一种二苯醚类化合物及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种二苯醚类化合物及其制备方法和应用。所述的二苯醚类化合物是以福士拟茎点霉（Phomopsis fukushii）菌株经发酵、提取、层析、纯化后得到，其分子式为C18H20O4，结构式为：

A two phenyl ether compound and its preparation method and Application

The invention discloses a two phenyl ether compound and a preparation method and application thereof. The two phenylene ether compounds are obtained by fermentation, extraction, chromatography and purification of the strain of Phomopsis fukushii. The molecular formula is C18H20O4.

【技术实现步骤摘要】
一种二苯醚类化合物及其制备方法和应用
本专利技术属于生物
，具体涉及一种二苯醚类化合物及其制备方法与应用。
技术介绍
1978年，医务人员在上海抽检了200株金黄色葡萄球菌，分离出的甲氧西林耐药的金黄色葡萄球菌(MRSA)还不到5%。2009年对住院病人的抽样调查显示对甲氧西林耐药的金黄色葡萄球菌（MRSA）超过60%，同比2000年增长了40%。中国医科大学微生物学院的朱宝丽及其同事曾对中国、丹麦、西班牙人肠道菌群的DNA进行测序，研究显示：中国人肠道菌群具有更多的耐药基因。因此研发能有效控制耐药细菌感染的新策略和新药物，成为抗菌素研究的热点。
技术实现思路
本专利技术的第一目的在于提供一种二苯醚类化合物；第二目的在于提供所述的二苯醚类化合物的制备方法；第三目的在于提供所述的二苯醚类化合物的应用。本专利技术的第一目的是这样实现的，所述的二苯醚类化合物是以福士拟茎点霉（Phomopsisfukushii）菌株经发酵、提取、层析、纯化后得到，其分子式为C18H20O4，结构式为：该化合物命名为：diphentherA；所述福士拟茎点霉（Phomopsisfukushii）菌株，菌株保藏编号为CCTCCM2017632，保藏日期为2017年10月23日。本专利技术的第二目的是这样实现的，包括以下步骤：A、固体发酵：将菌株福士拟茎点霉（Phomopsisfukushii）在马铃薯葡萄糖琼脂培养基中于28℃培养7天，接种到含10~100ml液体种子培养基的50~500ml的三角瓶中，于28℃下在转速180rpm旋转震荡的条件下震荡培养5~10天得到含菌营养基，将其接种到大米固体培养基中培养得到发酵产物；B、浸膏提取：将发酵产物中加入固液体积比1.5~3倍的有机溶剂超声提取2~4次，每次4~8h，合并提取液，过滤，减压浓缩至1/4~1/2体积时，静置，滤除沉淀物，浓缩得到浸膏；C、氯仿-丙酮硅胶柱层析：浸膏上硅胶柱层析，装柱硅胶为200~300目，用量为浸膏重量6~8倍量；用体积比为1:0~0:1的氯仿-丙酮混合溶剂梯度洗脱，收集梯度洗脱液、浓缩，经TLC监测，合并相同的部分；D、石油醚-乙酸乙酯硅胶柱层析：将C步骤中8:2配比的氯仿-丙酮混合溶剂进行洗脱得到的洗脱液上硅胶柱层析，装柱硅胶为200~300目，用量为洗脱液重量6~8倍，用体积比为1:0~0:1的石油醚-乙酸乙酯混合溶剂梯度洗脱，收集梯度洗脱液、浓缩，经TLC监测，合并相同的部分；E、高压液相色谱分离纯化：将D步骤中7:3配比的石油醚-乙酸乙酯混合溶剂进行洗脱得到的洗脱液经硅胶柱色谱和制备高效液相色谱分离纯化即得目标物二苯醚类化合物，即diphentherA。本专利技术的二苯醚类化合物的结构通过以下方法测定：本专利技术化合物为红色胶状物；紫外光谱（溶剂为甲醇），λmaxnm(logε)：284(3.62),206(4.68)；红外光谱（溴化钾压片）νmax:2935,2836,1684,1612,1455,1331,1156,1060,855cm-1；HRESIMS显示本专利技术化合物加钠的分子离子峰m/z323.1262[M+Na]+（C18H20NaO4计算值为323.1259），结合1H和13CNMR谱（图2和图3，数据归属见表1）给出其分子式C18H20O4。化合物的1HNMR谱显示化合物中有20个氢信号，包括两个甲基质子信号[H3-7（dH2.33s），H3-7′（dH2.25s）]，五个芳基质子信号[H-2（dH6.44s），H-4（dH6.51s），H-6（dH6.47s），H-2'（dH6.38dJ=2.2），H-6'（dH6.32dJ=2.2]，两个甲氧基信号[OMe-3（dH3.80s)，OMe-3′（dH3.85s)]，一个乙酰基质子信号H3-9'（dH2.59s）。化合物的13CNMR谱显示化合物中有18个碳信号，包括两个甲基碳信号[C-7（dC21.6q），C-7＇（dC23.6q）]，两个甲氧基碳信号[3-OMe（dC56.0q），3＇-OMe（dC56.3q）]，乙酰基碳信号[C-8＇（dC198.5s），C-9＇（dC29.6q）]，五个sp2杂化的芳基次甲基碳信号[C-2（dC103.8d），C-4（dC109.5d），C-6（dC111.8d），C-2＇（dC100.2d），C-6＇（dC113.6d）]，七个sp2杂化的芳基季碳信号[C-1（dC155.3s），C-3（dC160.9s），C-5（dC140.4s），C-1＇（dC162.7s），C-3＇（dC164.3s），C-4＇（dC110.6s），C-5＇（dC142.4s）]，其中四个碳连氧。综合1HNMR谱和13CNMR谱数据，说明该化合物有两个苯环存在。两个苯环中有四个连氧的季碳，除了两个甲氧基取代以外，应有一个氧原子连接两个苯环形成醚键，该化合物为二苯醚的衍生物。苯环上有两个甲基、两个甲氧基、一个乙酰基取代。红外光谱显示有羰基（1684cm-1）和苯基（1612,1455,1331cm-1）的吸收峰。HMBC谱中H-9′(δH2.59)和C-4′(δC110.6)相关，证实乙酰基连接在C-4′位，甲氧基质子OMe(δH3.80)和C-3(δC160.9)，甲氧基质子OMe(δH3.85)和C-3′(δC164.3)相关，证实两个甲氧基分别连接在C-3和C-3′位，两个甲基质子H3-7(δH2.33)和C-4(δC109.5)/C-5(δC140.4)/C-6(δC111.8)相关，H3-7′(δH2.25)和C-4′(δC110.6)/C-5′(δC142.4)/C-6′(δC113.6)相关，证实两个甲基分别连接在C-5和C-5′位。此外，特征质子信号H-2(δH6.44s),H-4(δH6.51s),H-6(δH6.47,s),H-2′(δH6.38,d,J=2.2)和H-6′(δH6.32,d,J=2.2)也证明以上取代基的位置，因此化合物的结构得以确认。表1化合物的1H和13CNMR数据（溶剂为C5D5N）本专利技术的第三目的是这样实现的，所述的二苯醚类化合物在制备抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌药物中的应用。近年来，研究的重点重新转向了从微生物中寻找具有不同抗菌机理的新骨架次生代谢产物，而植物内生真菌代谢产物是该领域最引人注目的热点，其中最常产生抗菌活性化合物的类群为拟茎点霉属（Phomopsis）、茎点霉属（Phoma）和镰刀菌属（Fusarium）。拟茎点霉属是半知菌亚门、腔孢纲真菌中的一个大属，该类菌株可产生丰富的次生代谢产物，Weber等从鸡冠刺桐分离出的Phomopsissp.中获得的一个新的抗菌活性内酯类化合物phomol，该化合物对24种细菌和真菌进行生物学试验都显示出很好的抗菌活性。Horn等从细柱柳中分离出Phomopsissp.菌株，分离到的细胞松弛素类生物碱phomopsichalasin可抑制金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽胞杆菌、藤黄球菌、大肠杆菌。很多天然的二苯醚表现出很好的抗菌活性。本专利技术从一株福士拟茎点霉（Phomopsisfukushii）发酵产物中分离得到一个新的二苯醚类化合物diphentherA，该化合物具有显著的本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种二苯醚类化合物，其特征在于所述的二苯醚类化合物是以福士拟茎点霉（Phomopsis fukushii）菌株经发酵、提取、层析、纯化后得到，其分子式为C18H20O4，结构式为：

