一种抗肿瘤转移的药物组合物及其应用制造技术

本发明专利技术涉及一种抗肿瘤转移的药物组合物及其应用，所述药物组合物包含抗凝药物和人参皂苷，所述抗凝药物和人参皂苷的物质的量比为1:18.9‑1:60.5，其中抗凝药物优选为华法林，人参皂苷优选为Rb1。本发明专利技术首次将抗凝药物（如华法林）与人参皂苷（如Rb1）联用，两者协同作用，抑制了癌细胞的粘附和迁移，为临床提供一种在治疗癌症患者静脉血栓栓塞症的同时，能使抗肿瘤转移药物的药效增强，为临床肿瘤患者的治疗提供新的策略。

Drug composition for resisting tumor metastasis and its application

The invention relates to an anti tumor drug composition and its application. The pharmaceutical composition includes anticoagulant drugs and ginsenosides, the ratio of the anticoagulant and ginsenoside is 1:18.9 1:60.5, in which anticoagulant is preferred as warfarin and ginsenoside is preferred to be Rb1. For the first time, the invention combines anticoagulant drugs (such as Hua Falin) and ginsenoside (such as Rb1), which synergistically inhibits the adhesion and migration of cancer cells, and provides a clinical therapy for the treatment of venous thromboembolism in cancer patients, which can enhance the efficacy of antitumor drugs and provide treatment for clinical cancer patients. For new strategies.

