水中粪大肠菌群快检纸片制造技术

本发明专利技术“水中粪大肠菌群快检纸片”，是一种专门用于快速检测水中粪大肠菌群的鉴定试剂。通过对主要成分及其用量的合理配伍，加入抑菌剂，减少生物干扰，科学的工艺制备方法和适宜的包装形成商品化产品；在使用中提高培养温度到４４．５℃，以与其它大肠菌群细菌相鉴别。该试剂及其实际检测成本低廉，操作简捷快速，使试管法的发酵培养和证实试验简化到一步即可完成；其方法敏感性好、特异性强、干扰因素少、结果准确，与国标方法符合率高，可使水中粪大肠菌群的检测达到定量分析。本产品有５５．５ｍＬ、５．５５ｍＬ和５０ｍＬ三种规格，适用于饮用水、纯净水、矿泉水、水源水、地表水、废水、污水等各种水样中粪大肠菌群的快速检测。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种水中粪大肠菌群快速检测纸片(简称粪大肠菌群快检纸片)，是一种专门用于水中快速检测粪大肠菌群的鉴定试剂。其主要成分是蛋白胨、氯化钠、磷酸氢二钾、乳糖、琼脂、胆盐、硫代硫酸钠、40g/L溴甲酚紫溶液、20g/LTTC溶液、蒸馏水，按比例混合后经灭菌浸渍于层析滤纸上，在无菌条件下恒温烘干，规格1每份包括5袋吸附10mL水样的大纸片(11×11cm2的2×5张)和10袋吸附1mL水样小纸片(5×5cm2的10张)。规格215袋吸附1mL水样小纸片(5×5cm2的15张)。规格3每份5袋吸附10mL水样的大纸片(11×11cm2的2×5张)。分别装于五联的聚丙烯塑膜袋内，再密封于铝箔袋内，10℃以下保存备用。水中粪大肠菌群快检纸片可用于饮用水、饮用纯净水、饮用矿泉水、水源水、地表水、废水、污水等水中粪大肠菌群的检测。
技术介绍
粪大肠菌群是人畜粪便中的主要细菌，用来作为反映水体是否被粪便污染或污染程度的指示菌。粪大肠菌群数的高低，表明了水质被粪便污染的程度，以此作为粪便污染指标来评价被测水体的卫生质量，推断水中有否污染肠道致病菌的可能，比用大肠菌群数更有价值。目前粪大肠菌本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种水中粪大肠菌群快检纸片，是以乳糖蛋白胨培养基为基础液，硫代硫酸钠为中和剂，胆盐为抑菌剂，溴甲酚紫、ＴＴＣ为指示剂，层析滤纸为载体，经一系列溶解、校正ｐＨ、高温灭菌、加指示剂、浸渍纸片、恒温烘干、无菌包装等工艺流程而制成的一种专业的大肠菌群快检纸片。其特征在于具有如下配方（组分及其每升含量）：蛋白胨２０～３０ｇ；氯化钠３～５ｇ；磷酸氢二钾（Ｋ↓［２］ＨＰＯ↓［４］.３Ｈ↓［２］Ｏ）８～１２ｇ；乳糖１５～２０ｇ；琼脂１～２ｇ；胆盐１～２ｇ；硫代硫酸钠３～５ｇ；４０ｇ／Ｌ溴甲酚紫酒精溶液４～５ｍＬ；２０ｇ／Ｌ红四氮唑（ＴＴＣ）溶液５～７ｍＬ；蒸馏水１０００ｍＬ。

【技术特征摘要】
1一种水中粪大肠菌群快检纸片，是以乳糖蛋白胨培养基为基础液，硫代硫酸钠为中和剂，胆盐为抑菌剂，溴甲酚紫、TTC为指示剂，层析滤纸为载体，经一系列溶解、校下pH、高温灭菌、加指示剂、浸渍纸片、恒温烘干、无菌包装等工艺流程而制成的一种专业的大肠菌群快检纸片。其特征在于具有如下配方(组分及其每升含量)蛋白胨20～30g；氯化钠3～5g；磷酸氢二钾(K2HPO4·3H2O)8～12g；乳糖15～20g；琼脂1～2g；胆盐1～2g；硫代硫酸钠3～5g；40g/L溴甲酚紫酒精溶液4～5mL；20g/L红四氮唑(TTC)溶液5～7mL；蒸馏水1000mL。2根据权利要求1所述水中粪大肠菌群快检纸片的制备方法，其特征在于具有如下的步骤2.1载体纸片将新华层析滤纸，切成5cm×5cm和11cm×11cm规格，经干烤或高压灭菌(高压后于45℃温箱烘干)后备用；2.2内包装袋将耐高温的聚丙烯塑料薄膜袋，按实验要求压合成一定规格的5联袋，其中一种规格为6.5×9cm，一种规格为12.5×19cm，100℃15min蒸汽灭菌后于45℃烘干备用。2.3制备培养基将蛋白胨、氯化钠、磷酸氢二钾、乳糖、琼脂、胆盐、硫代硫酸钠、蒸馏水按比例混合加热溶解，冷后调pH7.0～7.4，再按量加入40g/L溴甲酚紫溶液，混匀，115℃15min高压灭菌，冷至60℃左右按量加入过滤除菌的20g/L TTC溶液，混匀。2.4浸渍纸片将空白纸片排放于灭菌的深搪瓷盘内，加入40℃左右的培养基使之淹没纸片，浸泡数分钟，使培养基充分吸附于纸片，挤去多余的培养基，摆放于无菌不锈钢丝网上，45℃恒温室烘干。2.5包装将浸渍烘干的纸片，无菌操作装入无菌的塑膜袋内，其中1套12.5×19cm的5联袋装11cm×11cm的纸片，每袋2张，2套6.5×9cm的5联袋装5cm×5cm的纸片，每袋1张，再装入铝铂袋，封口后10℃以下保存备用。3水中粪大肠菌群快检纸片有三种规格及其适应范围包装规格□5.55mL水样每份15袋小纸片，每包1份。适合污染较严重，估计粪大肠菌群含量较多的水样□55.5mL水样每份5袋大纸片和10袋小纸片，每包2份。适合较清洁，估计粪大肠菌群含量较少的水样。□50m1水样每份5袋大纸片，每包2份。适合经处理的水样，如应用水。4水中粪大肠菌群快检纸片使用方法4.1样品采集与处理水样至少取200mL，使用前应充分混匀。酸性或碱性水样需调pH至中性。必要时用50g/L硫代硫酸钠溶液中和余氯。4.2样品稀释接种1.0ml以下的水样时，必须做10倍递增的稀释后，再取1ml接种...

【专利技术属性】
技术研发人员：马乐好，阚方琦，崔树玉，
申请(专利权)人：山东省疾病预防控制中心，
类型：发明
国别省市：88[中国|济南]