一种水产抑菌剂的制备方法技术

一种水产抑菌剂的制备方法，属于水产养殖领域，所述方法采集成熟的火棘果实，洗净后烘干研磨成粉末；取火棘果实粉末，加入体积比为30‑100％的乙醇溶液，加热回流，自然冷却后，减压抽滤，离心，最终得到火棘乙醇提取液；取火棘乙醇提取液，加入AgNO3溶液，将反应液置于超声仪中超声处理，待溶液变为金黄色时结束反应，反应溶液的颜色由浅褐色变为金黄色即终止反应，即得到生物合成的纳米银抑菌剂。本发明专利技术采用加热与超声辐射技术联合，利用火棘果实提取液生物合成纳米银的作用，采用一步法制备出纳米银抑菌剂，具有操作简单、反应高效、合成重现性好、产品均一稳定、抑菌活性高等优点。

A preparation method for aquatic bacteriostat of aquatic products

【技术实现步骤摘要】
一种水产抑菌剂的制备方法
本专利技术属于水产养殖领域，具体为一种水产抑菌剂的制备方法。
技术介绍
近年来，由于全球水产养殖规模、养殖密度的不断扩大及水体污染状况日趋恶化，水产病害不断发生和蔓延，严重影响了水产养殖业的可持续发展。目前，人们普遍采用氯、臭氧、二氧化氯、漂白粉等消毒剂以及磺胺类、喹诺酮类、抗生素类等抗菌剂来控制水产病害的发生，但随着这些药剂的大量反复施用，逐渐表现出杀菌效果差、药物残留、污染水体环境等缺点。另外，长期使用抗生素还会造成病原菌对药物产生耐药性和拮抗作用，最终导致药剂失去杀菌作用而被淘汰。因此，研制开发绿色、高效、不易产生耐药性的新型抑菌剂成为目前水产养殖业亟待解决的问题。随着纳米技术的发展，纳米材料不断涌现，纳米级无机抑菌剂也日益被广泛应用，其中纳米银抑菌剂因其具有超强的渗透性及抗菌活性而受到人们的普遍关注。纳米银是一种粒径在1～100nm之间的金属银微粒，以其独特的量子效应、小尺寸效应以及大的比表面积表现出异于常规材料的优异特性，已被应用于光学、超导材料、催化、生物传感、生命科学、食品医药等多个领域。在抑菌领域中，由于纳米银对多种致病微生物都具有强烈的抑制和杀灭作用，广谱、安全、高效、不易产生耐药性，被看作是一种颇具发展潜力的新型抑菌剂。目前，纳米银的制备方法有很多种方法，主要包括：1、液相化学还原法、光化学还原法、微乳液法等化学方法；2、高能球磨、激光溅射、激光烧蚀等物理方法；3、利用细菌、真菌、植物材料中的活性物质作为还原剂和稳定剂制备的生物学方法等。但三种方法都存在一定的局限性，分别具有能耗高、危害环境及反应重现性差等缺点。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题在于提供一种水产抑菌剂的制备方法，所述方法采用超声辐射技术，并利用火棘果实提取液的还原作用合成纳米银抑菌剂。本专利技术通过如下技术方案来实现：一种水产抑菌剂的制备方法，包括如下步骤：1)采集成熟的火棘果实，洗净后，60℃烘干至恒重，研磨成粉末备用；2)取步骤1中的火棘果实粉末，加入体积比为30-100％的乙醇溶液，40-90℃加热回流30-120min，自然冷却后，减压抽滤，离心，最终得到火棘乙醇提取液；3)取步骤2)中的火棘乙醇提取液，加入AgNO3溶液，用双蒸水定容，使硝酸银终浓度为0.1-10mM；将定容后的溶液置于超声仪中超声处理，待定容后的溶液变为金黄色时结束反应，定容后的溶液的颜色由浅褐色变为金黄色即终止反应，即得到生物合成的纳米银抑菌剂。进一步，步骤2)中火棘果实与乙醇溶液的质量体积比为1：10(g/ml)。进一步，所述步骤3)的超声功率是100-1000W。进一步，步骤3)的反应控制温度是50-100℃。进一步，步骤3)的反应时间为10-120min。本专利技术还提供一种所述抑菌剂在水产药物上的应用。本专利技术与现有技术相比的有益效果：本专利技术采用火棘果实提取物作为还原剂将银离子还原成纳米银，绿色环保，材料易得价格低廉，并且避免了生物合成纳米银批次反应重现性差的缺点，并且产品质量稳定、抑菌剂抑菌效果显著，利于推广。本专利技术采用加热与超声辐射技术联合，利用火棘果实提取液生物合成纳米银的作用，采用一步法制备出纳米银抑菌剂，具有操作简单、反应高效、合成重现性好、产品均一稳定、抑菌活性高等优点。附图说明图1：利用火棘果实提取物在不同超声功率下生物合成纳米银抑菌剂的紫外可见吸收光谱图；图2：利用火棘果实提取物在不同反应时间生物合成纳米银抑菌剂的紫外可见吸收光谱图；图3：火棘生物合成纳米银抑菌剂的透射电镜照片；图4：火棘生物合成纳米银抑菌剂的X射线衍射图谱；图5：火棘生物合成纳米银抑菌剂对不同水产病原菌的抑菌圈实验(a：火棘生物合成纳米银；b：火棘提取物；c：生理盐水)；图6：火棘生物合成纳米银抑菌剂对菲律宾文蛤死亡率的影响；图7：火棘生物合成纳米银抑菌剂Zeta电位图。