【技术实现步骤摘要】
【技术保护点】
一种建立ＡｐｏＡⅠ细胞靶标筛药系统的技术分案，其特征在于：Ⅰ 人基因组ＤＮＡ的提取１）取抗凝血２ｍｌ，用２倍的生理盐水稀释混匀，２）在离心管中加入２ｍｌ淋巴细胞分离液，在液面上轻轻加入４ｍｌ已稀释混匀的血液，室温下离心２００ｇ２ ０分钟，（注：此时红细胞沉于管底，白色的淋巴细胞及其它有核细胞分布于上层血浆与下层淋巴细胞分离液的界面），３）吸弃上清，小心吸出中间有核细胞层，转入１．５ｍｌ Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ管中，用生理盐水洗涤１次，４）将细胞悬浮于ＴＥ缓冲液中 ，加ＳＤＳ至终浓度为０．５％，蛋白酶Ｋ至终浓度为２００μｇ／ｍｌ，５０℃水浴３小时，其间振摇２－３次，５）加入等体积平衡酚混匀，室温离心，１００００ｇ离心５分钟，６）小心吸取上清，并转移至另一Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ管，勿将蛋白层吸出， ７）加入等体积氯仿：异戊醇（２４∶１），混匀，离心１００００ｇ，５分钟，８）转移上清至另一Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ管中，加入１／１０体积乙酸钠（ＰＨ５．２）和２．５倍体积的无水乙醇，混匀，－８０℃放置３０分钟，９）离心１２０００ｇ，１５ ...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：龚邦强，陆浩钧，
申请(专利权)人：上海医药集团总公司，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]
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