一种地骨皮总木脂素酰胺类生物碱提取物及其制备方法和用途技术

本发明专利技术公开了一种地骨皮总木脂素酰胺类生物碱提取物及其制备方法和用途，是利用大孔吸附树脂技术并结合聚酰胺柱色谱制备得到地骨皮木脂素酰胺类生物碱提取物，并鉴定出地骨皮总木脂素酰胺类生物碱提取物中含有11种木脂素酰胺类化合物。同时，本发明专利技术对地骨皮总木脂素酰胺类生物碱提取物及11种木脂素酰胺类化合物进行体外降血糖实验，结果表明，地骨皮总木脂素酰胺类生物碱提取物及11种木脂素酰胺类化合物均表现出极强的α‑葡萄糖苷酶抑制活性，其强度均超过阳性药物阿卡波糖。因此本发明专利技术地骨皮总木脂素酰胺类生物碱提取物及木脂素酰胺类化合物的研究为研制新的降血糖药物提供了新的先导化合物，具有很好的开发应用前景。

A Digupi lignanoid amide alkaloid extract and preparation method and application thereof

【技术实现步骤摘要】
一种地骨皮总木脂素酰胺类生物碱提取物及其制备方法和用途
本专利技术涉及一种地骨皮总木脂素酰胺类生物碱提取物及其制备方法和用途，属于医药领域。
技术介绍
糖尿病是人体内胰岛素缺乏或者相对缺乏而引起的一种以慢性高血糖为特征的终身性代谢性疾病。糖尿病不仅是心血管疾病的危险因素，同时还会导致一系列并发性疾病。目前我国有1.139亿成年人患糖尿病，是世界上糖尿病患者最多的国家。目前临床上使用的Ⅱ型降糖类药物主要有磺酰脲类、双胍类和α-糖苷酶抑制剂三大类，但多数具有一定的毒副作用，限制了其临床应用。因此，积极开发更安全、有效的新型降糖药物是非常必要和紧迫的。地骨皮(LyciumchinenseMil1.)为茄科(Solanaceae)枸杞属植物枸杞的干燥根皮，主产于东北、河北、山西、陕西、甘肃等地，资源丰富。地骨皮为我国常用中药，用药历史悠久，具有凉血除蒸、清肺降火之功效。临床上用于阴虚潮热、骨蒸盗汗、肺热咳嗽、咳血、内热消渴等症。现代药理研究表明地骨皮在降血糖、降血压、降血脂、解热、抗病毒等方面具有显著的活性。化学成分研究表明该植物主要含有生物碱、黄酮类、木脂素类、甾体类、萜类和苷类等成分。木脂素酰胺类生物碱是自然界中一类特殊的生物碱，主要存在茄科植物中，具有复杂多样的分子结构。由于地骨皮中的木脂素酰胺类生物碱多具有酚羟基，同时由于酰基的存在使得其化学性质较为特殊，虽属于生物碱，但往往不具有碱性，难以采用一般的生物碱类成分的提取方法进行富集。尽管文献报道了通过系统溶剂萃取并结合正相和反相硅胶分离该类成分单体化合物的方法[J.X.Zhang,S.H.Guan,R.H.Feng,etal,Neolignanamides,lignanamides,andotherphenoliccompoundsfromtherootbarkofLyciumchinense,J.Nat.Prod.76(2013)51–58；H.Chen,Y.JLi,Y.JSun,etal,lignanamideswithpotentantihyperliperlipidemicactivitiesfromtherootbarkofLyciumchinense,Fitoterapia122(2017)119-125]，但有关富集制备总木脂素酰胺类生物碱的方法尚无报道，也未发现含有木脂素酰胺类生物碱的地骨皮提取物或者木脂素酰胺类生物碱单体化合物具有降血糖作用的报道。
