一种ASE法提取陈皮中橙皮苷的方法技术

本发明专利技术公开了一种ASE法提取陈皮中橙皮苷的方法，该方法提取时间短、且重复性好。属于橙皮苷提取领域。本发明专利技术将陈皮样品粉碎，取1g与3g硅藻土混合，并装于放有纤维滤膜的ASE萃取池中，加硅藻土至与池口平行；先用石油醚萃取，弃去萃取液；再用甲醇作为萃取液萃取，萃取结束后，用甲醇将其定容至100ml，即可。本发明专利技术可代替药典方法对陈皮中的橙皮苷进行提取以及含量测定。

【技术实现步骤摘要】
一种ASE法提取陈皮中橙皮苷的方法
本专利技术属于橙皮苷提取领域，尤其是一种ASE法提取陈皮中橙皮苷的方法。
技术介绍
《中国药典》2015年版一部制备供试品方法：取本品粗粉约1g，精密称定，置索氏提取器中，加石油醚(60～90℃)80ml，加热回流2～3小时，弃去石油醚，药渣挥干，加甲醇80ml，再加热回流至提取液无色，放冷，滤过，滤液置100ml量瓶中，用少量甲醇分数次洗涤容器，洗液滤入同一量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。该方法回流时间较长，且对技术人员的专业水平要求较高。
技术实现思路
针对上述不足，本专利技术旨在提供一种ASE法提取陈皮中橙皮苷的方法，该方法提取时间短、且重复性好。为了实现上述技术效果，本专利技术提供的技术方案是这样的：一种ASE法提取陈皮中橙皮苷的方法，依次包括下述步骤：步骤1：将陈皮样品粉碎，取1g与3g硅藻土混合；步骤2：将步骤1所得的混合物装于放有纤维滤膜的ASE萃取池中，加硅藻土至与池口平行；步骤3：先用石油醚萃取，弃去萃取液；再用甲醇作为萃取液萃取，萃取结束后，用甲醇将其定容至100ml，即可。优选地，步骤3所述的石油醚的使用温度为70～80℃。优选地，步骤3所述的使用石油醚萃取的参数为：温度为75℃，时间为3min，次数为1次，冲洗体积为60％，吹扫时间为60s；优选地，步骤3所述的使用甲醇萃取的参数为：温度为100℃，时间为8min，次数为3次，冲洗体积为60％，吹扫时间为60s本专利技术与传统方法相比，具有以下优点：本专利技术参考药典方法，先用石油醚(70～80℃)除杂，再用甲醇提取，获得良好的实验结果。本专利技术采用3因素3水平正交实验方案L9(33)安排实验，考察了采用甲醇作为萃取溶剂时萃取温度、静态萃取时间、循环次数，3个因素对加速溶剂萃取陈皮中橙皮苷的影响，确定从陈皮中提取橙皮苷的最佳快速溶剂萃取工艺。附图说明图1为以橙皮苷对照品进样的绝对量(mg)-峰面积进行的线性回归图；图2为橙皮苷对照品的色谱图；图3为采用ASE法所得的供试品溶液的色谱图；图4为采用药典方法所得的供试品溶液的色谱图。具体实施方式下面结合具体实施方式，对本专利技术的权利要求做进一步的详细说明，但不构成对本专利技术的任何限制，任何在本专利技术权利要求保护范围内所做的有限次修改，仍在本专利技术的权利要求保护范围内。实施例11、仪器设备及试剂1.1仪器：电子分析天平(XA205DU)、ASE350快速溶剂萃取仪(美国DIONEX公司)、Agilent1290液相色谱仪1.2试剂：水：符合GB/T6682规定的一级水；甲醇(CH4O)：色谱纯(液相色谱用)。2、方法2.1对照品溶液的制备：取橙皮苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.4mg的溶液，即得。2.2供试品溶液的制备2.2.1《中国药典》2015年版一部制备供试品方法：取本品粗粉约1g，精密称定，置索氏提取器中，加石油醚(60～90℃)80ml，加热回流2～3小时，弃去石油醚，药渣挥干，加甲醇80ml，再加热回流至提取液无色，放冷，滤过，滤液置100ml量瓶中，用少量甲醇分数次洗涤容器，洗液滤入同一量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。2.2.2快速溶剂萃取法(ASE)制备供试品方法：样品经粉碎机粉碎，取粗粉约1g，精密称定，与约1g硅藻土混合均匀，待用，移入到预先放好纤维滤膜的ASE10ml萃取池中再加入适量硅藻土，轻轻振摇使之与池口在同一水平线上，拧紧萃取池上盖，放入快速萃取仪中进行萃取。先用石油醚(70～80℃)萃取，弃去萃取液；再用甲醇作为萃取液萃取，萃取结束后，把萃取液转移转移至100ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。2.3ASE萃取条件所述的第一次萃取步骤的参数为：温度为75℃，时间为3min，次数为1次，冲洗体积为60％，吹扫时间为60s；所述的第二次萃取步骤的参数为：温度为100℃，时间为8min，次数为3次，冲洗体积为60％，吹扫时间为60s。