一种MFG‑E8的检测方法技术

本发明专利技术提供了一种MFG‑E8的检测方法，包括：1)制备检测样品及标准品；2)将抗人MFG‑E8蛋白小鼠单克隆抗体进行包被吸附于包被板中；3)将所述检测样品和标准品与包被的抗人MFG‑E8蛋白小鼠单克隆抗体进行接触，再分别加入抗人MFG‑E8蛋白绵羊多克隆抗体、辣根过氧化物酶标记的兔抗绵羊IgG抗体以及发光底物进行接触，避光反应后，测定化学发光值并计算检测样品中MFG‑E8含量。本发明专利技术检测方法具有精密度好、检测限低、灵敏度高、线性范围宽等特点，均可满足临床应用的要求。

A detection method of MFG E8

【技术实现步骤摘要】
一种MFG-E8的检测方法
本专利技术属于免疫测定
，尤其涉及一种MFG-E8的检测方法。
技术介绍
乳脂肪球表皮生长因子Ⅷ(milkfatglobuleepidermalgrowthfactor8,MFG-E8)最初确定为哺乳期乳腺的产物，由活化的巨噬细胞和未成熟树突状细胞分泌。MFG-E8作为一种桥联分子与凋亡细胞表面的磷脂酰丝氨酸结合发挥作用，增强巨噬细胞和树突状细胞对凋亡细胞的吞噬，并调节炎症反应的发生，参与自身免疫性疾病、炎性疾病、肿瘤等的发生发展。研究显示MFG-E8能缓解系统性红斑狼疮的组织损伤，同时在慢性阻塞性肺疾病凋亡清除中也起到重要作用。目前主要采用的是酶联免疫吸附试验(ELISA)检测MFG-E8，但是ELISA的检测能力有限，具有敏感性不足等缺点。
技术实现思路
针对现有技术中的上述问题，本专利技术的主要目的在于提供一种MFG-E8的检测方法，能有效检测MFG-E8的含量，且具有灵敏度高、检测限低以及线性范围宽等优点。为了达到上述目的，本专利技术采用如下技术方案：一种MFG-E8的检测方法，所述方法包括：1)制备检测样品及标准品；2)将抗人MFG-E8蛋白小本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种MFG‑E8的检测方法，其特征在于：所述方法包括：1)制备检测样品及标准品；2)将抗人MFG‑E8蛋白小鼠单克隆抗体进行包被吸附于包被板中；3)将所述检测样品和标准品与包被的抗人MFG‑E8蛋白小鼠单克隆抗体进行接触，再分别加入抗人MFG‑E8蛋白绵羊多克隆抗体、辣根过氧化物酶标记的兔抗绵羊IgG抗体以及发光底物进行接触，避光反应后，测定化学发光值并计算检测样品中MFG‑E8含量。

【技术特征摘要】
1.一种MFG-E8的检测方法，其特征在于：所述方法包括：1)制备检测样品及标准品；2)将抗人MFG-E8蛋白小鼠单克隆抗体进行包被吸附于包被板中；3)将所述检测样品和标准品与包被的抗人MFG-E8蛋白小鼠单克隆抗体进行接触，再分别加入抗人MFG-E8蛋白绵羊多克隆抗体、辣根过氧化物酶标记的兔抗绵羊IgG抗体以及发光底物进行接触，避光反应后，测定化学发光值并计算检测样品中MFG-E8含量。2.根据权利要求1所述的MFG-E8的检测方法，其特征在于：所述步骤1)中，所述标准品为1％牛血清白蛋白稀释重组人MFG-E8抗原得到的稀释液。3.根据权利要求1所述的MFG-E8的检测方法，其特征在于：所述步骤1)中，所述检测样品包括血清样本。4.根据权利要求3所述的MFG-E8的检测方法，其特征在于：所述血清样本的制备方法包括：将静脉血离心，分离血清后置于-80℃保存待用。5.根据权利要求1所述的MFG-E8的检测方法，其特征在于：所述步骤2)中，所述进行包被包括如下步骤：将抗人MFG-E8蛋白小鼠单克隆抗体50ul加于白色化学发...

【专利技术属性】
技术研发人员：崔天盆，熊银，李妹，
申请(专利权)人：武汉市中西医结合医院武汉市第一医院，
类型：发明
国别省市：湖北,42