一种快速检测水体中的大肠杆菌浓度的方法，其特征在于，具体操作步骤： 第一步：ＩｒＯ↓［２］－Ｐｄ修饰电极的制备 将玻碳电极用平均粒径为０．０５μｍ的氧化铝粉末抛光，用二次蒸馏水冲洗，依次在丙酮、硝酸溶液、ＮａＯＨ溶液和二次蒸馏水中超声清洗，硝酸溶液中，硝酸与水的体积比为１∶１，ＮａＯＨ溶液中，ＮａＯＨ与水的重量比为１∶１，以玻碳电极为工作电极，饱和甘汞电极，即ＳＣＥ电极为参比电极，铂丝电极为辅助电极，采用ＣＨＩ８３２型电化学系统对玻碳电极进行修饰，修饰液为ＩｒＣｌ↓［３］、ＰｄＣｌ↓［２］、Ｎａ↓［２］ＳＯ↓［４］和水的混合液，容量为５０ｍＬ，在该修饰液中，ＩｒＣｌ↓［３］、ＰｄＣｌ↓［２］和Ｎａ↓［２］ＳＯ↓［４］的含量分别为０．００５～０．０１５ｍｍｏｌ、０．００２５～０．０１ｍｍｏｌ和０．００５～０．０１５ｍｍｏｌ，余量为水，以０．０５～０．１５Ｖ／ｓ的扫速在－０．３Ｖ～＋０．９Ｖ的电压范围内循环扫描１５～４５圈，取出经修饰处理的玻碳电极，用二次蒸馏水清洗，得ＩｒＯ↓［２］－Ｐｄ修饰电极，待用； 第二步：大肠杆菌的培养 将ＬＢ培养液分别注入多个培养瓶，每瓶的注入量为１０ｍＬ，ＬＢ培养液为蛋白胨、氯化钠、酵母粉和水的混合液，蛋白胨∶氯化钠∶酵母粉∶水的重量比为１∶０．５∶０．５∶９８，向所述的培养瓶分别加入不同已知数量的大肠杆菌，得多份不同已知浓度的大肠杆菌溶液，向每个培养瓶加入１．０～３．０ｍｇ的异丙基β－Ｄ－硫代半乳糖苷，３０～４５℃下振荡培养１～３小时，向每个培养瓶加入０．１ｍｇ的多粘菌素Ｂ九肽和０．２５ｍｇ溶菌酶，２０～４０℃下振荡２０～４０分钟，再向每个培养瓶加入６．０～１０．０ｍｇ的４－氨基酚β－Ｄ－吡喃半乳糖，４０～５０℃下水浴培养１５～４０分钟，离心分离，得多份含４－氨基酚的上层清液，待用； 第三步：确定大肠杆菌浓度与ＩｒＯ↓［２］－Ｐｄ修饰电极响应电流的依从关系 流动注射分析快速检测大肠杆菌浓度，以ＩｒＯ↓［２］－Ｐｄ修饰电极、饱和甘汞电极和Ａｇ／ＡｇＣｌ电极分别为工作电极、参比电极和辅助电极，流动相为ｐＨ６．０～８．０的磷酸缓冲溶液，其中１０～３０％的体积为甲醇，流速为０．６～１．０ｍＬ／ｍｉｎ，待基线电流稳定后，将第二步获得的多份含４－氨基酚的上层清液逐一进样，记下每个进样时ＩｒＯ↓［２］－Ｐｄ修饰电极的响应电流的电流值，将全部进样的每一个及其对应响应电流的电流值所对应的坐标点描绘在直角坐标纸上，直角坐标的两个坐标中的一个为ＩｒＯ↓［２］－Ｐｄ修饰电极的响应电流的电流值，直角坐标的两个坐标中的另一个为大肠杆菌浓度，逐点连接直角坐标纸上的所有坐标点，得到响应电流－大肠杆菌浓度曲线，该曲线为一直线，确定大肠杆菌浓度与ＩｒＯ↓［２］－Ｐｄ修饰电极响应电流的依从关系为线性关系； 第四步：大肠杆菌浓度的快速检测 利用第三步确立的响应电流－大肠杆菌浓度的线性关系，快速检测水体中的大肠杆菌浓度，操作步骤：１）量取待测水体样品１０ｍＬ，过滤除去其中的悬浮固体杂质，离心沉淀其中的细菌；２）将离心得到的细菌用１０ｍＬ上述的ＬＢ培养液稀释；３）按上述的第二步进行操作，得到一份由待测水体样品形成的含４－氨基酚的上层清液；４）用流动注射分析快速检测大肠杆菌浓度，流动注射分析的分析条件：电极、流动相、流速与第三步中的流动注射分析的分析条件完全相同，待基线电流稳定后，将所述的由待测水体样品形成的含４－氨基酚的上层清液进样，记下ＩｒＯ↓［２］－Ｐｄ修饰电极的响应电流的电流值；５）利用第三步得到的响应电流－大肠杆菌浓度曲线和４）步得到的电流值读出该电流值对应的大肠杆菌浓度，该大肠杆菌浓度就是待测水体的大肠杆菌浓度。
【技术实现步骤摘要】
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：张文，耿萍，唐辉，张新爱，郑娇红，朱伟，王丹，安雅睿，金利通，
申请(专利权)人：华东师范大学，
类型：发明
国别省市：
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