一种从人体组织中获得人铜锌超氧化物歧化酶基因的方法技术

技术编号:1744042 阅读:232 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
涉及一种生物技术,尤其是一种从人体组织中提取人铜锌超氧化物歧化酶基因的方法。从人体组织获得人铜锌超氧化物歧化酶基因的方法的步骤为从人体胚胎组织提取总RNA;用逆转录-聚合酶链式反应方法扩增出人铜锌SOD的cDNA;cDNA经PCR扩增,琼脂糖凝胶电泳检查和测序证明为hCu,Zn-SOD基因。提供一种十分简便有效,成本较低的从人体组织中提取人铜锌超氧化物歧化酶基因的方法。所提取的总RNA完整,PCR产物琼脂糖凝胶电泳结果中扩增条带清晰,在重组质粒径BamHI和HindIII两位点酶切后的电泳结果中可说明SOD基因连入载体,所测序列同源性达到99.8%。(*该技术在2022年保护过期,可自由使用*)

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种生物技术,尤其是一种从人体组织中提取人铜锌超氧化物歧化酶基因的方法。(2)
技术介绍
超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)是超氧阴离子自由基的专一清除剂,在维持生物体内自由基的动态平衡中起着重要的作用(Kushleika J.Checkoway H.Woods J.S.et al.Ann Neurol,1996,39(3)378-381;Noda J.Otagiri M.Akaike T et al.J PharmacolExp Ther,1996,279(1)162-171)。SOD在医疗、保健、食品等方面有着广泛的应用前景。重组人SOD的研究,一方面可以解决人SOD的来源问题,另一方面也可以避免非人源SOD在应用中可能带来的安全性问题。目前获得hCu,Zn-SOD基因的方法主要有两种一种是人工合成法(Takeshima,Y,Takasugu N.Proc.Natl.Acad.Sci.USA 1994,919685~9689),即先用亚磷酰胺法化学合成由双链35~60个碱基组成的17个寡核苷酸,经HPLC纯化后,磷酸化除寡核苷酸1和本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种从人体组织中获得人铜锌超氧化物歧化酶基因的方法,其特征在于从人体组织获得人铜锌超氧化物歧化酶基因的方法的步骤为从人体胚胎组织提取总RNA;用逆转录-聚合酶链式反应方法扩增出人铜锌SOD的cDNA;cDNA经PCR扩增,琼脂糖凝胶电泳检查和测序证明为hCu,Zn-SOD基因。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:刘仁海章军周克夫徐虹楼士林
申请(专利权)人:厦门市厦大建南抗性基因有限公司
类型:发明
国别省市:92[中国|厦门]

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