本发明专利技术公开了一种利用单核苷酸多态性预测绵羊窝平均产羔数的方法。本发明专利技术所提供的利用单核苷酸多态性预测绵羊窝平均产羔数的方法，是用由具有序列表中ＳＥＱ ＩＤ №：１和ＳＥＱ ＩＤ №：２的核苷酸序列组成的一对引物对待测绵羊的ＤＮＡ进行ＰＣＲ扩增，然后对ＰＣＲ扩增产物进行单核苷酸多态性检测，确定自序列表中ＳＥＱ ＩＤ №：３的５′端第８４位碱基为Ｔ还是Ｃ，第１７４位碱基为Ｔ还是Ｇ。本发明专利技术的研究结果表明ＰＲＬＲ基因可能是控制绵羊多胎性能的一个主效基因或与之存在紧密的遗传连锁，为绵羊高繁殖力的标记辅助选择和育种提供了理论和实践基础，能够大大缩短育种周期，提高育种效率，并且将给绵羊生产者带来可观的经济效益。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物工程领域中一种。
技术介绍
催乳素(prolactin，PRL)又称促乳素或生乳素，是繁殖成功所必需的垂体前叶肽类激素。催乳素受体(prolactin receptor，PRLR)与生长激素受体(growth hormonereceptor，GHR)、胎盘催乳素受体(placental lactogen receptor，PLR)构成一个基因家族，该基因家族可能由某一共同祖先基因进化而来(Boutin J M，JolicoeurC，Okamura H，et al.Cloning and expression of the rat prolactin receptor，amember of the growth hormone/prolactin receptor gene family.Cell，1988，5369-77)。通过鹿、牛、人的基因图谱比较，发现催乳素受体基因是细胞因子受体超家族(cytokine receptor superfamily)的一员。催乳素受体家族成员与Jak家族成员紧密相连。这类受体蛋白有一种共同的功能，即通过与配体的结合引发各种不同的胞内反应。研究表明，PRL受体结构具有多样性。受体结构的多样性主要由胞内域的变异造成。已知哺乳动物中PRL至少有2种形式的受体存在，即长型受体(long form)和短型受体(short form)。PRL受体为仅含有1个跨膜区域的跨膜蛋白，由膜外域、跨膜域和胞内域3部分组成，具有细胞因子受体超家族的结构特征。哺乳动物和禽类PRL受体结构的不同之处在于哺乳动物只有1个胞外配体结合区，而禽类则具有2个重复单位的配体结合区。Boutin等最先从大鼠中克隆了短型PRLR cDNA，该cDNA为1635bp，只有一个开放阅读框，可编码310个氨基酸(Boutin JM，Jolicoeur C，Okamura H，et al.Cloningand expression of the rat prolactin receptor，a member of the growthhormone/prolactin receptor gene family.Cell，1988，5369-77)。随后Shirota等从大鼠的卵巢中克隆了含2132bp的长型PRLR cDNA(Shirota M，Banville D，Ali S.Expression of two forms of PRL receptor in rat ovary and liver.MolEndocrinol，1990，41136-1143)。Moore等又从小鼠的乳腺中分离了编码长型PRLR的cDNA，其长度为1992bp，与大鼠、兔长型PRLR的同源性分别为91％和72％；另外通过分析发现小鼠长型PRLR胞内域的中部区即384-524个氨基酸是最保守的；PRLRcDNA 3′非翻译区没有聚腺苷酸化共有序列(AATAAA)，这与报道的大鼠卵巢和牛PRLRcDNA序列相一致(Moore R C，Oka T.Cloning and sequencing of the cDNA encodingthe murine mammary gland long-form prolact in receptor.Gene，1993，134263-265)。Tortonese等报道在绵羊垂体腺中检出PRLR mRNA，同时通过RT-PCR扩增得到的cDNA核苷酸序列与牛的PRLR cDNA序列有高达95.6％的同源性(Tortonese D J，BrooksJ，Ingleton P M，et al.Detection of prolactin receptor gene expression inthe sheep pituitary gland and visualization of the specific translation ofthe signal in gonadotrophs.Endocrinology，1998，139(12)5215-5223)。此外，还应用RT-PCR扩增特定形式的长型PRLR分离得到了2个cDNA，其中有一个胞内域有39bp的插入片段。这个片段与Anthony等在绵羊胎儿肝脏和成年羊黄体组织中发现的插入片段是相同的；插入位点与牛PRLR的第263个氨基酸是相对应的(Anthony R V，Smith G W，Duong A，et al.Two forms of the prolactin receptormessenger ribonucleic acid are present in ovine fetal liver and adult ovary.Endocrine，1995，3291-295)。最近，公布了绵羊PRLR cDNA的全长编码序列，短型和长型两种PRLR分别对应272和557个氨基酸，而且进一步证实了短型PRLR cDNA有39bp的插入片段，同时基因组分析表明这个片段的存在或缺失是造成共同转录物交替剪接的原因，并不是由于存在不同的基因。催乳素的主要作用是促进乳腺发育和泌乳，通过增加基因转录及mRNA的半衰期，其能刺激乳蛋白基因的表达(Bole-Feysot C，Goffin V，Edery M，Binart N，KellyP A.Prolactin(PRL)and its receptoractions，signal transduction pathwaysand phenotypes observed in PRL receptor knockout mice.Endocrine Reviews，1998，19(3)225-268)。其功能是通过与位于质膜和一些组织中的特定高度亲和性受体相结合而引发的。PRLR基因在哺乳动物的乳腺、黄体、卵巢、睾丸、前列腺、肝脏等多种组织中表达，在不同的动物表达的主要组织器官并不一样。Shiu等最早在乳腺组织中发现了PRLR(Shiu R P C，Kelly P A，Friesen H G.Radioreceptor assay forprolactin and other lactogenic hormones.Science，1973，180968-971)，Posner等发现PRLR也大量分布在其它一些组织中(Posner B I，Kelly PA，Shiu R P C，et al.Studies of insulin，growth hormone and prolactin bindingtissuedistribution，species variation and characterization.Endocrinology，1974，95521-531)。Arden等首先通过Southern杂交将PRLR基因定位于人的第5号染色体的短臂上，又通过染色体原位杂交将其进一步定位于5p13-p14，同时数据库信息表明人和兔的PRLR序列与猪的PRLR序列有较高的同源性，同源性分别为74％和67％；此外Barker等还将大鼠的PRLR基因定位于第2号染色体，小鼠的PRL本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种利用单核苷酸多态性预测绵羊窝平均产羔数的方法，是用由具有序列表中ＳＥＱＩＤ№：１和ＳＥＱＩＤ№：２的核苷酸序列组成的一对引物对待测绵羊的ＤＮＡ进行ＰＣＲ扩增，然后对ＰＣＲ扩增产物进行单核苷酸多态性检测，确定自序列表中ＳＥ ＱＩＤ№：３的５′端第８４位碱基为Ｔ还是Ｃ，第１７４位碱基为Ｔ还是Ｇ。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：储明星，牟玉莲，孙少华，
申请(专利权)人：中国农业科学院畜牧研究所，
类型：发明
国别省市：11[中国|北京]
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