强力地中和乙型肝炎病毒的抗体和其用途制造技术

技术编号:18175046 阅读:88 留言:0更新日期:2018-06-09 17:47
本发明专利技术涉及抗体或其抗原结合片段,其结合至乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的抗原环区并强力地中和乙型肝炎病毒(HBV)和丁型肝炎病毒(HDV)二者的感染。本发明专利技术还涉及与抗体和抗原结合片段结合的表位,以及编码这些抗体和抗体片段的核酸和产生这些抗体和抗体片段的细胞。此外,本发明专利技术涉及本发明专利技术的抗体和抗体片段在诊断、预防和治疗乙型肝炎和丁型肝炎中的用途。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】强力地中和乙型肝炎病毒的抗体和其用途本专利技术涉及针对乙型肝炎病毒(HBV)和针对丁型肝炎病毒(HDV)的抗体和其用途的领域。本专利技术的强力的抗乙型肝炎抗体结合至位于HBV包膜蛋白(HBsAg)的S结构域的抗原环区中的表位,如在本专利技术中确认的。本专利技术还涉及编码这样的抗体和抗体片段的核酸和产生这样的抗体和抗体片段的无限增殖化B细胞和培养的浆细胞。另外地,本专利技术涉及本专利技术的抗体和抗体片段在筛选方法以及在诊断、预防和治疗疾病,具体而言乙型肝炎和丁型肝炎中的用途。乙型肝炎病毒(HBV)由(i)包含三种相关表面蛋白(乙型肝炎表面抗原,HBsAg)和脂质的包膜和(ii)包围病毒DNA基因组和DNA聚合酶的二十面体核衣壳组成。HBV衣壳在RNA前基因组复制复合体的包装期间在受感染细胞的胞质溶胶中形成并且在病毒DNA基因组的合成期间通过在颗粒的腔中前基因组的反转录获得出芽的能力。三种HBV包膜蛋白S-HBsAg、M-HBsAg和L-HBsAg在内质网成形复杂的跨膜折叠,并且形成二硫键-连接的同源二聚体和异源二聚体。在细胞内膜处的出芽期间,胞质前S区域中的短线性结构域与衣壳表面上的结合本文档来自技高网...
强力地中和乙型肝炎病毒的抗体和其用途

【技术保护点】
一种分离的抗体或其抗原结合片段,其结合至HBsAg的抗原环区并且中和乙型肝炎病毒和丁型肝炎病毒的感染。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.10.07 EP PCT/EP2015/0019701.一种分离的抗体或其抗原结合片段,其结合至HBsAg的抗原环区并且中和乙型肝炎病毒和丁型肝炎病毒的感染。2.根据权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段,其中所述抗体或所述抗原结合片段促进HBsAg和HBV的清除。3.根据权利要求1或2所述的抗体或其抗原结合片段,其中所述抗体或所述抗原结合片段包括Fc部分。4.根据权利要求1-3中任一项所述的抗体或其抗原结合片段,其中所述抗体或所述抗原结合片段结合至HBsAg基因型A、B、C、D、E、F、G、H、I和J中的至少6种,优选地至少8种,更优选地所有10种。5.根据权利要求1-4中任一项所述的抗体或其抗原结合片段,其中所述抗体或所述抗原结合片段结合至在抗原环区中具有突变的HBsAg突变体:HBsAgY100C/P120T、HBsAgP120T、HBsAgP120T/S143L、HBsAgC121S、HBsAgR122D、HBsAgR122I、HBsAgT123N、HBsAgQ129H、HBsAgQ129L、HBsAgM133H、HBsAgM133L、HBsAgM133T、HBsAgK141E、HBsAgP142S、HBsAgS143K、HBsAgD144A、HBsAgG145R和HBsAgN146A中的至少12种,优选地至少15种,更优选地所有18种。6.根据权利要求1-5中任一项所述的抗体或其抗原结合片段,其中所述抗体或所述抗原结合片段结合至表位,所述表位包括HBsAg的抗原环区的至少一个、优选地至少两个、更优选地至少三个、甚至更优选地至少四个氨基酸,其中所述至少一个、优选地至少两个、更优选地至少三个、甚至更优选地至少四个氨基酸选自HBsAg的S结构域的氨基酸115–133,优选地选自HBsAg的S结构域的氨基酸120–133,更优选地选自HBsAg的S结构域的氨基酸120-130。