一种减毒Ｊｅｒｙｌ－Ｌｙｎｎ腮腺炎病毒株，其特征在于，ＳＨ基因和ＨＮ基因的Ｎ－末端包含图１所示的核酸序列。（*该技术在2014年保护过期，可自由使用*）
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种流行性腮腺炎疫苗，它含有从腮腺炎病毒的Jeryl-Lynn株衍生来的一种均一纯化分离株。
技术介绍
流行性腮腺炎基本上是一种儿童患疾病，通常只有轻微的临床症状。但某些病例中流行性腮腺炎感染的临床结果是严重的。例如，在英国流行性腮腺炎是15岁以下儿童患脑膜脑炎的最常见病因，也是儿童永久性感觉神经性耳聋的一个病因。尽管30～40％的自然腮腺炎感染不出现症状，但会累及唾液腺，而且在成年人群中，除了上面提到的神经性并发症外，流行性腮腺炎还会导致第一个三月期流产和睾丸炎，这些都是勿容置疑的事实，它使许多国家都施行了人群预防接种的计划。腮腺炎病毒属于副粘病毒科，它由大约15.3kb的负链单链基因组RNA构成，基因顺序是3′N-P-M-F-SH-HN-L5′(N为核衣壳蛋白，P为磷蛋白，M为基质蛋白，F为融合蛋白，SH为潜在表达(potentially expressed)的小疏水性蛋白，HN为血凝素神经氨酸酶，L为大蛋白)。在众多腮腺炎病毒株中，Jeryl-Lynn(B-水平，B-level)是一种减毒活变种，经序列分析，其特征在于F，P，HN，M基因。最近有两种腮腺炎病毒株已获准用于抗流行性腮腺炎的预防接种Urabe Am 9和Jeryl-Lynn。但Urabe Am 9在报道了一例无法接受的副作用水平后，于1992年9月被取消。Jeryl-Lynn病毒株多年来一直由Merck Sharp and Dohme以“MumpsVax”的商品名售出。它是从一例患流行性腮腺炎的病人身上取得临床标本，经鸡胚羊膜接种而得的(Proc.Soc.Exptl.Biol.Med.123(3)(1966))。Afzal等人最近报道(J.of Gen.Virology 1993 74 917)，在英国用作腮腺炎疫苗的Jeryl-Lynn病毒株事实上是JL-2和JL-5这两种病毒的混合物。Takeuchi等人，Virology(1991)181p364-366也报道说，不同的腮腺炎病毒株在SH基因水平上会产生实质性(substantial)的核苷酸序列变异。Afzal等人还强调，目前的“MumpsVax”疫苗商品是在严格控制的条件下制备出的，这些条件包括一个细胞库(cell bank)，有传代限度，以及倾向于在不同批的产品之间保持两种变异体的比例的条件。然而随着Jeryl-Lynn株的进一步传代，无法保证能维持上述两种变异体之间的这种平衡。而且也很难估计这两种变异体在任何一批疫苗里的比例。本专利技术人意外地鉴定出一种不同于Afzal等所述JL-2和JL-5的进一步的分离株。它们的不同通过对SH基因及其周围区域，特别是SH编码序列3′端以及NH基因5′端的基因间非翻译区段进行核苷酸序列分析确定。与现有腮腺炎疫苗商品相比，这种分离株在临床试验中能诱导出更高的零转化，并具有最高的腮腺炎抗体几何平均滴度。
技术实现思路
本专利技术提供一种减毒Jeryl-Lynn腮腺炎病毒株，它包含如图1所示的核苷酸序列。该序列编码HN基因的N末端以及SH基因。这种病毒株在本文中被称为SBB JL-1。本专利技术还提供了一种腮腺炎疫苗，它包括基本上均一(substantiallyhomogenous)的免疫原性Jeryl-Lynn分离株。所谓基本上均一是指，根据对上述序列区段的限定，所述分离株被另一种Jeryl-Lynn分离株污染程度的不超过10％，优选少于5％，更优选少于1％。在本专利技术一个优选实施方案中，该疫苗包含一个纯系Jeryl-Lynn分离株，即该疫苗未被其它在图1所示基因区段中有差异的Jeryl-Lynn腮腺炎病毒分离株污染。