技术实现思路
针对现有技术的问题，本专利技术提供了一种地骨皮总木脂素酰胺类生物碱提取物及其制备方法和用途，所述的地骨皮总木脂素酰胺类生物碱提取物具有降血糖的作用。本专利技术的技术方案是：一种地骨皮总木脂素酰胺类生物碱提取物，具体提取方法如下：(1)取地骨皮，粉碎，用8倍地骨皮重量的体积分数95％乙醇回流提取3次，提取时间为2h；合并提取液，过滤，滤液减压浓缩至0.5g生药/ml，得到地骨皮提取液；(2)将地骨皮提取液上样于AB-8大孔吸附树脂层析柱，然后依次用10BV的水，6BV的体积分数10％乙醇洗脱，再用6BV的体积分数30％乙醇洗脱，最后用6BV的体积分数50％乙醇洗脱，收集体积分数50％乙醇洗脱液，减压浓缩，得到浓缩液；(3)将浓缩液上样于聚酰胺树脂柱上，然后依次用5BV的水，3BV的体积分数70％乙醇洗脱，再用3BV的氨水洗脱，收集氨水洗脱液，减压浓缩，得到氨水洗脱物；(4)将氨水洗脱物用甲醇超声溶解，离心，上清液用0.45μm微孔滤膜过滤，滤液上样于SephadexLH-20葡聚糖凝胶柱上，然后用甲醇洗脱，收集黄色条带部分，减压浓缩干燥，即得。所述的氨水的质量分数为1％～20％；所述的离心的转速为3000r/min，时间为10min；所述的AB-8大孔吸附树脂为地骨皮提取液体积的3倍；所述的聚酰胺树脂为浓缩液体积的5倍；所述的SephadexLH-20葡聚糖凝胶为滤液体积的20倍。一种地骨皮总木脂素酰胺类生物碱提取物的制备方法，包括以下步骤：(1)取地骨皮，粉碎，用8倍地骨皮重量的体积分数95％乙醇回流提取3次，提取时间为2h；合并提取液，过滤，滤液减压浓缩至0.5g生药/ml，得到地骨皮提取液；(2)将地骨皮提取液上样于AB-8大孔吸附树脂层析柱，然后依次用10BV的水，6BV的体积分数10％乙醇洗脱，再用6BV的体积分数30％乙醇洗脱，最后用6BV的体积分数50％乙醇洗脱，收集体积分数50％乙醇洗脱液，减压浓缩，得到浓缩液；(3)将浓缩液上样于聚酰胺树脂柱上，然后依次用5BV的水，3BV的体积分数70％乙醇洗脱，再用3BV的氨水洗脱，收集氨水洗脱液，减压浓缩，得到氨水洗脱物；(4)将氨水洗脱物用甲醇超声溶解，离心，上清液用0.45μm微孔滤膜过滤，滤液上样于SephadexLH-20葡聚糖凝胶柱上，然后用甲醇洗脱，收集黄色条带部分，减压浓缩干燥，即得。所述的氨水的质量分数为1％～20％；所述的离心的转速为3000r/min，时间为10min；所述的AB-8大孔吸附树脂为地骨皮提取液体积的3倍；所述的聚酰胺树脂为浓缩液体积的5倍；所述的SephadexLH-20葡聚糖凝胶为滤液体积的20倍。一种地骨皮总木脂素酰胺类生物碱提取物在制备预防和治疗糖尿病药物中的应用。