能催化吲哚生成靛蓝的P450BM-3Asp168Leu变体基因及其用途制造技术

本发明专利技术公开了一种能催化吲哚生成靛蓝的Ｐ４５０ＢＭ－３Ａｓｐ１６８Ｌｅｕ变体基因，利用饱和突变定向进化技术介导的随机突变，筛选获得，其碱基序列如序列表中ＳＥＱ　　ＩＤ　　ＮＯ．１所示，原Ｐ４５０ＢＭ－３（Ｆ８７Ｖ／Ａ７４Ｇ／Ｌ１８８Ｑ）基因中的第１６８位的天冬氨酸的密码子突变为亮氨酸的密码子。所得到的变体基因表达的变体酶通过酶动力学曲线的测定，与现有技术相比较，催化效率显著提高，为生物合成染料靛蓝提供了更加具有应用价值的新酶，同时为染料靛蓝的生物生产提供了更加广阔的应用前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物化工中的基因工程
，尤其是涉及一种能催化吲哚生成靛蓝的P450BM-3Asp168Leu变体基因及其用途。
技术介绍
作为一种最早发现的天然染料之一，靛蓝染料的使用具有相当悠久的历史。从古埃及木乃伊穿着的一些服装到我国马王堆出土的蓝色麻织物等都是由靛蓝染成的。200多年前法国大革命和美国独立战争时的旗帜上也染有靛蓝的颜色。这种染料之所以能够长期、广泛地为人们所喜爱，是由于它在染着坚牢度和耐光坚牢度上都是其它染料无法比拟的，故常被称为“染料之王”。远古时代主要是从靛蓝植物如菘蓝、蓼蓝、木蓝等中获得。19世纪中叶，以纺织工业革命为先导的产业革命也促进染料的需求大幅度增加，当时虽然在东印度尤其是孟加拉一带开辟了数十万英亩良田用于种植靛蓝植物，然而仍无法满足印染业的需要，以致用化学方法合成染料的课题，已经摆在化学家面前。1897年西德BASF生产的合成靛蓝问世，它以生产简便、原料充足、纯度高、易贮运、使用方便等优点后来居上，迅速普及从而使得具有几千年历史的植物靛蓝黯然失色。本世纪60年代之后，天然靛蓝终于销声匿迹，退出了历史舞台。进入80年代之后，随着社会现代化程本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种能催化吲哚生成靛蓝的Ｐ４５０ＢＭ－３Ａｓｐ１６８Ｌｅｕ变体基因，其碱基序列如序列表中ＳＥＱＩＤＮＯ．１所示。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：梅乐和，李红梅，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：86[中国|杭州]