细胞内筛选抗乙型肝炎病毒药物的方法技术

技术编号:1754734 阅读:274 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术涉及一种乙型肝炎病毒药物的筛选方法,具体地说是一种细胞内筛选抗乙型肝炎病毒药物的方法。它是基于HepG↓[2]细胞内乙肝病毒基因组瞬时表达细胞模型或稳定表达的细胞系HepG↓[2]2.2.15细胞,以HBV  fxRNA、trxRNA和HBcAg为药效评价指标,以相应的引物和竞争子对实验组和对照组HBV  fxRNA、HBV  trxRNA定量分析,以ECL技术分析HBcAg并以它们为药效评价指标来筛选抗乙肝病毒药物。本发明专利技术对HBV生命周期的前期阶段RNA的复制有抑制作用,能够有效的抑制HBV复制。采用本发明专利技术方法可以比较简便、有效和经济地大量初筛抗乙肝病毒(HBV)药物。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种细胞内筛选抗乙型肝炎病毒药物的方法,其特征是:它是基于HepG↓[2]细胞内乙肝病毒基因组瞬时表达细胞模型,以HBVfxRNA、trxRNA和HBcAg为药效评价指标,以相应的引物和竞争子对实验组和对照组HBVfxRNA、HBVtrxRNA定量分析,以ECL技术分析HBcAg并以它们为药效评价指标来筛选抗乙肝病毒药物,其具体步骤如下:(1)乙肝病毒全基因和CN基因以磷酸钙共转染HepG↓[2]细胞,并设加药物共同转染的实验组和不加药物转染的对照组;(2)转染后培养细胞4天,收获细胞,提取细胞内总RNA和蛋白质;(3)将总RNA逆转录为cDNA,与相应的竞争子作竞争聚合酶链反应,从而对实验组...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:方志正刘汉平
申请(专利权)人:武汉生物制品研究所
类型:发明
国别省市:83[中国|武汉]

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