单核苷酸多态性（SNPs）及点突变的检测方法技术

一种以利用聚合酶之链延伸为基础而将核酸内之单核苷酸多态性（ＳＮＰ）与点突变作基因分型的方法。本发明专利技术是根据下列事实：紧邻在任何一个ＳＮＰ／点突变位置之５′端的核苷是已知的，且紧接于该位置之３′端的相邻序列也是已知的。一个互补于紧邻在靶多核苷酸内ＳＮＰ３′侧之序列的引物被用于链延伸。聚合酶反应混合物包含有一个链终止核苷酸，该链终止核苷酸所具的碱基互补于紧邻该靶多核苷酸之ＳＮＰ５′侧的核苷酸。可加入一个额外的ｄＮＴＰ以产生一个最多有两个碱基延伸的引物。对引物的链延伸长度或者从终止核苷酸标记了的形式渗入的标记量，以所形成的延长／终止反应产物来分析。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种检测靶核苷酸的方法，在核酸分子中有一个３’末端和一个５’末端，而该靶核苷酸是位于此核酸分子的３’末端和５’末端之间，该方法包含：　　　　（ａ）在众多的反应容器内将寡核苷酸引物与核酸分子混合，在其中寡核苷酸引物有一个自由氢氧基部分在紧邻靶核苷酸３’端的核酸分子上杂交成一互补序列；　　　　（ｂ）供给每一容器相应的链终止核苷酸，在其中紧接靶核苷酸５’端的一个相邻核苷酸与相应的链终止核苷酸互补；　　　　（ｃ）加入独特的链延伸核苷酸至每一反应容器中，在其中每一反应容器有相同的相应链终止核苷酸，但独特的链延伸核苷酸在每一反应容器中则不相同；　　　　（ｄ）寡核苷酸引物延伸是通过加入聚合酶反应混合物到每一反应容器中，并取决于模板；　　　　（ｅ）检测渗入到延伸引物的核苷酸，在其中靶核苷酸本体取决于延伸引物的大小。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：薛红，王子晖，
申请(专利权)人：华晶基因技术有限公司，
类型：发明
国别省市：HK[中国|香港]