一种鹿血鉴定方法和鹿血鉴定试剂盒技术

本发明专利技术公开了一种鹿血鉴定方法，包括步骤：提取待测血液的基因组DNA；使用检测引物对基因组DNA中的cytb片段进行PCR扩增；使用第一限制性内切酶对PCR扩增片段进行酶切，判断待测血液为鹿血真品、鹿血伪品或鹿血真伪混合品；若待测血液判断为鹿血真品，使用第二限制性内切酶对PCR扩增片段进行酶切，判断鹿血为梅花鹿血或马鹿血。上述的检测方法能够同时完成对鹿血真伪、鹿血掺伪，以及梅花鹿和马鹿血液的鉴定，具有检测准确度高、可重复性好、操作简单和成本低的优势。本发明专利技术还公开了一种鹿血鉴定试剂盒，包括上述检测引物和限制性内切酶，能够实现对鹿血、非鹿血、梅花鹿血和马鹿血的快速、准确区分，适于大规模的生产和推广。

A method for the identification of deer blood and a kit for the identification of deer blood

The invention discloses a method for the identification of deer blood, which includes the steps of extracting the genomic DNA of the blood to be measured, using the detection primers to amplify the cytb fragment in the genomic DNA, and use the first restriction endonuclease to cut the PCR amplified fragment to determine the true and false mixture of the deer blood, the deer blood counterfeit or the deer blood. If the blood is judged to be the genuine blood of deer, second restriction endonucleases are used for enzyme digestion of PCR amplified fragments to determine deer blood as Cervus blood or red deer blood. The above detection methods can simultaneously complete the authenticity of deer blood, the adulteration of deer blood, and the identification of the blood of the sika deer and the deer. It has the advantages of high accuracy, good repeatability, simple operation and low cost. The invention also discloses a kind of deer blood identification kit, which includes the above detection primers and restriction endonucleases, and can realize the rapid and accurate distinction between deer blood, non deer blood, plum blossom deer blood and wapiti blood. It is suitable for large-scale production and popularization.

【技术实现步骤摘要】
一种鹿血鉴定方法和鹿血鉴定试剂盒
本专利技术属于分子鉴定
，具体涉及一种鹿血鉴定方法和鹿血鉴定试剂盒。
技术介绍
鹿血是鹿科动物梅花鹿(Cervusnippon)或马鹿(Cervuselaphus)的血液，是传统名贵中药，其功效在历代医学典籍中均有记载，民间也广为流传。鹿血在我国作为药材已有很长的历史，唐代孙思邈的《千金翼方·食治》最早记录了鹿血的药用功效，之后历代本草中也均有记载，至明代，李时珍将鹿血的功效更详细的记录于《本草纲目》中：“主阳萎、补虚，止腰痛，鼻衄，跌伤，狂犬伤，和酒服治肺痿吐血，及崩中带下，诸气痛欲危者饮之立愈。大补虚损，益精血，解痘毒、药毒”。近代临床研究表明，鹿血可治心悸、失眠、健忘、跌伤、抗衰老等，在中医临床上亦有重要地位。随着人们对保健食品和药品的重视，使得鹿血的药用保健价值更为国内外关注，鹿血产品系列不断丰富，包括鹿血酒、鲜鹿血、鹿血晶等，所产生的市场价值和需求十分巨大。在经济利益的驱使下，市场上常会出现利用其它常见动物血液假冒的鹿血，或在鹿血产品中掺入其他常见动物血以次充好来降低成本，常用的动物血液为猪、牛、羊、鸭等的血液。常见动物血液与鹿血在外本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种鹿血鉴定方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)提取待测血液的基因组DNA；(2)使用检测引物对基因组DNA中的cytb片段进行PCR扩增；(3)使用第一限制性内切酶对PCR扩增片段进行酶切，根据酶切产物的大小判断待测血液为鹿血真品、鹿血伪品或鹿血真伪混合品；所述第一限制性内切酶的酶切位点为鹿血的cytb片段中区别于非鹿血的cytb片段的酶切位点；(4)若待测血液判断为鹿血真品，使用第二限制性内切酶对PCR扩增片段进行酶切，根据酶切产物的大小判断鹿血为梅花鹿血或马鹿血；所述第二限制性内切酶的酶切位点为梅花鹿血的cytb片段中区别于马鹿血的cytb片段的酶切位点。

【技术特征摘要】
1.一种鹿血鉴定方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)提取待测血液的基因组DNA；(2)使用检测引物对基因组DNA中的cytb片段进行PCR扩增；(3)使用第一限制性内切酶对PCR扩增片段进行酶切，根据酶切产物的大小判断待测血液为鹿血真品、鹿血伪品或鹿血真伪混合品；所述第一限制性内切酶的酶切位点为鹿血的cytb片段中区别于非鹿血的cytb片段的酶切位点；(4)若待测血液判断为鹿血真品，使用第二限制性内切酶对PCR扩增片段进行酶切，根据酶切产物的大小判断鹿血为梅花鹿血或马鹿血；所述第二限制性内切酶的酶切位点为梅花鹿血的cytb片段中区别于马鹿血的cytb片段的酶切位点。2.根据权利要求1所述的鹿血鉴定方法，其特征在于，所述检测引物包括：cytbF，其核苷酸序列如SEQIDNO.1所示；cytbR，其核苷酸序列如SEQIDNO.2所示。3.根据权利要求1或2所述的鹿血鉴定方法，其特征在于，所述第一限制性内切酶为EcoRV，所述第二限制性内切酶为MseI。4.根据权利要求3所述的鹿血鉴定方法，其特征在于：当所述待测血液为鹿血真品，所述PCR扩增片段被所述EcoRV酶切后得到两个DNA片段；当所述待测血液为鹿血伪品，所述PCR扩增片段被所述EcoRV酶切后得到一个DNA片段；当所述待测血液为鹿血真伪混合品，所述PCR扩增片段被所述EcoRV酶切后得到三个DNA片段。5.根据权利要求3或4所述的鹿血鉴定方法，其特征在于...

【专利技术属性】
技术研发人员：任贵奇，陈媛媛，王凤霞，胡春兰，王春民，
申请(专利权)人：颈复康药业集团有限公司，
类型：发明
国别省市：河北,13