新型化合物制造技术

技术编号:1749991 阅读:200 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
突变的苏云金芽孢杆菌内毒素蛋白,表现出野生型δ-内毒素具有的杀虫活性特征。表明在每个单突变点上,可用编码其他任何天然氨基酸的密码进行置换以产生活性内毒素蛋白。还描述了编码这种内毒素的DNA顺序及生产具杀虫活性的突变内毒素的重组技术。(*该技术在2009年保护过期,可自由使用*)

【技术实现步骤摘要】
苏云金芽孢杆菌(Bacillusthuringiensis)是一种能产生孢子的细菌,它在无性生长阶段的末期产生一种蛋白晶体δ-内毒素。此内毒素由某些昆虫吞食后产生毒性效应,包括停止进食、胃肠功能失常、脱水并最终导致死亡。δ-内毒素通常是由一质粒来源产生的一种无活性的前体或前毒素,分子量为130,000-140,000道尔顿(Calabrese,Canad,J.Microbiol.26∶1006,1980)。此分子在昆虫肠道内,通常由于肠道蛋白酶的水解作用而被切除掉C-端的大约一半,可能还切掉N-端的若干氨基酸,而这正是产生分子量为65,000-70,000道尔顿的活性毒素所必须的(Tyrell等,J.Bacteriol.145∶1052,1981)。已经鉴定了苏云金芽孢杆菌的大量亚种。虽然其中的大部分对于鳞翅目昆虫具有更大的特异性或增强的毒性,但也有一部分表现出对于其他类昆虫的毒性。例如,苏云金芽孢杆菌以色列亚种(B.t.israelensis)具有针对双翅目幼虫(蚊子和墨蚊)的毒性,最近还证明,另外两个亚种具有针对鞘翅目幼虫的毒性(Hofte等,Nuc.Acid.Res.15(17)本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种生产具有昆虫毒性的内毒素蛋白的方法。该方法包括用一含有DNA顺序的表达载体转化或转染细胞,此DNA顺序包括编码与表A中m-1位至m-116位的116氨基酸顺序基本同源的氨基酸顺序的部分,所述的应用于这种同源顺序的位置号码不受任何缺失或增加的影响,其中,所述DNA进行了这样的修饰:在所指出的氨基酸参考位置处编码了下列任一个或多个氨基酸:a)m-5,位,除Asn外的任何天然氨基酸;b)m-6,位,除Gln外的任何天然氨基酸,c)m-12,位,除Glu外的任何天然氨 基酸;d)m-16,位,除Asn外的任何天然氨基酸;e)m-27,位,除Glu外的任何天然氨基酸;f)m-3...

【技术特征摘要】
...

【专利技术属性】
技术研发人员:辛迪卢杰利斯詹姆斯罗伯特鲁希丹利尔帕克韦特
申请(专利权)人:山道士有限公司
类型:发明
国别省市:CH[瑞士]

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