用于检测抗CD3同二聚体的基于细胞的测定制造技术

本发明专利技术提供了一种用于鉴定和/或定量包含T细胞依赖性双特异性抗体(TDB)的组合物中抗CD3同二聚体的基于细胞的测定。在一些方面，将包含T细胞活化响应报告基因的本发明专利技术T细胞与所述TDB接触以检测抗CD3同二聚体的存在。还涵盖报告基因T细胞的组合物和试剂盒。

Cell based determination of anti CD3 two polymer

The present invention provides containing a T cell dependent bispecific antibody for identification and / or quantitative (TDB) cells based on the determination of the composition of the anti CD3 with the two mer. In some respects, the T cell that contains the T cell activation response reporter gene is contacted with the TDB to detect the presence of the anti CD3 two polymer. It also covers the composition and kits of the reported gene T cells.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于检测抗CD3同二聚体的基于细胞的测定相关申请的交叉引用本申请要求2015年5月28日提交的美国临时专利申请号62/167,761的权益，所述申请的公开内容出于所有目的以引用的方式整体并入本文。ASCII文本文件形式的序列表提交以下提交的ASCII文本文件形式的内容以引用的方式整体并入本文：序列表的计算机可读形式(CRF)(文件名：146392022940SEQLISTING.txt，记录日期：2016年5月26日；大小：17KB)。专利
本专利技术提供了用于分析多特异性抗体的制剂的方法，其中所述多特异性抗体的至少一个抗原结合片段结合CD3。在一些实施方案中，本专利技术提供了用于确定一种或多种多特异性抗体的组合物中抗CD3同二聚体的存在的方法，其中多特异性抗体的至少一个抗原结合片段结合CD3。专利技术背景T细胞依赖性双特异性(TDB)抗体被设计成结合在细胞上表达的靶抗原，并且通常通过结合T细胞受体的CD3e亚基而结合T细胞。双特异性抗体与靶抗原的胞外结构域和T细胞的CD3的结合导致T细胞募集至靶细胞，从而导致T细胞活化和靶细胞消减。在不存在靶细胞的情况下，单一抗CD3臂不能交联本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于检测包含T细胞依赖性双特异性抗体(TDB)的组合物中抗CD3同二聚体的方法，其中所述双特异性抗体包含靶抗原结合片段和CD3结合片段，所述方法包括使T细胞群体与所述组合物接触，其中所述T细胞包含编码可操作地连接至响应于T细胞活化的响应元件的报告基因的核酸，并且其中所述T细胞群体不包含所述靶抗原，其中所述报告基因的表达指示存在抗CD3同二聚体。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.05.28 US 62/167,7611.一种用于检测包含T细胞依赖性双特异性抗体(TDB)的组合物中抗CD3同二聚体的方法，其中所述双特异性抗体包含靶抗原结合片段和CD3结合片段，所述方法包括使T细胞群体与所述组合物接触，其中所述T细胞包含编码可操作地连接至响应于T细胞活化的响应元件的报告基因的核酸，并且其中所述T细胞群体不包含所述靶抗原，其中所述报告基因的表达指示存在抗CD3同二聚体。2.如权利要求1所述的方法，其中所述报告基因是萤光素酶、荧光蛋白、碱性磷酸酶、β内酰胺酶或β半乳糖苷酶。3.如权利要求2所述的方法，其中所述萤光素酶是萤火虫萤光素酶、海肾荧光素酶或纳米荧光素酶。4.如权利要求1-3中任一项所述的方法，其中所述响应于T细胞活化的响应元件是NFAT启动子、AP-1启动子、NFκB启动子、FOXO启动子、STAT3启动子、STAT5启动子或IRF启动子。5.如权利要求4所述的方法，其中所述响应于T细胞活化的响应元件包括来自NFAT、AP-1、NFκB、FOXO、STAT3、STAT5和IRF中任何一者或多者的T细胞活化响应元件。6.如权利要求1-5中任一项所述的方法，其中所述T细胞群体是CD4+T细胞或CD8+T细胞的群体。7.如权利要求1-5中任一项所述的方法，其中所述T细胞群体是JurkatT细胞或CTLL-2T细胞的群体。8.如权利要求1-7中任一项所述的方法，其中T细胞群体与包含浓度范围为0.01ng/mL至50ng/mL的所述双特异性抗体的组合物接触。9.如权利要求1-8中任一项所述的方法，其中所述报告基因在使所述细胞与所述组合物接触后1、2、3、4、5、6、7、8、12、16、20或24小时中的任何一者或多者之后检测。10.用于定量包含TDB的组合物中抗CD3同二聚体抗体的量的方法，其中所述TDB包含靶抗原结合片段和CD3结合片段，所述方法包括使T细胞群体与所述组合物在一种或多种所述TDB浓度下接触，其中所述T细胞包含编码可操作地连接至响应于T细胞活化的启动子的报告基因的核酸，并且其中所述T细胞群体不包含所述靶抗原，将作为抗体浓度函数的所述报告基因的所述表达与通过使所述T细胞与不同浓度的纯化抗CD3同二聚体接触产生的标准曲线关联。11.如权利要求10所述的方法，其中所述报告基因是萤光素酶、荧光蛋白、碱性磷酸酶、β内酰胺酶或β半乳糖苷酶。12.如权利要求11所述的方法，其中所述萤光素酶是萤火虫萤光素酶、海肾荧光素酶或纳米荧光素酶。13.如权利要求10-12中任一项所述的方法，其中所述响应于T细胞活化的响应元件是NFAT启动子、AP-1启动子、NFκB启动子、FOXO启动子、STAT3启动子、STAT5启动子或IRF启动子。14.如权利要求13所述的方法，其中所述响应于T细胞活化的响应元件包括来自NFAT、AP-1、NFκB、FOXO、STAT3、STAT5和IRF中任何一者或多者的T细胞活化响应元件。15.如权利要求10-14中任一项所述的方法，其中所述T细胞群体是CD4+T细胞或CD8+T细胞的群体。16.如权利要求10-14中任一项所述的方法，其中所述T细胞群体是Jurkat...

【专利技术属性】
技术研发人员：K·卡里，
申请(专利权)人：基因泰克公司，
类型：发明
国别省市：美国,US