一种exosome来源的与肝癌相关的miRNA‑33b及其应用制造技术

本发明专利技术提供了一种肿瘤源性的exosome来源的与人类肝癌相关的miRNA标志物及其在诊断人类肝癌中的用途，所述miRNA该标志物为exosome来源的miRNA‑33b。本发明专利技术还提供了检测exosome来源的miRNA‑33b的试剂、含有该检测试剂的试剂盒及其在诊断人类肝癌中的用途。本发明专利技术还提供了用于检测exosome来源的miRNA‑33b的方法及其在诊断人类肝癌中的用途。本发明专利技术还提供了从少量血清中快速提取exosome的试剂、含有该exosome提取试剂的试剂盒以及使用该试剂盒从血液中提取exosome的方法。本发明专利技术的miRNA标志物及其检测试剂可用于肝癌的早期诊断，其灵敏性和特异性均优于现有技术。

MiRNA 33b related to liver cancer and a source of exosome and its application

【技术实现步骤摘要】
一种exosome来源的与肝癌相关的miRNA-33b及其应用
本专利技术属于生物医学领域，具体涉及一种exosome来源的与人类肝癌相关的miRNA标志物及其用途，更具体的涉及人类血液中肿瘤源性的exosome来源的miRNA-33b及其在诊断肝癌中的应用。
技术介绍
微小RNA(microRNA，miRNA)来源于长链RNA初始转录产物(Pri-miRNA)，Pri-miRNA在细胞核中经酶切作用，形成具有茎环结构的miRNA前体，miRNA前体转运至胞质后，被进一步加工成miRNA；成熟的miRNA在特定的宿主细胞内与脂质或脂蛋白结合形成微囊泡，以外切酶体形式分泌至胞外，经体液微循环，被内吞入特定的受体细胞内发挥特定调节功能。肿瘤相关miRNA可能来源于肿瘤细胞死亡、溶化或肿瘤细胞向周围环境所释放的miRNA。miRNA可在转录后水平通过与靶基因特异性的碱基互补配对，引起靶基因的降解或者抑制其翻译，调控癌基因和/或抑癌基因的表达，广泛参与肿瘤细胞增殖、凋亡、分化侵袭、迁移血管生成等，与多种肿瘤的发生发展及预后关系密切。因此，有学者提出了“癌microRNA”(OncomiRs)本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种与肝癌相关的miRNA标志物及其在诊断人类肝癌中的用途，其特征在于，所述miRNA标志物为肿瘤源性的exosome来源的miRNA‑33b，其序列为：5’‑UUCAUUCAUUACUUUUGUACGC‑3’。

【技术特征摘要】
1.一种与肝癌相关的miRNA标志物及其在诊断人类肝癌中的用途，其特征在于，所述miRNA标志物为肿瘤源性的exosome来源的miRNA-33b，其序列为：5’-UUCAUUCAUUACUUUUGUACGC-3’。2.一种检测权利要求1所述miRNA标志物的试剂，其特征在于，所述试剂是用于扩增所述miRNA-33b的引物对，或者是用于检测所述miRNA-33b的探针；优选地，用于扩增所述miRNA-33b的正向引物为：5’-actcactagttggcccaattacttatggta-3’，反向引物为：5’-cgccggagtgcctgtcgtggagt-3’。3.一种诊断人类肝癌的试剂盒，其特征在于，包含权利要求2所述的试剂，优选地，还包含PCR反应常用的试剂和酶。4.权利要求2所述的试剂在制备用于诊断人类肝癌的试剂盒中的用途。5.权利要求2所述的试剂在诊断人类肝癌中的用途。6.一种检测权利要求1所述的miRNA标志物的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：(1)分离纯化血液中肿瘤源性的exosome；(2)提取样本总RNA；(3)将步骤(2)获得的RNA逆转录成cDNA；(4)在荧光实时定量PCR仪上将步骤(3)获得的cDNA和参照基因进行扩增检测；(5)通过融解曲线分析和电泳确定目的条带，...

【专利技术属性】
技术研发人员：周宇，陈莉，
申请(专利权)人：周宇，陈莉，
类型：发明
国别省市：北京,11