一种测定野菊花中蒙花苷含量的方法技术

本发明专利技术公开了一种测定野菊花中蒙花苷含量的方法，属于化学检测领域。旨在提供一种萃取迅速、检测精度高的测定野菊花中蒙花苷含量的方法。该方法依次包括下述步骤：步骤1：将0.25g野菊花粉末与0.3g硅藻土混合均匀放入ASE萃取池；步骤2：用丙二醇萃取，并收集丙二醇萃取液；步骤3：采用HPLC法测定丙二醇萃取液中的蒙花苷的含量。本发明专利技术可代替药典方法对野菊花中的蒙花苷进行提取以及质量监控。

【技术实现步骤摘要】
一种测定野菊花中蒙花苷含量的方法
本专利技术属于化学检测领域，尤其是一种测定野菊花中蒙花苷含量的方法。
技术介绍
本品为菊科植物野菊ChrysanthemumindicumL.的干燥头状花序。秋、冬二季花初开放时采摘，晒干，或蒸后晒干。本品呈类球形，直径0.3～1cm，棕黄色。总苞由4～5层苞片组成，外层苞片卵形或条形，外表面中部灰绿色或浅棕色，通常被白毛，边缘膜质；内层苞片长椭圆形，膜质，外表面无毛。总苞基部有的残留总花梗。舌状花1轮，黄色至棕黄色，皱缩卷曲；管状花多数，深黄色，体轻，气芳香，味苦。药典中记载的提取方法为：取本品粉末(过三号筛)约0.25g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入乙腈100ml，称定重量，加热回流3小时，放冷，再称定重量，用乙腈补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得，并结合药典记录的测定方法进行测定。上述野菊花中蒙花苷的含量的测定方法用时长，对操作人员要求高。
技术实现思路
针对上述不足，本专利技术旨在提供一种萃取迅速、检测精度高的测定野菊花中蒙花苷含量的方法。为了实现上述技术效果，本专利技术提供的技术方案是这样的：一种测定野菊花中蒙花苷含量的方法，依次包括下述步骤：步骤1：将0.25g野菊花粉末与0.3g硅藻土混合均匀放入ASE萃取池；步骤2：用丙二醇萃取，并收集丙二醇萃取液；步骤3：采用HPLC法测定丙二醇萃取液中的蒙花苷的含量。优选地，所述的步骤1依次包括下述步骤：步骤S1：将野菊花粉碎，过三号筛，取0.25g与0.3g硅藻土混合均匀；步骤S2：将步骤1所得的混合物装于放有滤膜的ASE萃取池中，加硅藻土至与池口平行；步骤S3：用丙二醇萃取，并用丙二醇定容至100ml，离心，取上清液。优选地，步骤S2所述的ASE萃取池的体积为5ml。优选地，步骤S3所述的离心参数为：速度为15000r/min，时间为5min。优选地，步骤S3所述的萃取参数为：温度为100℃，萃取时间为7min，循环次数为2次，冲洗体积为60％，吹扫时间为60s。优选地，步骤2所述的HPLC法的检测参数为：色谱柱：ThermoSyncronisC18；柱温：40℃；流速：0.5mL/min；体积比等于26：24的丙二醇：2％醋酸；检测波长：334nm。优选地，所述的色谱柱的规格为3*100mm，3μm。本专利技术与传统方法相比，具有以下优点：1、蒙花苷为黄酮类化合物，黄酮苷一般易溶于水、丙二醇、乙醇、乙酸乙酯、吡啶等溶剂，难溶于乙醚、三氯甲烷、苯等有机溶剂。查看相关文献，拟对80％丙二醇、丙二醇、乙醇进行提取溶剂的考察，评判的主要依据为提取率高低、杂质多少选出最佳溶剂。结果显示乙醇提取率最大，依次到丙二醇、80％丙二醇。乙醇提取的样品峰型差且杂质多。所以选择丙二醇作为提取溶剂。2、实验提取溶剂为丙二醇，依据经验，采用萃取温度100℃、静态萃取时间7min，利用单因素考察了循环次数1次、2次、3次，结果表明循环2次已能提取完全，因此本专利技术的循环次数为2次。附图说明图1为以蒙花苷对照品的浓度(ng)-平均峰面积进行线性回归图。具体实施方式下面结合具体实施例对本专利技术的权利要求书做进一步说明，下述的实施例仅为本专利技术的较佳实施例，并不构成对本专利技术的任何限制。在本专利技术权利要求书的保护范围所作出的任何修改、等同替换均属于本专利技术所要保护的范围内。实施例11、仪器设备及试剂1.1仪器：电子分析天平(XA205DU)、ASE350快速溶剂萃取仪(美国DIONEX公司)、ThermoU3000UHPLC液相色谱仪、安捷伦1290高效液相色谱仪。1.2试剂：水：符合GB/T6682规定的一级水；丙二醇(CH4O)：色谱纯；冰醋酸(CH3COOH)：分析纯。2、方法2.1对照品溶液的制备：取蒙花苷对照品适量，精密称定，加丙二醇制成每1ml含25μg的溶液，即得。2.2供试品溶液的制备2.2.1《中国药典》2015年版一部制备供试品方法：取本品粉末(过三号筛)约0.25g。精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入丙二醇100ml，称定重量，加热回流3小时，放冷，再称定重量，用丙二醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。