硫辛酸胆碱酯组合物和生产生物相容性眼科制剂的方法技术

本发明专利技术描述了眼科用硫辛酸胆碱酯组合物和生产适合于眼的所述组合物的生物相容性制剂的具体方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】硫辛酸胆碱酯组合物和生产生物相容性眼科制剂的方法I.专利
本专利技术一般涉及眼科用硫辛酸胆碱酯组合物和生产生物相容性、稳定和无刺激性滴眼剂的方法。将本文的组合物关注为用于眼部障碍(但不限于)的疗法，例如老视眼、干眼、白内障和老年性黄斑变性。II.专利技术背景硫辛酸胆碱酯(LACE)是R-α-硫辛酸的化学合成衍生物。硫辛酸、也称作硫辛酸(thiocticacid)是8碳脂肪酸，其带有连接第6和第8碳以形成1，2-二硫戊环环的二硫键。该酸形成光学异构体，其中的异构体R-α-硫辛酸是最具有生物活性的。将硫辛酸胆碱酯(LACE，化学结构，参见图1)设计成可透过生物膜，同时并入阳离子胆碱首基。尽管硫辛酸无法透入角膜，但是硫辛酸的胆碱酯衍生物可透入角膜，其被角膜酯酶水解并且转化成生物活性硫辛酸。已经将LACE配制成眼科用溶液，将其作为滴眼液每日施用2次以治疗老视眼。由硫辛酸和胆碱组成的前药的LACE是治疗老视眼的一种独特分子。硫辛酸(LA)是活性成分且胆碱首基用于辅助透入眼。施用滴眼液后，LA与胆碱之间的键被泪膜和角膜中的酯酶水解。游离硫辛酸进入眼且最终到达晶状体。在那里它被内源性氧化还原酶还原成二氢硫辛酸，然后导致表浅的狭长晶状体细胞内的细胞溶质蛋白质水解。这种蛋白质裂解使得胞质溶胶自由流动并且逆转与年龄相关性晶状体硬化相关的氧化过程。预期由LACE制备的眼科用溶液能够调节和改善具有老视眼即与年龄相关的调节缺失的人的近距视觉焦点。老视眼是与年龄相关的聚焦于邻近物体的能力缺失；这种病症因晶状体显微结构的生理学改变导致，从而造成带来视觉对象在焦点下的晶状体焦距和曲率自动调节中的灵活性缺失。这种病症由矫正镜片矫正。已经报道硫辛酸胆碱酯(“LACE”)(参见例如美国专利US8,410,462)可以修补近距视觉。支持这种请求的是离体研究，其证实晶状体软化可以使用蛋白质二硫键还原剂二硫苏糖醇(DTT)在人供体晶状体中和在小鼠中使用硫辛酸以药理学方式诱导。使LACE制剂出现问题的一个问题在于通过二硫戊环键开环以形成危害该分子活性的氧化性种类而使其不稳定的倾向。在室温下，LACE会迅速降解为氧化性种类(参见“HPLCChromatogramofLACEOphthalmicSolutionwithDegradationProducts”，参见图2)。即使储存在冷藏温度下，也会早至1周内发生快速氧化，从而危害分子作为药物产品的用途。对于作为药物产品尽可能充分利用的LACE眼科用溶液(也称作EV06眼科用溶液)而言，水性制剂在储存和使用期间稳定化是至关重要的。使LACE眼科用溶液的药物研发混乱的另一个问题在于在家兔刺激模型中体内观察到的眼表面刺激的发生率。本专利技术详述了导致或引起眼部刺激的意外参数以及消除或最小化这些参数的过程。这些参数与制剂组成或药物物质的性质无关，而上述这些因素通常与眼部刺激有关或归因于眼部刺激。本文所述的组合物和方法描述了长期稳定眼科用LACE制剂的方法。还描述了在某些工艺条件下配制的LACE制剂刺激性原因的意外发现。鉴定为产生最终的舒适眼科用溶液(EV06眼科用溶液)的关键因素的关键工艺参数也并非显而易见。最终的工艺条件将降解种类的形成减少到最低限度并且将归因于眼部刺激的种类的形成减少到最低限度。III.附图描述图1：硫辛酸胆碱酯的化学结构。图2：混合8.1分钟、1、3和4小时时的LACE胶束种类，制剂KW-LACE-01-86-2。图3：混合8.1分钟、6、8和24小时时的LACE胶束种类，制剂KW-LACE-01-86-2。图4：在冷藏温度下混合时胶束LACE种类(由箭头表示的峰)最高。图5A：高胶束LACE浓度(由HPLC上7.9-8.5分钟之间的峰表示)与“团簇的”LACE氯化物API相关。图5B：较低的胶束LACE(由箭头表示的峰)与未团簇的LACEAPI相关。图6：丙氨酸和pH的作用。图7是比较如下变量的制剂图：(a)对照(原始)与对照+0.25％氯化钠、对照+0.25％氯化钠、w/o甘油；(b)对照(原始)与对照、w/o苯扎氯铵(BAC)；(c)对照(原始)与不含甘油的原始制剂。图8显示在57℃下亚硫酸盐对LACE稳定性的影响。制备pH4和4.5的浓度为0.05％亚硫酸盐(■，▲)和0.1％亚硫酸盐(x)的包含亚硫酸盐的制剂。添加亚硫酸盐无法稳定原始制剂(◆)。图9进一步探查了消除苯扎氯铵的潜在稳定作用。不含苯扎氯铵的全部制剂变化形式均优于对照原始制剂(pH4.5)。制剂变化形式为在pH4、4.5的无BAC组合物(▲，■)、无甘油/无BAC+0.9％氯化钠(x)、在pH4和4.5的无BAC+0.05％亚硫酸盐(●，■)。图10：消除甘油对LACE稳定性的影响。图11：缓冲的组合物对LACE稳定性的影响。图12A：刺激性记分(在家兔刺激模型中)与通过HPLC-UV测定的％LACE胶束种类的相关性。图12B：刺激性记分(在家兔刺激模型中)与通过HPLC-ELSD测定的％LACE胶束种类的相关性。图13：甘油重量摩尔渗透压浓度标准曲线。IV.专利技术概述本专利技术实现了两个主要目标：(a)产生在2-5℃的冷藏储存温度下稳定至少1年的LACE眼科用溶液；和(b)产生和优化了用于制备对眼无刺激性的LACE眼科用溶液的工艺参数。LACE的化学结构显示两个降解点。一个是二硫戊环环的开环，而另一个是氧化和水解降解。如上所述，LACE与氧发生相互作用以快速生成氧化种类。在水中，LACE还对酯键水解敏感，从而生成硫辛酸和胆碱。水解的发生速率与温度相关；水解在较低温度和pH下较少。对储存在可透过的LDPE(低密度聚乙烯)滴眼瓶中的LACE眼科用溶液衍生物、也称作EV06眼科用溶液进行研究。本文描述了方法，即专利技术人已经研发了将储存期间混合的LACE溶液的氧化减少到最低限度。另外，与LACE的赋形剂混合物的研究确立了某些赋形剂作为稳定因素的关键程度、pH在稳定LACE在水中水解的作用以及重量摩尔渗透压浓度-调节剂例如氯化钠和甘油的作用。最重要的是，本专利技术描述了与柠檬酸盐、磷酸盐和硼酸盐相反，丙氨酸对LACE的稳定作用。在寻找引起刺激性的原因时，发现LACE在溶于水时会形成胶束和胶束聚集体，这对于两亲性质的化合物而言是常见的。正如定义的，形成胶束的化合物的实例是磷脂酰胆碱、聚乙二醇化磷脂酰胆碱、PEG-硬脂酸酯、山梨醇等。虽然由于分子的两亲性质，LACE的胶束形成现象并不令人意外，但这些聚集体在较低的温度下的形成是令人惊讶的。通过内部开发的RP-HPLC方法测定聚集体的存在。测定可以使用HPLC-UV(图3A)和HPLC-ELSD(图3B)进行。LACE水溶液在冷藏温度(2-5℃)下形成凝胶状结构。还期望这些胶束组件的数量和聚集随着形成胶束的药物的浓度的增加而增加。本专利技术人已将LACE的胶束聚集程度与眼表面刺激相关联，这是预料不到的且令人惊讶的结果，因为胶束媒介物通常被认为是用于不溶性化合物的药物递送系统。因此，这是首次报告的与胶束聚集体有关的刺激性的说明。一旦发现，这种现象需要通过复合方法来最小化，以与舒适度相关联。胶束聚集体的形成显然与配混温度相关(图4)。自组装物的形成是热力学现象，与有效降低表面自由能以实现最小能量本文档来自技高网...