2.4色谱条件与系统适用性试验a)仪器：Agilent1290；b)色谱柱：ACE,UltraCoreSuperC18，2.5μm，2.1*75mm；c)柱温：40℃；d)流速：0.3mL/min；e)流动相：：甲醇-醋酸-水(35:4:61)；f)检测波长：283nm；以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；理论板数按橙皮苷峰计算应不低于2000。2.5测定法照高效液相色谱法(通则0512)测定分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各1μl，注入液相色谱仪，测定，即得。2.6标准限值要求本品按干燥品计算，含橙皮苷(C28H34O15)不得少于3.5％。2.7计算(外标法)式中CR——对照品溶液浓度，单位为微克每升(mg/L)；AX——供试品的峰面积；AR——对照品峰面积。注意：使用前萃取池底部应拆卸清理干净，否则容易引起压力不稳；萃取池底部的滤纸应在密封圈内，否则引起渗漏；萃取池装样时松紧适中，太松容易导致提取液过多；开机前检查气瓶气压是否达到1Mpa；使用结束后清理干净，萃取池要及时晾干(容易生锈)。3、结果3.1线性关系取橙皮苷对照品，精密称定，加甲醇制成每1ml约含0.4mg的溶液，即得，然后分别精密吸取该溶液0.2μl、0.5μl、0.8μl、1.0μl、1.5μl、2.0μl进入LC测定，并依照上述方法测定，结果详见表1。以进样绝对量(mg)-峰面积进行线性回归，求得回归方程：橙皮苷y＝4794.1314x+41.4331，R2＝1.0000,橙皮苷在0.0822～0.8215mg围内呈良好的线性关系，详见图1。表1线性实验结果进样绝对量(mg)第一针峰面积第二针峰面积平均峰面积0.0822421.79071437.20343429.497070.20541032.550291021.528691027.039490.32861622.848511629.015751625.932130.41082010.518432001.511602006.015020.61613003.706542998.187993000.947270.82153977.982183971.106453974.544323.2精密度和稳定性实验取橙皮苷对照品溶液(0.3286mg/ml)，连续进样6次，记录峰面积，峰面积RSD为0.7％，表明仪器精密度良好。取同一供试品溶液，室温下放置，分别于0，2，4，6，8，12h依法测定。结果橙皮苷峰面积的RSD为0.3％，表明供试品溶液在12h内稳定。所测得的色谱图详见图2至图4，其中图2为橙皮苷对照品的色谱图，图3为采用ASE法所得的供试品溶液的色谱图，图4为采用药典方法所得的供试品溶液的色谱图。3.3重复性实验取相同批号(批号20150801)的样品1g，共9份，精密称定，按上述ASE提取方法提取供试品溶液，进样量为1μl，以上述的色谱条件平行试验，测得样品中橙皮苷的含量见表2，RSD为1.9％，结果表明ASE提取方法重复性良好。表2重复性实验结果3.4样品不同仪器提取结果及与药典方法结果比较(3批)表3不同ASE仪的提取结果比较表4ASE法与药典方法的提取结果比较4、讨论：4.1ASE提取溶剂的选择：本专利技术参考药典方法，先用石油醚(70～80℃)除杂本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种ASE法提取陈皮中橙皮苷的方法，其特征在于，依次包括下述步骤：步骤1：将陈皮样品粉碎，取1g与3g硅藻土混合；步骤2：将步骤1所得的混合物装于放有纤维滤膜的ASE萃取池中，加硅藻土至与池口平行；步骤3：先用石油醚萃取，弃去萃取液；再用甲醇作为萃取液萃取，萃取结束后，用甲醇将其定容至100ml，即可。

【技术特征摘要】
1.一种ASE法提取陈皮中橙皮苷的方法，其特征在于，依次包括下述步骤：步骤1：将陈皮样品粉碎，取1g与3g硅藻土混合；步骤2：将步骤1所得的混合物装于放有纤维滤膜的ASE萃取池中，加硅藻土至与池口平行；步骤3：先用石油醚萃取，弃去萃取液；再用甲醇作为萃取液萃取，萃取结束后，用甲醇将其定容至100ml，即可。2.根据权利要求1所述的一种ASE法提取陈皮中橙皮苷的方法，其特征在于，步骤3所述的石油醚...

【专利技术属性】
技术研发人员：张云平，黄林杰，赖秀梅，
申请(专利权)人：广西壮族自治区梧州食品药品检验所，
类型：发明
国别省市：广西,45