一种exosome来源的与肝癌相关的miRNA标志物及其应用制造技术

本发明专利技术提供了一种肿瘤源性的exosome来源的与人类肝癌相关的miRNA标志物及其在诊断人类肝癌中的用途，所述miRNA该标志物为exosome来源的miRNA‑46a。本发明专利技术还提供了检测exosome来源的miRNA‑46a的试剂、含有该检测试剂的试剂盒及其在诊断人类肝癌中的用途。本发明专利技术还提供了用于检测exosome来源的miRNA‑46a的方法及其在诊断人类肝癌中的用途。本发明专利技术还提供了从少量血清中快速提取exosome的试剂、含有该exosome提取试剂的试剂盒以及使用该试剂盒从血液中提取exosome的方法。本发明专利技术的miRNA标志物及其检测试剂可用于肝癌的早期诊断，其灵敏性和特异性均优于现有技术。

A exosome source of miRNA markers associated with liver cancer and its application

The invention provides a tumor derived from exosome markers associated with human hepatocellular carcinoma miRNA and its use in the diagnosis of human hepatocellular carcinoma, the miRNA marker was the source of exosome miRNA 46a. The invention also provides a kit for detection of exosome, miRNA from 46a containing the reagent and its use in the diagnosis of human hepatocellular carcinoma. The invention also provides a method for detection of exosome miRNA from 46a and its use in the diagnosis of human hepatocellular carcinoma. The invention also provides a reagent for rapidly extracting exosome from a small amount of serum, a kit containing the exosome extraction reagent, and a method for extracting exosome from blood by using the kit. The miRNA marker and its detection reagent can be used for the early diagnosis of liver cancer, and its sensitivity and specificity are superior to those of the existing technology.

【技术实现步骤摘要】
一种exosome来源的与肝癌相关的miRNA标志物及其应用
本专利技术属于生物医学领域，具体涉及一种exosome来源的与人类肝癌相关的miRNA标志物及其用途，更具体的涉及人类血液中肿瘤源性的exosome来源的miRNA-46a及其在诊断肝癌中的应用。
技术介绍
微小RNA(microRNA，miRNA)来源于长链RNA初始转录产物(Pri-miRNA)，Pri-miRNA在细胞核中经酶切作用，形成具有茎环结构的miRNA前体，miRNA前体转运至胞质后，被进一步加工成miRNA；成熟的miRNA在特定的宿主细胞内与脂质或脂蛋白结合形成微囊泡，以外切酶体形式分泌至胞外，经体液微循环，被内吞入特定的受体细胞内发挥特定调节功能。肿瘤相关miRNA可能来源于肿瘤细胞死亡、溶化或肿瘤细胞向周围环境所释放的miRNA。miRNA可在转录后水平通过与靶基因特异性的碱基互补配对，引起靶基因的降解或者抑制其翻译，调控癌基因和/或抑癌基因的表达，广泛参与肿瘤细胞增殖、凋亡、分化侵袭、迁移血管生成等，与多种肿瘤的发生发展及预后关系密切。因此，有学者提出了“癌microRNA”(OncomiRs)的本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种与肝癌相关的miRNA标志物及其在诊断人类肝癌中的用途，其特征在于，所述miRNA标志物为肿瘤源性的exosome来源的miRNA‑46a，其序列为：5’‑UUCAUUCAUUACUUUUGUACGC‑3’。

【技术特征摘要】
1.一种与肝癌相关的miRNA标志物及其在诊断人类肝癌中的用途，其特征在于，所述miRNA标志物为肿瘤源性的exosome来源的miRNA-46a，其序列为：5’-UUCAUUCAUUACUUUUGUACGC-3’。2.一种检测权利要求1所述miRNA标志物的试剂，其特征在于，所述试剂是用于扩增所述miRNA-46a的引物对，或者是用于检测所述miRNA-46a的探针；优选地，用于扩增所述miRNA-46a的正向引物为：5’-actcaccagctggccattattacttttggta-3’，反向引物为：5’-cgccgcagtgcgtgtcgtggagt-3’。3.一种诊断人类肝癌的试剂盒，其特征在于，包含权利要求2所述的试剂，优选地，还包含PCR反应常用的试剂和酶。4.权利要求2所述的试剂在制备用于诊断人类肝癌的试剂盒中的用途。5.权利要求2所述的试剂在诊断人类肝癌中的用途。6.一种检测权利要求1所述的miRNA标志物的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：(1)分离纯化血液中肿瘤源性的exosome；(2)提取样本总RNA；(3)将步骤(2)获得的RNA逆转录成cDNA；(4)在荧光实时定量PCR仪上将步骤(3)获得的cDNA和参照基因进行扩增检测；(5)通过融解曲线分析和电泳确定目...

【专利技术属性】
技术研发人员：周宇，陈莉，
申请(专利权)人：周宇，陈莉，
类型：发明
国别省市：北京,11