本专利技术的一个实施方案提供了一种疫苗，它包含无JL-2污染的纯化SBB JL-1。这种纯化分离株不会有亚毒株在不同批之间的潜在差异所带来的不便，它提供一种更易确保符合一贯质量标准(consistent quality guideline)。本专利技术的均一(homogenous)Jeryl-Lynn可以如下获得将MumpsVax商品在鸡胚成纤维细胞(CEF)中传代并筛选纯培养物，所述筛选可以是进行有限稀释并检查所得分离株，或者是进行单个空斑分离。其它合适的细胞系包括Vero细胞和MRC5细胞。这就要求存在能有效检测出群体中较小比例的已知病毒变异株的方法。这类检查方法包括由Chumakov等人提出的针对减毒脊髓灰质炎病毒的Maprec检测(WO 92/07958和PNAS 1991，88；199-203)，还有直接对病毒空斑进行测序和对病毒空斑进行差异杂交。优选本专利技术的疫苗还包含其它成分，诸如减毒麻疹病毒，和/或减毒风疹病毒，它们的灭活形式或亚单位形式，从而能提供抗麻疹和/或风疹感染的保护作用。三价的腮腺炎、麻疹和风疹疫苗在本领域已广为人知，本专利技术中的腮腺炎分离株也可以按照与现有那些疫苗相似的方式配制成三价疫苗。更进一步地，或者备选地，本专利技术的疫苗可包含减毒水痘-带状疱疹活病毒，以提供抗水痘(varicella，chicken pox)或带状疱疹(Zoster，shingle)的保护作用。在一优选实施方案中，水痘-带状疱疹病毒是Andre F E PostgraduateMED J.(1985)61(Suppl.4)，113-120或Veskari T等，Acta paediatr.Scand.801051-1057，1991公开的OKa株。优选本专利技术疫苗是四价的，能提供抗腮腺炎病毒，风疹麻疹病毒和水痘-带状疱疹病毒的保护作用。本专利技术还提供了制备全病毒疫苗的方法，例如在有合适稳定剂存在的条件下将病毒冻干，或将本专利技术的病毒株与合适的载体或佐剂混合。还优选将本专利技术病毒株配制在脂质体中或是用载体颗粒进行配制。更进一步地，或者备选地，该配制剂中还可加入免疫刺激物，如3-脱氧酰基化的单磷酰类脂A(3 de-O-acyl monophosphoryl Lipid A，Ribi Immunochem)或是皂素(saponin)衍生物QS21(Cambridge Biotech)。另一方面，本专利技术还提供了一种治疗人类流行性腮腺炎感染的方法，包括给有相应需要的病人施用免疫有效剂量的本专利技术疫苗。本专利技术疫苗的施用方式，可以是任一种能将免疫保护量的病毒株和疫苗中其它免疫原性成分运送给受试者的合适途径。但优选经肌肉或深部皮下途径的非肠道方式施用所述疫苗。还可以根据需要采用其它施用方式，如口服或经其它非肠胃途径，即皮内、鼻内、或静脉。此种疫苗的既能提供免疫保护作用又无毒的适当剂量，可以由本领域的技术人员很容易地测定出来，意即，本专利技术疫苗中所含有的、既引起免疫保护又无毒性的本专利技术病毒量，落在传统全病毒疫苗中的抗原有效量的范围之内。但应理解，任何具体病人的具体剂量水平将取决于多种因素，包括年龄，总体健康水平，性别和饮食；用药的时间，用药的途径；与施用的任何其它药物的协同效应；以及想要达到的保护反应程度。当然，如果需要的话，可以以适当的间隔重复施用。在单价疫苗中较典型的是每剂至少3.7log TCID50的病毒，而更常用的是每剂4.5log TCID50。在腮腺炎、麻疹、风疹三价疫苗中，腮腺炎病毒成分将达到4.8log TCID50左右，以补偿其它两种病素本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：奈杰尔·M·哈福德，布里格特·D·A·科劳，让·迪德莱兹，
申请(专利权)人：史密斯克莱·比奇曼生物公司，
类型：发明
国别省市：
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