CRISPR-Cas13a系统特异性靶向人RSPO2基因的crRNA及系统和应用技术方案
CRISPR-Cas13a system specific targeting of human RSPO2 gene crRNA and its system and Application
The invention discloses a crRNA system and a specific target system for targeting human RSPO2 gene in CRISPR Cas13a system. The crRNA can construct CRISPR Cas13a system to specifically target human RSPO2 gene and detect RSPO2 gene in body fluid specifically. The invention has the advantages of no invasion, frequent frequent detection and fast detection speed. Compared with the current liquid biopsy, the invention can detect trace RSPO2 in body fluid by fluorescence reading, without high flux sequencing, which has the advantages of low cost and fast detection speed, which is suitable for large-scale clinical application.
【技术实现步骤摘要】
CRISPR-Cas13a系统特异性靶向人RSPO2基因的crRNA及系统和应用
本专利技术属于生物
，具体地说，涉及在体液中CRISPR-Cas13a系统特异性靶向人RSPO2基因的crRNA及系统和应用。
技术介绍
肝纤维化是肝脏对各种原因所致慢性肝损伤的创伤愈合反应，导致肝小叶内和汇管区大量纤维组织增生和沉淀，病理学特点是以胶原蛋白为主的细胞外基质各种成分合成增多，降解相对不足，但并未形成小叶内间隔，如进一步发展则进入肝硬化。肝纤维化是可逆的过程，对肝纤维化的预防和早期干预是稳定病情、阻止肝纤维化向肝硬化和肝癌发展的最佳措施。肝穿刺组织活检是目前诊断肝纤维化的金标准，但是肝穿刺属于创伤性检测会给病人带来痛苦及风险，而且局部采样并不能反应患者的整体情况。人外周血中存在游离DNA(Cell-FreeDNA，cfDNA)，cfDNA与人的生理状况、疾病存在相关性，可以作为辅助诊断疾病的生物标志物。液体活检(Liquidbiopsy)通过检测血液或者尿液等体液中的生物标志物为疾病的分析诊断提供辅助信息。与现有的组织活检方法相比，液体活检具有无侵入性、可频繁多次...
【技术保护点】
一种CRISPR‑Cas13a系统中特异性靶向人RSPO2基因的crRNA，其特征在于，所述的crRNA序列格式为：5`‑与Cas13a蛋白结合的直接重复序列‑crRNA间隔序列‑3`；其中crRNA间隔序列如SEQ ID NO：2、6、10、14中任意一条所示。
【技术特征摘要】
1.一种CRISPR-Cas13a系统中特异性靶向人RSPO2基因的crRNA，其特征在于，所述的crRNA序列格式为：5`-与Cas13a蛋白结合的直接重复序列-crRNA间隔序列-3`；其中crRNA间隔序列如SEQIDNO：2、6、10、14中任意一条所示。2.如权利要求1所述的CRISPR-Cas13a系统中特异性靶向人RSPO2基因的crRNA，其特征在于，四条crRNA针对的目标靶序列分别如SEQIDNO：1、5、9、13中任意一条所示，对应的间隔序列分别如SEQIDNO：2、6、10、14所示，对应的PFS分别为C、U、C、A。3.如权利要求1所述的CRISPR-Cas13a系统中特异性靶向人RSPO2基因的crRNA，其特征在于，所述的Cas13a蛋白为LwCas13a，crRNA序列如SEQIDNO：3、7、11、15中任意一条所示。4.如权利要求1所述的CRISPR-Cas13a系统中特异性靶向人RSPO2基因的crRNA，其特征在于，所述的Cas13a蛋白为LshCas13a，crRNA序列如SEQID...
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