【技术特征摘要】
1.一种二苯醚类化合物，其特征在于所述的二苯醚类化合物是以福士拟茎点霉（Phomopsisfukushii）菌株经发酵、提取、层析、纯化后得到，其分子式为C18H20O4，结构式为：该化合物命名为：diphentherA；所述福士拟茎点霉（Phomopsisfukushii）菌株，菌株保藏编号为CCTCCM2017632，保藏日期为2017年10月23日。2.一种权利要求1所述二苯醚类化合物的制备方法，其特征在于包括以下步骤：A、固体发酵：将菌株福士拟茎点霉（Phomopsisfukushii）在马铃薯葡萄糖琼脂培养基中于28℃培养7天，接种到含10~100ml液体种子培养基的50~500ml的三角瓶中，于28℃下在转速180rpm旋转震荡的条件下震荡培养5~10天得到含菌营养基，将其接种到大米固体培养基中培养得到发酵产物；B、浸膏提取：将发酵产物中加入固液体积比1.5~3倍的有机溶剂超声提取2~4次，每次4~8h，合并提取液，过滤，减压浓缩至1/4~1/2体积时，静置，滤除沉淀物，浓缩得到浸膏；C、氯仿-丙酮硅胶柱层析：浸膏上硅胶柱层析，装柱硅胶为200~300目，用量为浸膏重量6~8倍量；用体积比为1:0~0:1的氯仿-丙酮混合溶剂梯度洗脱，收集梯度洗脱液、浓缩，经TLC监测，合并相同的部分；D、石油醚-乙酸乙酯硅胶柱层析：将C步骤中8:2配比的氯仿-丙酮混合溶剂进行洗脱得到的洗脱液上硅胶柱层析，装柱硅胶为200~300目，用量为洗脱液重量6~8倍，用体积比为1:0~0:1的石油醚-乙酸乙酯混合溶剂梯度洗脱，收集梯度洗脱液、浓缩，经TLC监测，合并相同的部分；E、高压液相色谱分离纯化：将D步骤中7:3配比的石油醚-乙酸乙酯混合溶剂进行洗脱得到的洗脱液经硅胶柱色谱和制...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨海英，杜刚，胡秋芬，胡秋月，刘赟，詹梦涛，陆小凯，
申请(专利权)人：云南民族大学，
类型：发明
国别省市：云南,53