【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种酶的制备方法,确切讲是指肝脏过氧化氢酶的制备方法。本方法所涉及的方法是利用动物肝脏生产肝过氧化氢酶,在制备过程中是先将动物的肝脏进行匀浆处理。
技术介绍
随科学技术的进步和对环境问题的重视,全球过氧化氢的使用量正以10%速度逐年增加。如印染业更多采用过氧化氢进行坯布的漂白;造纸业用过氧化氢替代氯进行纸浆的漂白;食品工业中采用过氧化氢灭菌等。在应用中为去除处理液残留的过氧化氢,必然大量使用过氧化氢酶。因此近年来对过氧化氢酶的需求量大大增加。过氧化氢酶生产的传统工艺,参见《生化药物》1989,(1)30,“从牛肝中提取过氧化氢酶工艺探讨”,该工艺是将动物的肝脏经匀桨处理后,再在低温下离心分离。由于肝脏结缔组织丰富,肝糖原含量高,因此匀浆后形成比重较大、粘度很高的溶液,用常规离心法离心极为困难,因此产物收率很低,生产周期很长。国内外近期开辟了以微生物发酵生产过氧化氢酶方法,如《生物化学与生物物理进展》1990年第17卷,第5期,“细菌过氧化氢酶的分离、结晶及性质”和《微生物学报》42卷3期2002年6月,“重组大肠杆菌热稳定性过氧人氢酶的纯化及性质 ...
【技术保护点】
一种肝过氧化氢酶的制备方法,以动物肝脏为原料,先将动物肝脏进行匀浆处理,其特征是在匀浆处理后的动物肝脏中加入1至3倍肝重量的磷酸缓冲液,混匀后装入发酵罐中,在22±5℃下进行发酵,期间保持体系的pH值为5~6,发酵48±12小时后,加入适量有机酸使体系的pH值降为4.0~4.5,静置15~35分钟后,再在体系中加入2~4%的氯化钠,放置1.5~2.5小时,再在体系中加入0.5~1.2%的1,2-苯并异噻唑啉-3-酮(以下简称PT)和适量的氢氧化钠将体系的pH值调到6~7,搅匀后静置1.5~2.5小时,分离出体系中的上清液,再将上清液离心分离、微滤、超滤浓缩。
【技术特征摘要】
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