植物叶际微生物基因组DNA提取方法技术

技术编号:1738651 阅读:381 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术属于生物技术领域,涉及一种可用于PCR扩增的植物叶际微生物基因组DNA提取方法。将叶子样品浸泡在灭菌的磷酸盐缓冲液中,经恒温摇床震荡和超声波处理使叶际微生物与植物叶子分离,收集好的菌体用0.1%的焦磷酸钠和洗涤缓冲液分别洗涤,然后依次用适量的溶菌酶、蛋白酶K和SDS处理,裂解细胞使DNA释放出来,最后经氯仿抽提蛋白,异丙醇沉淀即得到高质量的可直接用于PCR扩增的植物叶际基因组DNA。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种可直接用于PCR扩增的植物叶际微生物基因组DNA的提取方法,其特征在于,提取步骤包括:将植物叶片样品浸泡在灭菌的磷酸盐缓冲液中,摇床震荡处理10-30min,然后用超声波处理2-8min,使叶片上附生的微生物与叶片分离;离心收集菌体,用0.1%的焦磷酸钠和洗涤缓冲液分别洗涤两次;裂解液中分别加入溶菌酶、蛋白酶K和十二烷基硫酸钠处理,使菌体裂解释放出DNA;然后经氯仿抽提蛋白,异丙醇沉淀即得到高质量的可直接用于PCR扩增的植物叶际基因组DNA。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:张洪勋张保国杜方舟唐玲谷立坤白志辉
申请(专利权)人:中国科学院生态环境研究中心
类型:发明
国别省市:11[中国|北京]

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