一种用于丙型肝炎病毒检测的核酸序列及试剂盒制造技术

本发明专利技术公开了一种用于检测丙型肝炎病毒(Hepatitis virus C，HCV)的核酸序列及试剂盒，属于分子诊断技术领域。本发明专利技术提供的检测HCV的引物及探针能特异地扩增并检测7种HCV基因型的病毒RNA。本发明专利技术还公开了用于检测丙型肝炎病毒的试剂盒，能实现快速、灵敏、准确的检测HCV病毒各种亚型的准确拷贝数。本发明专利技术具有操作简便、特异性强、敏感性高、成本低廉及高通量等优点，可用于临床HCV病毒RNA的快速超敏检测，为临床丙型肝炎(Hepatitis C)的诊断和治疗提供参考依据。

A nucleic acid sequence and kit for detection of hepatitis C virus

The invention discloses a method for detection of hepatitis C virus (Hepatitis virus C, HCV) of the nucleic acid sequence and kit, which belongs to the technical field of molecular diagnostics. The primers and probes for the detection of HCV provided by the present invention can specifically amplify and detect 7 HCV genotypes of virus RNA. The invention also discloses a kit for detecting hepatitis C virus, which can detect the exact copy number of various subtypes of HCV virus quickly, sensitively and accurately. The invention has the advantages of simple operation, strong specificity, high sensitivity, low cost and high throughput, high sensitivity can be used for rapid detection of RNA virus HCV clinical, clinical hepatitis C (Hepatitis C) to provide reference for the diagnosis and treatment of.

【技术实现步骤摘要】
一种用于丙型肝炎病毒检测的核酸序列及试剂盒
本专利技术属于分子诊断
，具体涉及一种用于丙型肝炎病毒检测的核酸序列及试剂盒。
技术介绍
丙型肝炎是一种由丙型肝炎病毒(HepatitisvirusC，HCV)感染而引起的病毒性肝炎，丙肝病毒是丙肝患者发病和传染的根源。丙型肝炎是全球最严重的公共卫生问题之一，丙型肝炎呈世界性分布，中国拥有世界上最多的慢性丙型病毒性肝炎(HCV)感染者，约3800万。丙型肝炎病毒发展为慢性感染的机率远远高于乙型病毒感染。一般来说70～80％HCV感染者发展成慢性丙型肝炎，慢性丙型肝炎的表现轻重不等，约20～30％可逐渐发展至肝硬化，肝硬化患者中，每年约1～4％可发展至肝癌。丙型肝炎病毒(HepatitisvirusC，HCV)是一小的有囊膜的单股正链RNA病毒，属黄病毒科丙型肝炎病毒属。丙肝病毒是一种隐匿性强，并且危害性也强的病毒，当确诊感染了丙肝之后，大多数丙肝患者都处于急性感染时期或者慢性时期，临床数据发现如果半年之内，患者病情没有得到有效治愈，很大程度上都会发展为肝硬化、肝癌状态，后果相当严重。所以，检查发现得了丙肝之后，一定要及时有效的到专业肝本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于丙型肝炎病毒检测的核酸序列，其特征在于，包括用于特异检测7种基因型的HCV病毒RNA的引物和探针，具体包括如下：(1)扩增HCV病毒各基因型的引物序列，其核苷酸序列如SEQ ID NO：1～2所示；(2)扩增HCV病毒各基因型的探针序列，其核苷酸序列如SEQ ID NO：3所示；(3)扩增人内参基因ERG基因的引物序列，其核苷酸序列如SEQ ID NO：4～5所示；(4)扩增人内参基因ERG基因的探针序列，其核苷酸序列如SEQ ID NO：6所示；其中，HCV探针SEQ ID NO：3序列的5’端标记FAM荧光基团，3’端标记MGB淬灭基团，人ERG基因探针SEQ ID NO：6序列的...

【技术特征摘要】
1.一种用于丙型肝炎病毒检测的核酸序列，其特征在于，包括用于特异检测7种基因型的HCV病毒RNA的引物和探针，具体包括如下：(1)扩增HCV病毒各基因型的引物序列，其核苷酸序列如SEQIDNO：1～2所示；(2)扩增HCV病毒各基因型的探针序列，其核苷酸序列如SEQIDNO：3所示；(3)扩增人内参基因ERG基因的引物序列，其核苷酸序列如SEQIDNO：4～5所示；(4)扩增人内参基因ERG基因的探针序列，其核苷酸序列如SEQIDNO：6所示；其中，HCV探针SEQIDNO：3序列的5’端标记FAM荧光基团，3’端标记MGB淬灭基团，人ERG基因探针SEQIDNO：6序列的5’端标记VIC荧光基团，3’端标记MGB淬灭基团。上述6条核酸序列在一次检测中共同使用。2.一种用于丙型肝炎病毒检测的试剂盒，其特征在于，该试剂盒包括如下试剂：(1)4*supermix：该PCR反应液中含有DNA聚合酶、Mg2+、PCR反应缓冲液、dATP、dCTP、dTTP和dGTP等；(2)ReverseTranscriltase；(3)DTT：300nM；(4)引物探针预混合液：将SEQIDNO：1～6所示的引物及探针各自用双蒸水溶解，每条引物的浓度为100μM，每条探针的浓度为10μM；1～6各核酸序列的母液以9:9:25:9:9:25的比例混合；(5)阳性对照：含有HCV基因型质粒和人ERG基因质粒的血清样本；(6)阴性对...

【专利技术属性】
技术研发人员：任绪义，虞闰六，罗英，宣文静，
申请(专利权)人：杭州迪安医学检验中心有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江,33