一种新的多肽——过氧化氢氧化还原酶9和编码这种多肽的多核苷酸制造技术

本发明专利技术公开了一种新的多肽－过氧化氢氧化还原酶９，编码此多肽的多核苷酸和经ＤＮＡ重组技术产生这种多肽的方法。本发明专利技术还公开了此多肽用于治疗多种疾病的方法，如恶性肿瘤，血液病，ＨＩＶ感染和免疫性疾病和各类炎症等。本发明专利技术还公开了抗此多肽的拮抗剂及其治疗作用。本发明专利技术还公开了编码这种新的过氧化氢氧化还原酶９的多核苷酸的用途。（*该技术在2020年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物
，具体地说，本专利技术描述了一种新的多肽--过氧化氢氧化还原酶9，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本专利技术还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。过氧化氢具有杀伤微生物，净化，漂白以及消毒活性，它被作为贴眼透镜的消毒剂，织物的漂白剂以及合法的食品添加剂等广泛使用。然而，过氧化氢可能会产生具高度反应性的自由氧，它强烈的氧化效应将致使蛋白变性。过氧化氢氧化还原酶是一种存在于所有需氧细胞中的酶类，它分解过氧化氢为分子氧及水，即催化两分子的过氧化氢氧化为一分子的氧并还原为两分子的水。它主要的功能是保护细胞免受过氧化氢的毒性作用。在真核生物及一些原核生物中它由四个相同的亚基构成。每个亚基与一个(正铁)血红素Ⅸ基团结合。其中一个保守的酪氨酸是近端的血红素结合配体，作为血红素近极面配体作用，含有这个残基及其周围氨基酸的区域构成了第一个特征序列模板R--F--Y-x-D--,Y，其中含有一个保守的精氨酸残基，它参与血红素结合。第二个特征序列模板中含有一个保守的活性位点残基，组氨酸残基，它对于酶的催化机制较为重要-x--x(4)--R-x(2)-H-x(2)---(Murthy M.R.N.,Reid T.J.Ⅲ,Sicignano A.,Tanaka N.,Rossmann M.G.,J.Mol.Biol.152:465-499(1981)；Melik-Adamyan W.R.,Barynin V.V.,Vagin A.A.,BorisovV.V.,Vainshtein B.K.,Fita I.,Murthy M.R.N.,Rossmann M.G.,J.Mol.Biol.188:63-72(1986)；von Ossowki I.,Hausner G.,Loewen P.C.,J.Mol.Evol.37:71-76(1993))。有研究发现，放疗时，过氧化氢氧化还原酶增强肿瘤细胞损伤并使正常细胞免受辐射损伤，此外有一种输卵管过氧化氢氧化还原酶与精子膜外表面结合，因而可用来保护或保存精子，人工授精以及诊断男性或女性不育。本专利技术的多肽具有上述特征序列模板，且与过氧化氢氧化还原酶家族成员有相似的生物学功能，故而被认为是该家族的新成员，命名为过氧化氢氧化还原酶。该多肽及其激动剂，抑制剂，拮抗剂可用于诊断及防治与过氧化氢氧化还原有关的疾病，有助于诸如纤维肉瘤等肿瘤的治疗并可用来保护或保存精子，人工授精以及诊断男性或女性不育。由于如上所述过氧化氢氧化还原酶9蛋白在机体内重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的过氧化氢氧化还原酶9蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新过氧化氢氧化还原酶9蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。本专利技术的一个目的是提供分离的新的多肽--过氧化氢氧化还原酶9以及其片段、类似物和衍生物。本专利技术的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。本专利技术的另一个目的是提供含有编码过氧化氢氧化还原酶9的多核苷酸的重组载体。本专利技术的另一个目的是提供含有编码过氧化氢氧化还原酶9的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。本专利技术的另一个目的是提供生产过氧化氢氧化还原酶9的方法。本专利技术的另一个目的是提供针对本专利技术的多肽--过氧化氢氧化还原酶9的抗体。