具体实施方式下面对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，所描述的实施例仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。实施例1火棘果实提取物生合成纳米银a、火棘果实提取液的制备采集成熟的火棘果实，自来水冲洗干净后，再用蒸馏水洗涤3次，60℃烘干至恒重，研磨成粉末，备用。称取火棘果实粉末2g，加入20mL30％的乙醇溶液，40℃加热回流1.5h。自然冷却后，减压抽滤，12000rpm离心10分钟，最终得到火棘乙醇提取液，储存于4℃，备用。b、纳米银的生物合成取火棘果实提取液1mL，加入0.01M的AgNO3溶液1mL，再加入双蒸水18mL，，搅拌均匀后，超声功率分别在100、200、400、800W超声处理1h,反应控制温度50℃。c、纳米银的紫外-可见分光光度计检测通过紫外-可见分光光度计表征纳米银的合成，扫描波长范围为300-700nm。附图1显示，在超声波的作用下，反应液在450nm附近出现吸收峰。银纳米粒子由于特征性的表面等离子体共振能够在波长400-500nm范围内产生特征吸收峰，因此上述吸收峰为纳米银的特征吸收峰。随着超声功率的增加，溶液的吸收峰也随之升高，当超声功率达到800W时产物的吸收峰最高，在419nm处有纳米银的特征吸收峰，表现出强烈的吸收表征。由此可以说明在超声波作用下火棘提取物可以成功将AgNO3还原成纳米银，最终介导产生纳米银。实施例2火棘果实提取物生合成纳米银a、火棘果实提取液的制备采集成熟的火棘果实，自来水冲洗干净后，再用蒸馏水洗涤3次，60℃烘干至恒重，研磨成粉末，备用。称取火棘果实粉末2g，加入20mL100％的乙醇溶液，90℃加热回流30min。自然冷却后，减压抽滤，12000rpm离心10分钟，最终得到火棘乙醇提取液，储存于4℃，备用。b、纳米银的生物合成取火棘果实提取液1mL，加入0.1M的AgNO3溶液2mL，再加入双蒸水17mL，搅拌均匀后，600W超声处理0min、10min、20min、30min、40min、60min,反应控制温度90℃。c、纳米银的紫外-可见分光光度计检测采用紫外-可见分光光度计检测合成的纳米银溶液的最大吸收波长，扫描波长范围为300-700nm。随着加热反应进行反应溶液逐渐发生变化，当加热到10min后，溶液开始呈现金黄色，预示着纳米银的形成。附图2显示，当反应没用开始时反应液中没有吸收峰，10min后溶液在450nm附近开始出现吸收峰，随着加热和超声反应进行到20min后，溶液在450nm附近出现明显的纳米银的特征吸收峰。随着反应时间的延长，纳米银的特征吸收峰越来越明显，说明在该条件下反应20min后可以合成纳米银。实施例3火棘果实提取物生合成纳米银a、火棘果实提取液的制备采集成熟的火棘果实，自来水冲洗干净后，再用蒸馏水洗涤3次，60℃烘干至恒重，研磨成粉末，备用。称取火棘果实粉末2g，加入20mL60％的乙醇溶液，70℃加热回流1h。自然冷却后，减压抽滤，12000rpm离心10分钟，最终得到火棘乙醇提取液，储存于4℃，备用。b、纳米银的生物合成取火棘果实提取液1mL，加入0.01M的AgNO3溶液2mL，再加入双蒸水17mL，搅拌均匀后，600W超声处理1h，反本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种水产抑菌剂的制备方法，其特征在于它包括如下步骤：1)采集成熟的火棘果实，洗净后，60℃烘干至恒重，研磨成粉末备用；2)取步骤1)中的火棘果实粉末，加入体积比为30‑100％的乙醇溶液，40‑90℃加热回流30‑120min，自然冷却后，减压抽滤，离心，最终得到火棘乙醇提取液；3)取步骤2)中的火棘乙醇提取液，加入AgNO3溶液，用双蒸水定容，使硝酸银终浓度为0.1‑10mM；将定容后的溶液置于超声仪中超声处理，待定容后的溶液变为金黄色时结束反应，定容后的溶液的颜色由浅褐色变为金黄色即终止反应，即得到生物合成的纳米银抑菌剂。

【技术特征摘要】
1.一种水产抑菌剂的制备方法，其特征在于它包括如下步骤：1)采集成熟的火棘果实，洗净后，60℃烘干至恒重，研磨成粉末备用；2)取步骤1)中的火棘果实粉末，加入体积比为30-100％的乙醇溶液，40-90℃加热回流30-120min，自然冷却后，减压抽滤，离心，最终得到火棘乙醇提取液；3)取步骤2)中的火棘乙醇提取液，加入AgNO3溶液，用双蒸水定容，使硝酸银终浓度为0.1-10mM；将定容后的溶液置于超声仪中超声处理，待定容后的溶液变为金...

【专利技术属性】
技术研发人员：王磊，宿红艳，梁徐健，刘夏宇，戴昕彤，徐慧，
申请(专利权)人：鲁东大学，
类型：发明
国别省市：山东,37