7.根据权利要求6所述的抗体或其抗原结合片段,其中所述抗体或所述抗原结合片段结合至表位,所述表位包括HBsAg的抗原环区的至少两个、优选地至少三个、更优选地至少四个氨基酸,其中所述至少两个、优选地至少三个、更优选地至少四个氨基酸选自HBsAg的S结构域的氨基酸120–133,优选地选自HBsAg的S结构域的氨基酸120-130,并且其中所述至少两个、优选地至少三个、更优选地至少四个氨基酸位于相邻位置。8.根据权利要求6或7所述的抗体或其抗原结合片段,其中所述表位是构象表位。9.根据权利要求6-8中任一项所述的抗体或其抗原结合片段,其中所述抗体或所述抗原结合片段结合至表位,所述表位包括HBsAg的抗原环区的至少两个、优选地至少三个、更优选地至少四个氨基酸,其中所述至少两个、优选地至少三个、更优选地至少四个氨基酸选自HBsAg的S结构域的氨基酸120–133,优选地选自HBsAg的S结构域的氨基酸120-130,并且其中所述至少两个、优选地至少三个、更优选地至少四个氨基酸不位于相邻位置。10.根据权利要求9所述的抗体或其抗原结合片段,其中至少一个、优选地至少两个、更优选地至少三个、甚至更优选地至少四个、最优选地至少五个氨基酸位于所述至少两个、优选地至少三个氨基酸之间,所述至少两个、优选地至少三个氨基酸由表位组成并且不位于相邻位置。11.根据权利要求6-10中任一项所述的抗体或其抗原结合片段,其中所述抗体或所述抗原结合片段结合至表位,所述表位至少包括HBsAg的S结构域的氨基酸P120、C121、R122和C124。12.根据权利要求6-11中任一项所述的抗体或其抗原结合片段,其中所述抗体或所述抗原结合片段结合至包括根据SEQIDNO:88的氨基酸序列:PCRXC的表位,其中X是任意氨基酸或不是氨基酸;优选地X是任意氨基酸;更优选地X是T、Y、R、S或F;甚至更优选地X是T、Y或R;最优选地X是T或R。13.根据权利要求6-12中任一项所述的抗体或其抗原结合片段,其中所述抗体或所述抗原结合片段结合至包括根据SEQIDNO:80的氨基酸序列:TGPCRTC或者与SEQIDNO:80共享至少80%、优选地至少90%、更优选地至少95%序列同一性的氨基酸序列的表位。14.根据权利要求6-13中任一项所述的抗体或其抗原结合片段,其中所述抗体或所述抗原结合片段结合至包括根据SEQIDNO:85的氨基酸序列:STTSTGPCRTC或者与SEQIDNO:85共享至少80%、优选地至少90%、更优选地至少95%序列同一性的氨基酸序列的表位。15.根据权利要求6-14中任一项所述的抗体或其抗原结合片段,其中所述表位进一步包括至少含有HBsAg的S结构域的氨基酸145-151的氨基酸序列(SEQIDNO:81)。16.根据权利要求6-15中任一项所述的抗体或其抗原结合片段,其中所述表位包括根据SEQIDNO:80的氨基酸序列和根据SEQIDNO:81的氨基酸序列。17.根据权利要求6-16中任一项所述的抗体或其抗原结合片段,其中所述表位包括根据SEQIDNO:85的氨基酸序列和根据SEQIDNO:87的氨基酸序列。18.根据前述权利要求中任一项所述的抗体或其抗原结合片段,其中所述抗体或所述抗原结合片段结合至由根据SEQIDNO:1的氨基酸序列:X1X2X3TCX4X5X6AX7G形成的HBsAg的抗原环中的表位,其中X1、X2、X3、X4、X5、X6和X7可以是任意氨基酸。19.根据权利要求18所述的抗体或其抗原结合片段,其中所述抗体或所述抗原结合片段结合至由根据SEQIDNO:2的氨基酸序列:X1X2X3TCX4X5X6AX7G形成的HBsAg的抗原环中的表位,其中,X1是P、T或S,X2是C或S,X3是R、K、D或I,X4是M或T,X5是T、A或I,X6是T、P或L,和X7是Q、H或L。20.根据权利要求19所述的抗体或其抗原结合片段,其中所述抗体或所述抗原结合片段结合至具有选自SEQIDNO:5-33的氨基酸序列的HBsAg的S结构域的抗原环区或其序列变体。