一种富硒酵母培养工艺的优化方法及工艺技术

本发明专利技术公开了一种富硒酵母培养工艺的优化方法，其采取一种新型的亚硒酸钠的添加方式，不仅不会影响菌丝的产量，而且大大提高了硒的利用率，使无机硒尽可能的转化为有机硒，减少产品的毒性，具有极高的工业化应用，根据上述结果，调节摇床培养温度为23℃、初始pH为6.0、转速为120 rpm，培养基中含有1.0 g/L硫酸镁、2.0 g/L氯化钠、0.5 g/L磷酸二氢钾、2 g/L亚硒酸钠时，并且我们将亚硒酸钠均分为三等分，分别在发酵第一、二、三天加入培养基中，发酵7天可以获得约11.4 g干重菌丝、富硒量约331.7μg/g，并且有机硒转化率高达90.0%，相对与现存的产品，本发明专利技术大大节约了成本，适合现代化工业发展。

【技术实现步骤摘要】
一种富硒酵母培养工艺的优化方法及工艺
本专利技术涉及一种富硒酵母培养工艺的优化方法，属于富硒酵母

技术介绍
酵母是一种结构比较简单的单细胞真核微生物，含有丰富的氨基酸和维生素，如蛋氨酸、赖氨酸和维生素C等，是一种兼性厌氧的真菌。氧气充足的情况下菌体大量繁殖，氧气缺乏的条件下可发酵葡萄糖产生酒精，是一种非常容易培养的菌体，普通的蛋白胨培养基上就可大量繁殖。因此，在现代工业生产中，酵母的利用特别广泛，例如酿酒、甘油生产、食用酵母、有机酸、酶制剂等。酵母可通过生物富集作用对培养基中的微量元素进行富集，因此可作为一种对硒富集的载体。硒(Se)是对人体健康非常重要的微量元素之一，也是具有重要生物活性的硒蛋白的重要组成部分。由于硒是人体内谷胱甘肽过氧化酶的重要组成部分，因此，硒与酶的活性密切相关。然而，缺硒能使心肌变性、坏死，硒能刺激免疫反应，可以提高机体的免疫能力，促进免疫抗体的生成。目前我国大部分地区都存在着缺硒的现象，而且天然食品中的硒含量一般比较少，因此补硒是一个很值得关注的问题。但是国内大多数补硒仍然采用的是以亚硒酸盐为主的无机硒进行补硒，这种补硒方式的价格相对比较便宜，但是本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种富硒酵母培养工艺的优化方法，其特征在于，其包括以下步骤：（1）选取酿酒酵母；（2）培养基的培养：培养基组分包括葡萄糖、蛋白胨和酵母膏，对这三个成分因素进行正交实验，得出发酵培养基的最佳配方，其中，正交实验时，装液量为50 mL/ 250 mL，接种量为5 %，温度为30 ℃，pH 为自然，转速为200 rpm，发酵48 h后测定其菌丝生物量；（3）培养条件的优化：采用正交实验，优化转速、温度、初始 pH 这三个变量，其中，装液量为 50 mL/ 250 mL，接种量为 5 %，发酵48 h后测定其菌丝生物量；（4）富硒条件的优化：正交实验结果，确定了酿酒酵母的最适的培养条件，选择不同添加时...

【技术特征摘要】
1.一种富硒酵母培养工艺的优化方法，其特征在于，其包括以下步骤：（1）选取酿酒酵母；（2）培养基的培养：培养基组分包括葡萄糖、蛋白胨和酵母膏，对这三个成分因素进行正交实验，得出发酵培养基的最佳配方，其中，正交实验时，装液量为50mL/250mL，接种量为5%，温度为30℃，pH为自然，转速为200rpm，发酵48h后测定其菌丝生物量；（3）培养条件的优化：采用正交实验，优化转速、温度、初始pH这三个变量，其中，装液量为50mL/250mL，接种量为5%，发酵48h后测定其菌丝生物量；（4）富硒条件的优化：正交实验结果，确定了酿酒酵母的最适的培养条件，选择不同添加时间、添加方式来添加亚硒酸钠，进行优化，达到硒的最大化利用；（5）生产效率测定：采用干重法，将菌丝发酵液5000rpm离心5min，弃去上清液并收集菌丝，之后将培养的菌丝冷冻干燥机中冻干，其中，生产效率g/L=富硒产品干重g÷液体培养基的体积L；（6）硒的测定：利用3,3-二氨基联苯胺比色法对硒的含量进行测定；（7）总硒含量的测定：酵母菌丝中硒含量测定：准确称取1g富硒产物，放入烧瓶中，加入10mL消化液，4℃消化至无色透明为止，待冷却后，将此消化液转入50mL容量瓶中，用NaOH调节pH到7.0左右，最后将溶液定容到50mL，最后取10mL消化样液，按DAB比色法计算硒含量；（8）有机硒含量；准确称取酵母富硒产物0.5g，放入透析袋中，充分透析24h后去除无机硒，取透析袋中物质，按上述方法进行硒含量测定；（9）综合考虑富硒量和有机硒转化率，以确定最优的培养基硒浓度；富硒量µg/g=总硒含量µg÷菌丝干重g；有机硒转化率%=有机硒含量µg÷总硒含量µg×100%；（10）氨基酸的测定：氨基酸的测定是利用反相高效液相色谱HPLC完成，该测定配备了HypersilODSC18色谱柱，色谱柱为4mm×125mm，以1mL/min的流速进行梯度洗脱，柱温为40℃，移动相的配置为：缓冲液A：0.8g醋酸钠溶于500mL超纯水，加入90μL三乙胺和2.9mL四氢呋喃，最后用醋酸将pH值调整为7.2±0.05；缓冲液B：0.8g醋酸钠溶于100mL超纯水，加入200mL甲醇，最后用醋酸将pH值调整为7.2±0.05；洗脱程序设置为：缓冲液A/缓冲液B分别为100:0，50:50，0:100，0:100，100:0和100:0，对应的时间分别是0，17，20，20.1，24和24.1min；邻苯二甲醛作为衍生试剂，检测波长设置为338nm，262nm用于检测脯氨酸；标准氨基酸均用0.1MHCl配置成浓度为1mM的储液，样品中各氨基酸的含量，通过标准品绘制的标准曲线计算得来，所有样品...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘韫滔，唐婷婷，曾思琪，张兰，柯玉，李诚，胡滨，刘爱平，吴贺君，
申请(专利权)人：四川农业大学，
类型：发明
国别省市：四川,51