【技术实现步骤摘要】
一种抗肿瘤转移的药物组合物及其应用
本专利技术属于抗肿瘤药物领域，具体的，本专利技术涉及一种抗肿瘤转移的药物组合物及其应用。
技术介绍
肺癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一，已成为我国城市人口恶性肿瘤死亡原因的第1位。肺癌主要分两大类：一类是小细胞肺癌，另一类是非小细胞肺癌。在肺癌病例中，非小细胞肺癌的所占高达80%~85%，约75%的患者发现时已处于中晚期，5年生存率很低。因此，非小细胞肺癌已严重影响人类的生命健康。早在上世纪60年代，人们就意识到肿瘤患者容易迸发静脉血栓性疾病，约有15%的患者的恶性肿瘤患者会出现静脉血栓栓塞症，从而导致肿瘤患者的死亡增加。华法林（Warfarin）是目前临床上的主流香豆素类口服抗凝药物，可以用于治疗静脉血栓血栓症，同时它在心房颤动及心脏手术导致的血栓形成具有明显的抑制作用。人参（Ginseng）是我国的一种传统中药，为五加科植物人参PanaxginsengC.A.Mey.干燥根或根茎，具有大补元气、复脉固脱、补脾益肺与生津安神之功效，是我国最具保健价值的传统中药，更是术后病人的首选药物。人参化学成分复杂，生物活性广泛，研究证明人参总皂苷为其主要有效成分之一，具有多方面免疫调节作用，能从多方面改善并治疗心血管疾病。近年来有研究报道指出，人参皂苷有抗肿瘤的效果。其中Rb1可以诱导人结肠癌细胞SW480的凋亡；Rb1也可以抑制非小细胞肺癌A549的增殖。但Rb1是否可以抑制非小细胞肺癌A549的粘附和迁移尚未见相关报道，此外，将抗凝药物华法林和人参皂苷Rb1二者联用后是否能够协同抑制肿瘤细胞的迁移能力，该方面的研究目前国内外尚未见报道。
技术实现思路
本专利技术的目的在于针对现有技术不足，提供一种抗肿瘤转移的药物组合物及其应用。为实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：一种抗肿瘤转移的药物组合物，包含抗凝药物和人参皂苷，所述抗凝药物和人参皂苷的物质的量比为1:18.9-1:60.5。所述抗凝药物为口服抗凝药物和注射抗凝药物。所述口服抗凝药物为双香豆素、醋硝香豆素和华法林中任一种，优选为华法林；所述注射抗凝药物为普通肝素和低分子肝素中的任一种。所述的人参皂苷包括Rb1、Rb2、Rb3、Rh、Rh1、Rh2、Rh4、Ro、Rg、Rg1、Rg3、Rg5、Rg6、Rk1、Rk3、Ra1、Ra2、Ra3、Rs3、Rs4、Rs5、F4、F11、Rc、Re、Rd中的任一种，优选为Rb1。本专利技术首次将抗血栓药物华法林和人参皂苷Rb1联用，以非小细胞肺癌A549为对象，考察抗血栓药物与人参皂苷Rb1联用对非小细胞肺癌A549的粘附和迁移的作用。结果表明，华法林与Rb1在心血管疾病上虽然存在潜在的相互影响，但在肿瘤细胞内却发生了出乎意料的结果，即华法林与Rb1联合用药能够抑制非小细胞肺癌A549的粘附和迁移。该研究结果可为临床上肿瘤转移的早期预防及治疗提供新的思路。本专利技术的有益效果在于：本专利技术首次将抗血栓药物华法林和人参皂苷Rb1联用，两者协同作用，抑制了癌细胞的粘附和迁移，为临床提供一种在治疗癌症患者静脉血栓栓塞症的同时，能使抗肿瘤转移药物的药效增强，为临床肿瘤患者的治疗提供新的策略。附图说明图1Rb1对A549细胞存活率的影响；图2华法林对A549细胞存活率的影响；图3Rb1与华法林联合使用对A549细胞存活率的影响；图4Rb1、华法林单独或联合使用对A549细胞粘附能力的影响；图5Rb1、华法林单独或联合使用对A549细胞迁移能力的影响；图6Rb1、华法林单独或联合使用对肿瘤细胞表面粘附因子ICAM-1/VCAM-1蛋白表达的影响。具体实施方式根据下述实施例，可以更好地理解本专利技术，下面结合具体实施方式对本专利技术所述的技术方案作进一步的说明，但是本专利技术不仅限于此。实施例1取对数期的A549细胞，用胰酶消化后，细胞计数，配成8×104/ml的细胞浓度，将制得的细胞悬液，每孔100μl接种到96孔板，放于37℃、5%CO2培养箱中培养24h，将华法林分为0.5mg/mL、1mg/mL、1.5mg/mL、2mg/mL和2.5mg/mL5组；将Rb1分为25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L、200μmol/L和400μmol/L5组；联合用药按照浓度分为0.5mg/mL华法林联合25μmol/LRb1、1mg/mL华法林联合50μmol/LRb1、1.5mg/mL华法林联合100μmol/LRb1、2mg/mL华法林联合200μmol/LRb1和2.5mg/mL华法林联合400μmol/LRb15组，弃掉旧的培养基，加入配制好的含不同药物浓度的培养基继续培养24h，吸弃含药培养基，于每孔中加入100μL稀释好的MTT溶液（0.5mg/mlMTT的母液：无血清无酚红培养基=1:9），继续孵育4h后，终止培养；小心吸弃96孔板孔内上清液，每孔加入100μLDSMO，振荡10min，于570nm波长处在酶标仪上测定各孔光吸收值（OD值），计算细胞成活率（%）=（用药组平均OD值/空白对照组平均OD值）×100%。用GraphPadPrism软件进行数据处理，结果如图3所示。图1、图2为单独的Rb1或华法林对A549细胞存活率的影响，从图中可以看出，人参皂苷Rb1的低浓度并不能明显抑制A549细胞的增殖，只有在较高浓度才能显著抑制A549细胞的生长；低浓度的华法林也不能显著抑制A549细胞的生长，在较高浓度下才能显著抑制A549细胞的增殖。从图3可以看出，当人参皂苷Rb1与华法林联合用药时，两者在低浓度的情况下，就能显著抑制A549细胞增殖的能力，表明人参皂苷Rb1与华法林联合用药能够协同抑制A549细胞的增殖。实施例2取96孔板，每孔加入80μL的明胶溶液，于37℃，5%CO2的培养箱中过夜。将在孔中未凝结的明胶溶液弃掉，用PBS溶液清洗两次，加入1%BSA（V/V）溶液，在37℃，5%CO2的培养箱中封闭1h。将孔中的BSA溶液弃掉，用PBS溶液清洗两次。取对数生长期的A549细胞，用胰酶消化并配制成细胞浓度约为5×105/mL的细胞悬浮液，用细胞悬浮液配制成空白对照组、50μMRb1单独用药组、1mg/mL华法林单独用药组和50μMRb1+1mg/mL华法林联合用药组，100μL/孔加入到96孔板中。在37℃，5%CO2的培养箱中培养1h。用移液枪将未粘附的细胞及液体弃掉，用PBS清洗两次，加入100μL无血清无酚红的MTT溶液，在37℃，5%CO2的培养箱中培养4h。将MTT溶液弃掉，每孔加入100μL的DMSO并于摇床振荡10min使甲瓒完全溶解，用酶标仪检测每孔在570nm的吸光值（A570nm），结果如图4所示。从图4中可以看出，在非细胞毒性浓度人参皂苷Rb1或者华法林都能显著抑制A549细胞的基质粘附能力（显著性分别为P<0.05，P<0.01），当两者联用时，能够协同抑制A549细胞的基质粘附能力明显增强（P<0.001）。实施例3取对数生长期的A549细胞，胰蛋白酶消化并调整细胞浓度为2×105/ml，以2ml/孔接种于6孔板中，置于37℃、5%CO2的培养箱中培养12h，细胞单层铺满孔板时；用10μL的枪头划“一”字形划痕，PBS本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种抗肿瘤转移的药物组合物，其特征在于：所述药物组合物包含抗凝药物和人参皂苷，所述抗凝药物和人参皂苷的物质的量比为1:18.9‑1:60.5。

【技术特征摘要】
1.一种抗肿瘤转移的药物组合物，其特征在于：所述药物组合物包含抗凝药物和人参皂苷，所述抗凝药物和人参皂苷的物质的量比为1:18.9-1:60.5。2.根据权利要求1所述的抗肿瘤转移的药物组合物，其特征在于：所述抗凝药物为口服抗凝药物和注射抗凝药物。3.根据权利要求2所述的抗肿瘤转移的药物组合物，其特征在于：所述口服抗凝药物为双香豆素、醋硝香豆素和华法林中任一种；所述注射抗凝药物为普通肝素和低分子肝素中的任一种。4.根据权利要求3所述的抗肿瘤转移的药物组合物，其特征在...

【专利技术属性】
技术研发人员：邵敬伟，范露露，郭燕，沈志春，
申请(专利权)人：福州大学，
类型：发明
国别省市：福建,35