所述的地骨皮总木脂素酰胺类生物碱提取物中包括枸杞酰胺D、枸杞酰胺E、枸杞酰胺G、(E)-2-(4,5-二羟基-2-{3-[(4-羟基苯乙基)氨基]-3-含氧丙基}苯基)-3-(4-羟基-3-甲氧基-苯基)-氮-(4-羟基苯乙基)丙烯酰胺、(E)-2-(4,5-二羟基-2-{3-[(4-羟基苯乙基)氨基]-3-含氧丙基}苯基)-3-(4-羟基-3,5-二甲氧基苯基)-氮-(4-羟基苯乙基)丙烯酰胺、(E)-2-(4,5-二羟基-2-{3-[(4-羟基苯乙基)氨基]-3-含氧丙基}苯基)-3-(4-羟基-3,5-二甲氧基苯基)-氮-(4-乙酰氨基丁基)丙烯酰胺、(E)-2-(4,5-二羟基-2-{3-[(4-羟基苯乙基)氨基]-3-含氧丙基}苯基)-3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-氮-(4-乙酰氨基丁基)丙烯酰胺、枸杞酰胺J、(1,2-反式)-氮3-(4-乙酰氨基丁基)-1-(3,4-二羟基苯乙基)-7-羟基-二氮-(4-羟基苯乙基)-6,8-二甲氧基-1,2-二氢化萘-2,3-二甲酰胺、1,2-二氢-6,8-二甲氧基-7-羟基-1-(3,4-二羟基苯基)-氮1,氮2-二-[2-(4-羟基苯基)乙基]-2,3-萘二甲基酰胺和1,2-二氢-6,8-二甲氧基-7-羟基-1-(3,5-二甲氧基-4-羟基苯基)-氮1,氮2-二-[2-(4-羟基苯基)乙基]-2,3-萘二甲基酰胺。所述的地骨皮总木脂素酰胺类生物碱提取物具体提取方法如下：(1)取地骨皮，粉碎，用8倍地骨皮重量的体积分数95％乙醇回流提取3次，提取时间为2h；合并提取液，过滤，滤液减压浓缩至0.5g生药/ml，得到地骨皮提取液；(2)将地骨皮提取液上样于AB-8大孔吸附树脂层析柱，按6BV/h的流速进行吸附，然后依次用10BV的水，6BV的体积分数10％乙醇洗脱，再用6BV的体积分数30％乙醇洗脱，最后用6BV的体积分数50％乙醇洗脱，收集体积分数50％乙醇洗脱液，减压本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种地骨皮总木脂素酰胺类生物碱提取物，其特征在于，具体提取方法如下：(1)取地骨皮，粉碎，用8倍地骨皮重量的体积分数95％乙醇回流提取3次，提取时间为2h；合并提取液，过滤，滤液减压浓缩至0.5g生药/ml，得到地骨皮提取液；(2)将地骨皮提取液上样于AB‑8大孔吸附树脂层析柱，然后依次用10BV的水，6BV的体积分数10％乙醇洗脱，再用6BV的体积分数30％乙醇洗脱，最后用6BV的体积分数50％乙醇洗脱，收集体积分数50％乙醇洗脱液，减压浓缩，得到浓缩液；(3)将浓缩液上样于聚酰胺树脂柱上，然后依次用5BV的水，3BV的体积分数70％乙醇洗脱，再用3BV的氨水洗脱，收集氨水洗脱液，减压浓缩，得到氨水洗脱物；(4)将氨水洗脱物用甲醇超声溶解，离心，上清液用0.45μm微孔滤膜过滤，滤液上样于Sephadex LH‑20葡聚糖凝胶柱上，然后用甲醇洗脱，收集黄色条带部分，减压浓缩干燥，即得。

【技术特征摘要】
1.一种地骨皮总木脂素酰胺类生物碱提取物，其特征在于，具体提取方法如下：(1)取地骨皮，粉碎，用8倍地骨皮重量的体积分数95％乙醇回流提取3次，提取时间为2h；合并提取液，过滤，滤液减压浓缩至0.5g生药/ml，得到地骨皮提取液；(2)将地骨皮提取液上样于AB-8大孔吸附树脂层析柱，然后依次用10BV的水，6BV的体积分数10％乙醇洗脱，再用6BV的体积分数30％乙醇洗脱，最后用6BV的体积分数50％乙醇洗脱，收集体积分数50％乙醇洗脱液，减压浓缩，得到浓缩液；(3)将浓缩液上样于聚酰胺树脂柱上，然后依次用5BV的水，3BV的体积分数70％乙醇洗脱，再用3BV的氨水洗脱，收集氨水洗脱液，减压浓缩，得到氨水洗脱物；(4)将氨水洗脱物用甲醇超声溶解，离心，上清液用0.45μm微孔滤膜过滤，滤液上样于SephadexLH-20葡聚糖凝胶柱上，然后用甲醇洗脱，收集黄色条带部分，减压浓缩干燥，即得。