The invention provides a kit for extracting genomic DNA, reagent 1, reagent 2 and reagent 3. The kit of the invention enhances the purity and integrity of the extracted genome DNA, improves the yield of the product, the reagent used is innocuous and harmless, and ensures the health of the operator and reduces the pollution of the environment. The genomic DNA can be extracted from the micro samples, and the damage free sampling of the detected object is realized, and the extraction efficiency is high.
【技术实现步骤摘要】
一种提取基因组DNA的试剂盒
本专利技术涉及分子生物学的生物样品提取领域,尤其涉及一种提取基因组DNA的试剂盒和提取方法。
技术介绍
目前常采用CTAB法、PTB法、QIAGEN试剂盒法、高盐低pH法等方法提取基因组DNA。CTAB法采用CTAB(hexadecyltrimethylammoniumbromide,十六烷基三甲基溴化铵),它是一种阳离子去污剂,在高离子强度的溶液中,CTAB与蛋白质和多聚糖形成复合物,产生沉淀,但却不能与核酸形成复合物产生沉淀。通过离心获得含有核酸的上清液,通过加入氯仿等有机试剂进行抽提,去除蛋白、多糖、酚类等杂质后,加入乙醇沉淀即可使核酸分离出来。CTAB法需要用到β-巯基乙醇、氯仿、酚等试剂。但酚和氯仿的使用会对人体有一定的危害,并污染环境。且提取大概需要花费2-3天时间。PTB法需要使用EDTA、蛋白酶K、PTB、酚、氯仿等试剂,其操作步骤异常繁琐,操作时间需5-7天,操作过程中会使用到酚、氯仿多种有害物质。高盐低pH法:需要使用EDTA、NaCl、醋酸钠、十二烷基硫酸钠(SDS)、氯仿、醋酸钾等试剂。操作步骤与CTAB法类似 ...
【技术保护点】
提取基因组DNA的试剂盒,包括试剂1、试剂2和试剂3,其中所述试剂1包括以下组分:0.1%‑5%的十六烷基三甲基溴化铵(质量百分比)、10mM‑200mM的Tris、10mM‑200mM的EDTA、0.1%‑10%的PVP(质量百分比)、0.1M‑5M的NaCl、溶剂为去离子水;试剂2包括以下组分:0.1M‑6.5M的盐酸胍、1%‑50%的乙醇(体积百分比)、0.1M‑2M的柠檬酸钠、溶剂为去离子水;试剂3包括以下组分:0.1M‑8M的盐酸胍、0.05M‑0.2M的甘氨酸、溶剂为去离子水。
【技术特征摘要】
1.提取基因组DNA的试剂盒,包括试剂1、试剂2和试剂3,其中所述试剂1包括以下组分:0.1%-5%的十六烷基三甲基溴化铵(质量百分比)、10mM-200mM的Tris、10mM-200mM的EDTA、0.1%-10%的PVP(质量百分比)、0.1M-5M的NaCl、溶剂为去离子水;试剂2包括以下组分:0.1M-6.5M的盐酸胍、1%-50%的乙醇(体积百分比)、0.1M-2M的柠檬酸钠、溶剂为去离子水;试剂3包括以下组分:0.1M-8M的盐酸胍、0.05M-0.2M的甘氨酸、溶剂为去离子水。2.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,还包括洗涤液。3.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,还包括洗脱液。4.根据权利要求3所述的试剂...
【专利技术属性】
技术研发人员:林源吉,丁佳女,叶俊波,洪巧娟,
申请(专利权)人:杭州百迈生物股份有限公司,
类型:发明
国别省市:浙江,33
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