猪血中提纯杀菌性/通透性增加蛋白的方法技术

本发明专利技术涉及一种从猪血中提取纯化杀菌性／通透性增加蛋白（简秒ＢＰＩ）的方法。该法为首先将猪血中纯化的ＰＭＮＬ采用冷冻法制取ＢＰＩ粗提液；再以大肠杆菌作为结合菌进行孵育、离心得到结合菌体；然后从结合菌体中分离出蛋白质；最后进行透析，离心得纯化ＢＰＩ。该法采用的设备简单，条件易控制，耗时短，污染度低，成本低，而且该法获得的ＢＰＩ经测试其纯化倍数及纯度已能满足临床需求，为其临床应用奠定了基础。（*该技术在2016年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种蛋白质的提取纯化方法，尤其是一种从猪血中提取纯化杀菌性/通透性增加蛋白(简称BPI)的方法。已知BPI是一种存在于人及兔等哺乳动物中性粒细胞(简称PMNL)中的阳性蛋白质，是一种强有力的杀菌物质，具有特异杀灭革兰氏阴性菌及中和内毒素的活性，因此，人们欲从人及兔的PMNL中提取BPI，以期应用于临床，然而传统的BPI提纯方法为1.将人或兔的纯化PMNL采用研磨法破坏细胞膜，并用0.16N硫酸抽提得粗提液；2.将粗提液经过三次柱层析即葡聚糖G-75或G-50、葡聚糖C-50和葡聚糖G-100得到纯化的BPI。这种提取纯化法存在有不足之处1.原料资源匮乏，不易得；2.采用研磨法破坏细胞膜，污染度高；3.经过三次柱层析，工作量大，设备条件要求高且不易控制，耗时长达1-2周。由于上述原因，使其成本高，不易得，阻碍了它的价值发挥。本专利技术的目的在于提供一种简单、快捷、经济的BPI的提取纯化法。经研究发现，猪血的PMNL中存在有BPI，它是一带正电荷的蛋白质，它与G-菌外膜的内毒素带负电荷部分有很高的亲和力，这种亲和力大大超过与其他物质的亲和力，而且这种结合中的BPI可被本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种猪血中提纯杀菌性／通透性增加蛋白的方法，其特征在于：首先将猪血中纯化的ＰＭＮＬ采用冷冻法制取ＢＰＩ粗提液；再以大肠杆菌作为结合菌进行孵育、离心得到结合菌体；然后从结合菌体中分离出蛋白质；最后进行透析，离心得纯化ＢＰＩ。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：周红，
申请(专利权)人：周红，
类型：发明
国别省市：85[中国|重庆]