2.根据权利要求1所述的地骨皮总木脂素酰胺类生物碱提取物，其特征在于，所述的氨水的质量分数为1％～20％；所述的离心的转速为3000r/min，时间为10min；所述的AB-8大孔吸附树脂为地骨皮提取液体积的3倍；所述的聚酰胺树脂为浓缩液体积的5倍；所述的SephadexLH-20葡聚糖凝胶为滤液体积的20倍。3.一种如权利要求1所述的地骨皮总木脂素酰胺类生物碱提取物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)取地骨皮，粉碎，用8倍地骨皮重量的体积分数95％乙醇回流提取3次，提取时间为2h；合并提取液，过滤，滤液减压浓缩至0.5g生药/ml，得到地骨皮提取液；(2)将地骨皮提取液上样于AB-8大孔吸附树脂层析柱，然后依次用10BV的水，6BV的体积分数10％乙醇洗脱，再用6BV的体积分数30％乙醇洗脱，最后用6BV的体积分数50％乙醇洗脱，收集体积分数50％乙醇洗脱液，减压浓缩，得到浓缩液；(3)将浓缩液上样于聚酰胺树脂柱上，然后依次用5BV的水，3BV的体积分数70％乙醇洗脱，再用3BV的氨水洗脱，收集氨水洗脱液，减压浓缩，得到氨水洗脱物；(4)将氨水洗脱物用甲醇超声溶解，离心，上清液用0.45μm微孔滤膜过滤，滤液上样于SephadexLH-20葡聚糖凝胶柱上，然后用甲醇洗脱，收集黄色条带部分，减压浓缩干燥，即得。4.根据权利要求3所述的地骨皮总木脂素酰胺类生物碱提取物的制备方法，其特征在于，所述的氨水的质量分数为1％～20％；所述的离心的转速为3000r/min，时间为10min；所述的AB-8大孔吸附树脂为地骨皮提取液体积的3倍；所述的聚酰胺树脂为浓缩液体积的5倍；所述的SephadexLH-20葡聚糖凝胶为滤液体积的20倍。5.一种地骨皮总木脂素酰胺类生物碱提取物在制备预防和治疗糖尿病药物中的应用。6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述的地骨皮总木脂素酰胺类生物碱提取物中包括枸杞酰胺D、枸杞酰胺E、枸杞酰胺G、(E)-2-(4,5-二羟基-2-{3-[(4-羟基苯乙基)氨基]-3-含氧丙基}苯基)-3-(4-羟基-3-甲氧基-苯基)-氮-(4-羟基苯乙基)丙烯酰胺、(E)-2-(4,5-二羟基-2-{3-[(4-羟基苯乙基)氨基]-3-含氧丙基}苯基)-3-(4-羟基-3,5-二甲氧基苯基)-氮-(4-羟基苯乙基)丙烯酰胺、(E)-2-(4,5-二羟基-2-{3-[(4-羟基苯乙基)氨基]-3-含氧丙基}苯基)-3-(4-羟基-3,5-二甲氧基苯基)-氮-(4-乙酰氨基丁基)丙烯酰胺、(E)-2-(4,5-二羟基-2-{3-[(4-羟基苯乙基)氨基]-3-含氧丙基}苯基)-3-...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈辉，张艳丽，孙彦君，李玉洁，苏芳谊，王俊敏，吴亚，弓建红，杜锟，
申请(专利权)人：河南中医药大学，
类型：发明
国别省市：河南,41