专门用于快速大量提取口腔上皮细胞DNA 的方法技术

本发明专利技术涉及一种专门用于快速大量提取口腔上皮细胞DNA的方法，步骤如下：⑴收集样品细胞、⑵裂解细胞、⑶去除蛋白、⑷沉淀DNA、⑸乙醇洗涤、⑹溶解DNA、⑺保存DNA，将DNA样品做好标记，放于指定位置‑20℃或‑80℃中保存。本发明专利技术提供的方法相较于离心柱法和磁珠法，大大降低实验成本，相较于离心柱法和磁珠法，大大缩短DNA提取时间，相较于离心柱法，大大提高DNA提取的量。DNA纯度在合理的区间范围之内。提取得到的基因组DNA不影响下游的分子实验。

A method for rapid and rapid extraction of DNA in oral epithelial cells

The invention relates to a method for rapid extraction of DNA, epithelial cells of oral steps are as follows: 1, the cell samples were collected, the cell lysis protein removal, the precipitation of DNA and the DNA, such as ethanol washing, dissolved, save DNA, DNA sample mark, placed on the specified position of 20 DEG C or 80 degrees to save. Compared with the centrifugal column method and the magnetic bead method, the method provided by the invention greatly reduces the experimental cost. Compared with the centrifugal column method and the magnetic bead method, the DNA extraction time is greatly shortened, compared with the centrifugal column method, the amount of DNA extraction is greatly improved. The purity of DNA is within a reasonable range. The extracted genomic DNA does not affect the downstream molecular experiments.

【技术实现步骤摘要】
专门用于快速大量提取口腔上皮细胞DNA的方法
本专利技术属于分子生物学实验领域，尤其是一种专门用于快速大量提取口腔上皮细胞DNA的方法。
技术介绍
基因检测是通过提取被测者的血液、其他液体或者组织细胞对DNA进行检测的技术。目前，随着生物技术的发展，基因检测已经逐步成为继传统体检以外的新兴的疾病健康检测手段。脱氧核糖核酸(DNA)提取是基因检测的一个基本步骤，也是整个基因检测的基础，核酸的浓度和纯度的质量直接关系到后续的检测能否成功。相较于传统体检，基因检测可以直接提取被测者的口腔上皮细胞的DNA，具有无痛无创口的优势。因此，口腔上皮细胞DNA的提取，成为基因检测的主流DNA提取方法。目前，市场上，用于口腔上皮细胞DNA提取的方法主要分为离心柱法和磁珠法。离心柱法的主要原理是：离心柱中的膜可以对细胞破碎后的DNA的进行特异性的吸附，其余的细胞裂解物由于不能吸附在离心柱上，而被巨大的离心力甩出离心柱，最后对膜进行洗脱而得到所需的DNA。离心柱法的主要缺陷是特异性吸附柱对DNA的吸附效率不高，从而导致得到的DNA的量相对较少。磁珠法的主要原理大体与柱提法相似，即通过可对DNA特细异性吸附本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种专门用于快速大量提取口腔上皮细胞DNA的方法，其特征在于：步骤如下：⑴收集样品细胞用2个口腔拭子分别刮取口腔左右两侧的口腔上皮细胞，并把拭子头转移到2个含1ml去离子水的1.5ml的离心管中；震动离心管，使细胞从拭子上尽可能多的脱落，然后将2个含有口腔上皮细胞的1.5ml管离心，转速：800×g，时间：2分钟；吸弃上清液，每个EP管加入500μl的无菌水，将其中一个EP管的细胞转移到另一个EP管中，离心，转速：800×g，时间：2分钟；⑵裂解细胞吸弃上清液，向每管中加入500μl的溶液A，溶液A含9.5mmol/L的Tris‑Cl，2mmol/L的EDTA，1％的SDS，3％的Triton...

【技术特征摘要】
1.一种专门用于快速大量提取口腔上皮细胞DNA的方法，其特征在于：步骤如下：⑴收集样品细胞用2个口腔拭子分别刮取口腔左右两侧的口腔上皮细胞，并把拭子头转移到2个含1ml去离子水的1.5ml的离心管中；震动离心管，使细胞从拭子上尽可能多的脱落，然后将2个含有口腔上皮细胞的1.5ml管离心，转速：800×g，时间：2分钟；吸弃上清液，每个EP管加入500μl的无菌水，将其中一个EP管的细胞转移到另一个EP管中，离心，转速：800×g，时间：2分钟；⑵裂解细胞吸弃上清液，向每管中加入500μl的溶液A，溶液A含9.5mmol/L的Tris-Cl，2mmol/L的EDTA，1％的SDS，3％的Triton-100，pH＝8.5，加后加入50μl浓度为1mg/ml的蛋白酶K溶液，涡旋振荡10秒钟，放入55℃水浴内15分钟；每5分钟振荡一次；⑶去除蛋白短...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙麟，马洁，张同，
申请(专利权)人：天津市康婷生物工程有限公司，
类型：发明
国别省市：天津,12