用于检测梨火疫病菌的一步双重PCR方法技术

本发明专利技术用于检测梨火疫病菌的一步双重ＰＣＲ方法，适用于检测梨火疫病菌。属于农作物病害防治和植物检疫技术领域。该方法根据梨火疫病菌的ｐＥＡ２９质粒和基因组ａｍｓ基因序列，设计二对特异性引物，在同一反应体系中同时检测梨火疫病菌，扩增产物大小分别为１．０ｋｂ和１．５ｋｂ，这两对引物的检测灵敏度达到了３个细菌细胞。是对梨火疫病菌ｐＥＡ２９质粒特异性引物检测方法的补充和改进。对于不含有ｐＥＡ２９质粒的梨火疫病菌菌株也可以进行检测。同时，本方法采用双重ＰＣＲ技术，二对引物在同一反应体系中同时扩增，提高了检测的准确性，节约了检测时间，可以试剂盒的形式在我国口岸大规模推广。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
包括梨火疫病菌特异性检测引物两对，ｐｒｉｍｅｒＡ／Ｂ和ｐｒｉｍｉｅｒＥ／Ｆ，其引物序列为：ＰｒｉｍｅｒＡ：５’－ＣＧＧＴＴＴＴＴＡＡＣＧＣＴＧＧＧ－３’ＰｒｉｍｅｒＢ：５’－ＧＧＧＣＡＡＡＴＡＣＴＣＧＧＡＴＴ －３’ＰｒｉｍｅｒＥ：５’－ＡＡＴＡＡＧＧＴＧＣＣＴＧＧＴＡＡＴＧ－３’ＰｒｉｍｅｒＦ：５’－ＧＧＴＧＧＡＡＴＧＡＧＡＣＴＧＧＧＴＡ－３’其中ｐｒｉｍｅｒＡ／Ｂ引物对在梨火疫病菌中特异性扩增出１．０ｋｂ的 产物，ｐｒｉｍｅｒＥ／Ｆ引物对在梨火疫病菌中特异性扩增出１．５ｋｂ的产物。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：冯洁，许景升，徐进，何礼远，张争，张杨，
申请(专利权)人：中国农业科学院植物保护研究所，
类型：发明
国别省市：11[中国|北京]