【技术保护点】
用于治疗老视眼的药物组合物，其包含0.1‑10％重量的硫辛酸胆碱酯的药学上可接受的盐、0.1‑2％重量的张度调节剂、0.003‑0.01％重量的防腐剂、0.05％‑1.0％重量的生物化学能源和水。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.09.24 US 62/222,8441.用于治疗老视眼的药物组合物，其包含0.1-10％重量的硫辛酸胆碱酯的药学上可接受的盐、0.1-2％重量的张度调节剂、0.003-0.01％重量的防腐剂、0.05％-1.0％重量的生物化学能源和水。2.权利要求1的组合物，其中硫辛酸胆碱酯的药学上可接受的盐是氯化物、溴化物或碘化物盐。3.权利要求1或2的组合物，其中所述张度调节剂是甘油。4.权利要求1-3任一项的组合物，其中所述防腐剂是苯扎氯铵。5.权利要求1-4任一项的组合物，其中所述生物化学能源是丙氨酸。6.权利要求1-5任一项的组合物，其具有至少3个月、至少6个月、至少9个月或至少1年的贮存稳定性。7.权利要求1-6任一项的组合物，其为无刺激性滴眼液。8.生产权利要求1-7任一项的药物组合物的方法，其包括：精细研磨硫辛酸胆碱酯的药学上可接受的...

【专利技术属性】
技术研发人员：S·P·巴曼，K·L·沃德，K·S·克劳幅德，W·R·伯恩斯，
申请(专利权)人：安可视觉公司，
类型：发明
国别省市：美国,US