一项的双特异性抗体，其中该Fc域是IgG，特别是IgG1Fc域或IgG4Fc域。9.权利要求1至8任一项的双特异性抗体，其中该Fc域包含一处或多处降低对Fc受体，特别是Fcγ受体的结合的氨基酸替代。10.权利要求1至9任一项的双特异性抗体，其中该Fc域是人IgG1亚类的，具有氨基酸突变L234A，L235A和P329G(编号方式依照KabatEU索引)。11.权利要求1至10任一项的双特异性抗体，其中该Fc域包含促进Fc域的第一和第二亚基联合的修饰。12.权利要求1至11任一项的双特异性抗体，其中依照节入穴方法，该Fc域的第一亚...

【专利技术属性】
技术研发人员：L·科达里迪克，G·费尔蒂希，J·费希尔，C·克莱因，V·列维茨基，V·莱福克，M·佩罗，J·T·莱古拉，T·施洛特豪尔，S·西伯，P·乌马纳，I·温施，A·兹维克，
申请(专利权)人：豪夫迈·罗氏有限公司，
类型：发明
国别省市：瑞士,CH