【技术实现步骤摘要】
一种高纯度D-阿洛酮糖的制备方法
本专利技术涉及一种高纯度D-阿洛酮糖的制备方法，属于生物工程
技术介绍
D-阿洛酮糖是一种重要的稀有糖，在自然界中极少量地存在于甘蔗糖蜜、水果干、糖制品、小麦和鼠刺属植物中。作为甜味剂，D-阿洛酮糖甜度相当于果糖的70％，能量只有蔗糖的0.3％，食用后几乎不产生热量，是真正意义上的糖尿病人可以食用的甜味剂。新的研究发现，食用D-阿洛酮糖后不仅血糖不会升高，而且还能有效地调控血糖，减少能量的摄入，减少腹部脂肪的积累等作用，其独特的功能和潜在的医疗价值吸引了众多研究学者的关注，并越来越受到消费者的欢迎。2011年FDA认可甜味剂D－阿洛酮糖可以作为食品添加剂使用。中国专利文献CN105602879A(申请号201610051547.3)公开了一株高效分泌D-阿洛酮糖3-差向异构酶的基因工程菌株及其构建方法。该专利技术通过利用由瘤胃菌Ruminococcussp.5_1_39B_FAA来源的D-阿洛酮糖3-差向异构酶基因rdpe构建重组表达质粒pMA5-RDPE，然后转化枯草芽孢杆菌，实现了RDPE在枯草芽孢杆菌中组成型分泌表...
【技术保护点】
一种高纯度D‑阿洛酮糖的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：(a)枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)BLCY‑005经发酵培养基发酵培养，制得发酵液，发酵液经离心分离，洗涤菌体，二次离心，保留沉淀物，制得D‑阿洛酮糖差向异构酶粗酶制剂；所述发酵培养基，组分如下，均为质量百分比：玉米浆粉3～8％，葡萄糖0.8～1.5％，萘乙酸0.08～0.12％，七水硫酸镁0.015～0.025％，磷酸氢二铵0.01～0.02％，硫酸锰0.015～0.02％，硫酸铜0.015～0.018％，氯化铁0.08～0.12％，余量水，pH6.8～7.2；(b)步骤(a)中粗酶制剂与葡...
【技术特征摘要】
1.一种高纯度D-阿洛酮糖的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：(a)枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)BLCY-005经发酵培养基发酵培养，制得发酵液，发酵液经离心分离，洗涤菌体，二次离心，保留沉淀物，制得D-阿洛酮糖差向异构酶粗酶制剂；所述发酵培养基，组分如下，均为质量百分比：玉米浆粉3～8％，葡萄糖0.8～1.5％，萘乙酸0.08～0.12％，七水硫酸镁0.015～0.025％，磷酸氢二铵0.01～0.02％，硫酸锰0.015～0.02％，硫酸铜0.015～0.018％，氯化铁0.08～0.12％，余量水，pH6.8～7.2；(b)步骤(a)中粗酶制剂与葡萄糖异构酶以1:(1～5)(质量比)的比例混合均匀，然后按质量比20％～60％的比例加入到质量浓度为1％～3％的海藻酸钠溶液中，混合均匀，然后滴加到质量浓度为1％～3％的氯化钙溶液中，4℃固定12～36小时；(c)配制质量浓度为20％～80％的葡萄糖溶液，按质量百分比0.0001％～0.0005％的比例添加氯化钴，混合均匀，缓慢通过添加固定化酶的柱子，得到含有D-阿洛酮糖、果糖、葡萄糖的混合液；(d)收集步骤(c)制得的混合液，经脱色、过滤、离交得到D-阿洛酮糖溶液和果糖、葡萄糖的混合液；(e)步骤(d)制得的D-阿洛酮糖溶液经过色谱分离、浓缩、结晶或干燥，制得D-阿洛酮糖。2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(a)中，枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)BLCY-005的保藏编号为CGMCCNo.13152。3.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(a)中，发酵培养基组分如下，均为重量百分比：玉米浆粉5％，葡萄糖1％，萘乙酸0.1％，七水硫酸镁0.02％，磷酸氢二铵0.015％，硫酸锰0.018％，硫酸铜0.016％，氯化铁0.1％，余量水，pH6.8～7.2。4.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(a)中，发酵培养步骤如下：按照体积百分比1～2％的接种量将种子接种于发酵培养基中，在温度35～37℃、pH6.8～7.2，罐压0.04～0.06Mpa，通风比1.8...
【专利技术属性】
技术研发人员：李方华，窦光朋，邵先豹，刘杰，刘双双，杜倩，张明站，
申请(专利权)人：山东百龙创园生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：山东,37
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