2.2.2快速溶剂萃取法(ASE)制备供试品方法：样品经粉碎机粉碎，过三号筛，约0.25g，精密称定，与0.3g硅藻土混合均匀，待用，移入到预先放好过滤膜的5ml萃取池中再加入适量硅藻土，轻轻振摇使之与池口在同一水平线上，拧紧萃取池上盖。萃取结束后，把萃取液转移于100ml容量瓶中，用丙二醇稀释至刻度，在15000r/min下离心5min，取上清液，进入LC测定。2.3ASE萃取条件：温度为100℃，萃取时间为7min，循环次数为2次，冲洗体积为60％，吹扫时间为60s。2.4色谱条件与系统适用性试验色谱柱：ThermoSyncronisC18；柱温：40℃；流速：0.5mL/min；体积比等于26：24的丙二醇：2％醋酸；检测波长：334nm。优选地，所述的色谱柱的规格为3*100mm，3μm；以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论板数按蒙花苷峰计算应不低于3000。2.5测定法照高效液相色谱法(通则0512)测定分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各2μl，注入液相色谱仪，测定，即得。2.6标准限值要求本品含蒙花苷(C28H34O14)不得少于0.80％。2.7计算(外标法)式中CR——对照品溶液浓度，单位为微克每毫升(mg/mL)；AX——供试品的峰面积；AR——对照品峰面积。注意：使用前萃取池底部应拆卸清理干净，否则容易引起压力不稳；萃取池底部的滤纸应在密封圈内，否则引起渗漏；萃取池装样时松紧适中，太松容易导致提取液过多；开机前检查气瓶气压是否达到1Mpa；使用结束后清理干净，萃取池要及时晾干(容易生锈)。3、结果3.1线性关系取蒙花苷对照品溶液(浓度：0.005284mg/ml)，分别精密吸取该溶液0.5μl、1μl、2μl、4μl、5μl进入LC测定，并依照上述方法测定，结果详见表1。以浓度(ng)-平均峰面积进行线性回归，求得回归方程：y＝0.0706x+0.0141，R2＝0.9989。蒙花苷在2.642～26.420ng范围内呈良好的线性关系，详见图1。表1线性实验结果3.2重复性试验取相同批号的样品(批号：1510020)0.25g，共6份，精密称定，按ASE提取方法提取供试品溶液，进样量为2μl，以上述的色谱条件平行试验，测得样品中蒙花苷的含量见表2，RSD为2.6％，结果表明ASE提取方法重复性良好。表2重复性实验结果3.3样品不同仪器提取结果及与药典方法结果比较(3批)表3不同仪器提取结果比较表4ASE与药典提取结果比较4、讨论：4.1ASE提取溶剂的选择：蒙花苷为黄酮类化合物，黄酮苷一般易溶于水、丙二醇、乙醇、乙酸乙酯、吡啶等溶剂，难溶于乙醚、三氯甲烷、苯等有机溶剂。查看相关文献，拟对80％丙二醇、丙二醇、乙醇进行提取溶剂的考察，评判的主要依据为提取率高低、杂质多少选出最佳溶剂。结果显示乙醇提取率最大，依次到丙二醇、80％丙二醇。乙醇提取的样品峰型差且杂质多。所以选择丙二醇作为提取溶剂。4.2ASE提取条件的优化实验提取溶剂为丙二醇，依据经验，采用萃取温度100℃、静态萃取时间7min，利用单本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种测定野菊花中蒙花苷含量的方法，其特征在于，依次包括下述步骤：步骤1：将0.25g野菊花粉末与0.3g硅藻土混合均匀放入ASE萃取池；步骤2：用丙二醇萃取，并收集丙二醇萃取液；步骤3：采用HPLC法测定丙二醇萃取液中的蒙花苷的含量。

【技术特征摘要】
1.一种测定野菊花中蒙花苷含量的方法，其特征在于，依次包括下述步骤：步骤1：将0.25g野菊花粉末与0.3g硅藻土混合均匀放入ASE萃取池；步骤2：用丙二醇萃取，并收集丙二醇萃取液；步骤3：采用HPLC法测定丙二醇萃取液中的蒙花苷的含量。2.根据权利要求1所述的一种测定野菊花中蒙花苷含量的方法，其特征在于，所述的步骤1依次包括下述步骤：步骤S1：将野菊花粉碎，过三号筛，取0.25g与0.3g硅藻土混合均匀；步骤S2：将步骤1所得的混合物装于放有滤膜的ASE萃取池中，加硅藻土至与池口平行；步骤S3：用丙二醇萃取，并用丙二醇定容至100ml，离心，取上清液。3.根据权利要求2所述的一种测定野菊花中蒙花苷含量的方法，其特征在于，步骤S2所述的ASE萃取池的体积为5ml。4.根据权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员：张云平，王华，
申请(专利权)人：广西壮族自治区梧州食品药品检验所，
类型：发明
国别省市：广西,45