21.根据前述权利要求中任一项所述的抗体或其抗原结合片段,其中所述抗体或所述抗原结合片段是单克隆抗体或其单克隆抗原结合片段和/或人抗体或其人抗原结合片段。22.根据前述权利要求中任一项所述的抗体或其抗原结合片段,其特征在于所述抗体或所述其抗原结合片段具有IgG型,优选地具有IgG1型。23.根据前述权利要求中任一项所述的抗体或其抗原结合片段,其特征在于所述抗体或抗原结合片段包括重链和轻链,所述重链包括至少一个CDRH1、至少一个CDRH2和至少一个CDRH3,和所述轻链包括至少一个CDRL1、至少一个CDRL2和至少一个CDRL3,其中所述至少一个重链CDRH3包括根据SEQIDNO:36的氨基酸序列或其功能序列变体。24.根据权利要求23所述的抗体或其抗原结合片段,其特征在于所述至少一个重链CDRH3包括与SEQIDNO:36共享至少80%、优选地至少85%、更优选地至少90%、甚至更优选地至少95%和特别优选地至少98%或99%序列同一性的氨基酸序列。25.根据权利要求23或24所述的抗体或其抗原结合片段,其特征在于所述至少一个重链CDRH3包括根据SEQIDNO:36的氨基酸序列。26.根据前述权利要求中任一项所述的抗体或其抗原结合片段,其特征在于所述抗体或抗原结合片段包括重链和轻链,所述重链包括至少一个CDRH1、至少一个CDRH2和至少一个CDRH3,和所述轻链包括至少一个CDRL1、至少一个CDRL2和至少一个CDRL3,其中所述至少一个轻链CDRL3包括根据SEQIDNO:40或SEQIDNO:58的氨基酸序列,或其功能序列变体。27.根据权利要求26所述的抗体或其抗原结合片段,其特征在于所述至少一个轻链CDRL3包括与SEQIDNO:40或SEQIDNO:58共享至少80%、优选地至少85%、更优选地至少90%、甚至更优选地至少95%和特别优选地至少98%或99%序列同一性的氨基酸序列。28.根据权利要求26或27所述的抗体或其抗原结合片段,其特征在于所述至少一个轻链CDRL3包括根据SEQIDNO:40或SEQIDNO:58的氨基酸序列。29.根据权利要求23-28中任一项所述的抗体或其抗原结合片段,其特征在于所述至少一个重链CDRH1包括根据SEQIDNO:34的氨基酸序列或其功能序列变体,所述至少一个CDRH2包括根据SEQIDNO:35的氨基酸序列或其功能序列变体和/或所述至少一个重链CDRH3包括根据SEQIDNO:36的氨基酸序列或其功能序列变体。30.根据权利要求29所述的抗体或其抗原结合片段,其特征在于所述至少一个重链CDRH1包括与SEQIDNO:34共享至少80%、优选地至少85%、更优选地至少90%、甚至更优选地至少95%和特别优选地至少98%或99%序列同一性的氨基酸序列;所述至少一个重链CDRH2包括与SEQIDNO:35或66共享至少80%、优选地至少85%、更优选地至少90%、甚至更优选地至少95%和特别优选地至少98%或99%序列同一性的氨基酸序列;和/或所述至少一个重链CDRH3包括与SEQIDNO:36共享至少80%、优选地至少85%、更优选地至少90%、甚至更优选地至少95%和特别优选地至少98%或99%序列同一性的氨基酸序列。31.根据权利要求29或30所述的抗体或其抗原结合片段,其特征在于所述至少一个重链CDRH1包括根据SEQIDNO:34的氨基酸序列;所述至少一个重链CDRH2包括根据SEQIDNO:35或66的氨基酸序列;和/或所述至少一个重链CDRH3包括根据SEQIDNO:36的氨基酸序列。32.根据权利要求23-31中任一项所述的抗体或其抗原结合片段,其特征在于所述至少一个CDRL1包括根据SEQIDNO:37的氨基酸序列或其功能序列变体,所述至少一个CDRL2包括根据SEQIDNO:38或39的氨基酸序列或其功能序列变体,和/或所述至少一个CDRL3氨基包括根据SEQIDNO:40的氨基酸序列或其功能序列变体。33.