本专利技术的另一个目的是提供了针对本专利技术多肽--过氧化氢氧化还原酶9的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。本专利技术的另一个目的是提供诊断治疗与过氧化氢氧化还原酶9异常相关的疾病的方法。本专利技术涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。本专利技术还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种(a)具有SEQ ID NO:1中221-466位的序列；和(b)具有SEQ ID NO:1中1-2107位的序列。本专利技术另外涉及一种含有本专利技术多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本专利技术多肽的方法。本专利技术还涉及一种能与本专利技术多肽特异性结合的抗体。本专利技术还涉及一种筛选的模拟、激活、拮抗或抑制过氧化氢氧化还原酶9蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本专利技术的多肽。本专利技术还涉及用该方法获得的化合物。本专利技术还涉及一种体外检测与过氧化氢氧化还原酶9蛋白异常表达相关的疾病或疾病易感性的方法，包括检测生物样品中所述多肽或其编码多核苷酸序列中的突变，或者检测生物样品中本专利技术多肽的量或生物活性。本专利技术也涉及一种药物组合物，它含有本专利技术多肽或其模拟物、激活剂、拮抗剂或抑制剂以及药学上可接受的载体。本专利技术还涉及本专利技术的多肽和/或多核苷酸在制备用于治疗癌症、发育性疾病或免疫性疾病或其它由于过氧化氢氧化还原酶9表达异常所引起疾病的药物的用途。本专利技术的其它方面由于本文的技术的公开，对本领域的技术人员而言是显而易见的。本说明书和权利要求书中使用的下列术语除非特别说明具有如下的含义“核酸序列”是指寡核苷酸、核苷酸或多核苷酸及其片段或部分，也可以指基因组或合成的DNA或RNA，它们可以是单链或双链的，代表有义链或反义链。类似地，术语“氨基酸序列”是指寡肽、肽、多肽或蛋白质序列及其片段或部分。当本专利技术中的“氨基酸序列”涉及一种天然存在的蛋白质分子的氨基酸序列时，这种“多肽”或“蛋白质”不意味着将氨基酸序列限制为与所述蛋白质分子相关的完整的天然氨基酸。蛋白质或多核苷酸“变体”是指一种具有一个或多个氨基酸或核苷酸改变的氨基酸序列或编码它的多核苷酸序列。所述改变可包括氨基酸序列或核苷酸序列中氨基酸或核苷酸的缺失、插入或替换。变体可具有“保守性”改变，其中替换的氨基酸具有与原氨基酸相类似的结构或化学性质，如用亮氨酸替换异亮氨酸。变体也可具有非保守性改变，如用色氨酸替换甘氨酸。“缺失”是指在氨基酸序列或核苷酸序列中一个或多个氨基酸或核苷酸的缺失。“插入”或“添加”是指在氨基酸序列或核苷酸序列中的改变导致与天然存在的分子相比，一个或多个氨基酸或核苷酸的增加。“替换”是指由不同的氨基酸或核苷酸替换一个或多个氨基酸或核苷酸。“生物活性”是指具有天然分子的结构、调控或生物化学功能的蛋白质。类似地，术语“免疫学活性”是指天然的、重组的或合成蛋白质及其片段在合适的动物或细胞中诱导特定免疫反应以及与特异性抗体结合的能力。“激动剂”是指当与过氧化氢氧化还原酶9结合时，一种可引起该蛋白质改变从而调节该蛋白质活性的分子。激动剂可以包括蛋白质、核酸、碳水化合物或任何其它可结合过氧化氢氧化还原酶9的分子。“拮抗剂”或“抑制物”是指当与过氧化氢氧化还原酶9结合时，一种可封闭或调节过氧化氢氧化还原酶9的生物学活性或免疫学本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分离的多肽－过氧化氢氧化还原酶９，其特征在于它包含有：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２所示的氨基酸序列的多肽、或其多肽的活性片段、类似物或衍生物。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：毛裕民，谢毅，
申请(专利权)人：上海博德基因开发有限公司，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]