根据权利要求23-31中任一项所述的抗体或其抗原结合片段,其特征在于所述至少一个轻链CDRL1包括根据SEQIDNO:37的氨基酸序列或其功能序列变体,所述至少一个轻链CDRL2包括根据SEQIDNO:38或39的氨基酸序列或其功能序列变体,和/或所述至少一个轻链CDRL3氨基包括根据SEQIDNO:58的氨基酸序列或其功能序列变体。34.根据权利要求32或33所述的抗体或其抗原结合片段,其特征在于所述至少一个轻链CDRL1包括与SEQIDNO:37共享至少80%、优选地至少85%、更优选地至少90%、甚至更优选地至少95%和特别优选地至少98%或99%序列同一性的氨基酸序列;所述至少一个轻链CDRL2包括与SEQIDNO:38或39共享至少80%、优选地至少85%、更优选地至少90%、甚至更优选地至少95%和特别优选地至少98%或99%序列同一性的氨基酸序列;和/或所述至少一个轻链CDRL3包括与SEQIDNO:40或58共享至少80%、优选地至少85%、更优选地至少90%、甚至更优选地至少95%和特别优选地至少98%或99%序列同一性的氨基酸序列。35.根据权利要求32-34中任一项所述的抗体或其抗原结合片段,其特征在于所述至少一个轻链CDRL1包括根据SEQIDNO:37的氨基酸序列;所述至少一个轻链CDRL2包括根据SEQIDNO:38或39的氨基酸序列;和/或所述至少一个轻链CDRL3包括根据SEQIDNO:40或58的氨基酸序列。36.根据权利要求1-32、34和35中任一项所述的抗体或其抗原结合片段,其特征在于所述抗体或所述抗原结合片段包括CDRH1、CDRH2和CDRH3氨基酸序列和CDRL1、CDRL2和CDRL3氨基酸序列,其分别根据SEQIDNO:34-38和40或其功能序列变体或根据SEQIDNO:34-37和39-40或其功能序列变体。37.根据权利要求1-32、34和35中任一项所述的抗体或其抗原结合片段,其特征在于所述抗体或所述抗原结合片段包括CDRH1、CDRH2和CDRH3氨基酸序列和CDRL1、CDRL2和CDRL3氨基酸序列,其分别根据SEQIDNO:34、36-38、40和66或其功能序列变体或根据SEQIDNO:34、36-37、39-40和66或其功能序列变体。38.根据权利要求1-31和33-35中任一项所述的抗体或其抗原结合片段,其特征在于所述抗体或所述抗原结合片段包括CDRH1、CDRH2和CDRH3氨基酸序列和CDRL1、CDRL2和CDRL3氨基酸序列,其分别根据SEQIDNO:34-38和58或其功能序列变体或根据SEQIDNO:34-37、39和58或其功能序列变体。39.根据权利要求1-31和33-35中任一项所述的抗体或其抗原结合片段,其特征在于所述抗体或所述抗原结合片段包括CDRH1、CDRH2和CDRH3氨基酸序列和CDRL1、CDRL2和CDRL3氨基酸序列,其分别根据SEQIDNO:34、36-38、58和66或其功能序列变体或根据SEQIDNO:34、36-37、39、58和66或其功能序列变体。40.根据权利要求36-39中任一项所述的抗体或其抗原结合片段,其特征在于所述抗体或所述抗原结合片段包括CDRH1、CDRH2和CDRH3氨基酸序列和CDRL1、CDRL2和CDRL3氨基酸序列:(i)其分别地与SEQIDNO:34-38和40中每种共享至少80%、优选地至少85%、更优选地至少90%、甚至更优选地至少95%和特别优选地至少98%或99%序列同一性;或(ii)其分别地与SEQIDNO:34-37、39和40中每种共享至少80%、优选地至少85%、更优选地至少90%、甚至更优选地至少95%和特别优选地至少98%或99%序列同一性;或(iii)其分别地与SEQIDNO:34-38和58中每种共享至少80%、优选地至少85%、更优选地至少90%、甚至更优选地至少95%和特别优选地至少98%或99%序列同一性;或(iv)其分别地与SEQIDNO:34-37、...

【专利技术属性】
技术研发人员:D·柯蒂
申请(专利权)人:胡默波斯生物医学公司
类型:发明
国别省市:瑞士,CH

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